病毒灭活冷沉淀对加快痔瘘疾病术后创面愈合的疗效观察

冯秋斌 赵苏丹 王艳红 刘占彦 李会来 赵琦 张娜

病毒灭活冷沉淀对加快痔瘘疾病术后创面愈合的疗效观察

冯秋斌 赵苏丹 王艳红 刘占彦 李会来 赵琦 张娜

目的 探讨病毒灭活冷沉淀在肛周疾病术后的疗效观察。方法 选取收治的肛周疾病术患者215例，随机分为对照组(n=112)和试验组(n=103)，对照组手术后的创面使用常规的药物进行处理，试验组手术后的创面则是使用病毒灭活冷沉淀的方式。分析术后创面愈合时间的长短与治疗方法之间的关系。结果 对照组患者术后平均愈合时间(25.8±3.5)d，试验组患者术后创面平均愈合时间(20.1±2.2)d;试验组与对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。试验组肛瘘患者术后创面平均愈合时间为(20.18±3.86)d，对照组肛瘘患者术后创面平均愈合时间为(24.44±5.04)d，2组比较差异有统计学意义(P＜0.01)。对于实施剥离手术的痔疮患者，实施术后创面外用冷沉淀方法的试验组患者愈合需要(10.19±2.32)d，对照组患者创面平均愈合时间(12.51±2.23)d，2组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 对痔瘘疾病术后患者实施病毒灭活冷沉淀治疗具有较好的疗效，患者术后创面愈合较快，值得临床应用。

病毒灭活冷沉淀;肛周脓肿;肛瘘;痔疮

近年来，国内外学者十分重视冷沉淀的应用研究，冷沉淀是一种新鲜冰冻血浆中提纯的血液成分制品，主要成分包括凝血因子Ⅷ、纤维黏连蛋白以及纤维蛋白原等。主要用于儿童和轻度成人的出血预防和治疗中，有报道用冷沉淀外敷痔瘘疾病术后创面取得良好效果［1］。本文采用病毒灭活的冰冻血浆制备的冷沉淀外敷痔瘘疾病术后创面，观察冷沉淀经过病毒灭活后的疗效，报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取秦皇岛市中医医院2014年5～10月收治的肛周疾病术患者215例，患者随机分为对照组和试验组。对照组112例，男63例，女49例;年龄28～65岁，平均年龄(50.3±2.8)岁;试验组103例，男 50例，女 53例;年龄 21～85)岁，平均年龄(51.2±11.2)岁。患者患病类型主要包括肛周脓肿、低位肛瘘、高位肛瘘、外痔以及混合痔等，肛周脓肿用药为油纱布、低位肛瘘用药为九华膏、高位肛瘘用药为九一丹，外痔和混合痔用药为玉红生肌膏。2组患者性别比、年龄、患病类型及用药等一般资料比较，差异无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 单次小包装病毒灭活冷沉淀液的制备 由秦皇岛市中心血站制作提供的的病毒灭活冷沉淀，取回后在37℃水浴条件融化，用无菌注射器抽出后注射到无菌试管中，分成小包装(3～4 ml)，一袋冷沉淀可以分装6～8只试管，立即复冻;使用前取出冷沉淀于37℃水浴箱内复融。

1.3 方法 试验组在常规换药程序结束(覆盖纱布)前，用无菌棉球或纱布条蘸取病毒灭活冷沉淀液均匀涂抹于创伤面即可，1次/d，随常规换药进行，手术完毕后即可使用。对照组在患者患处创面位置将敷料敷上，或者直接将相关药物涂于纱布上，再将纱布敷于创面位置处，1次/d。

1.4 观察指标 观察2组患者的创面愈合平均时间、治疗情况，分析应用病毒灭活冷沉淀在肛周疾病术后的临床治疗效果。

1.5 统计学分析 应用SPSS 17.0统计软件，计量资料以±s表示，采用t检验，计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 肛周脓肿患者平均愈合时间比较 本研究中肛周脓肿患者43例，其中试验组23例，对照组20例。对照组患者术后平均愈合时间(25.8±3.5)d，试验组患者术后创面平均愈合时间(20.1±2.2)d;试验组与对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。

2.2 肛瘘患者术后创面愈合时间比较 2组比较差异有统计学意义(P＜0.01)。见表1。

表1 肛瘘患者术后创面愈合时间比较d，±s

表1 肛瘘患者术后创面愈合时间比较d，±s

患病类型 试验组(n=103) 对照组(n=112) t值 P值低位肛瘘17.86±2.95 21.56±3.20 4.36 ＜0.01高位肛瘘 21.06±3.80 28.44±4.38 5.26 ＜0.01合计20.18±3.86 24.44±5.04 4.42 ＜0.01

2.3 痔疮患者创面平均愈合时间时 对于实施剥离手术的痔疮患者，实施术后创面外用冷沉淀方法的试验组患者愈合需要(10.19±2.32)d，对照组患者借助玉红生肌膏处理创面位置，创面平均愈合时间(12.51±2.23)d。2组比较差异有统计学意义(P＜0.01)。见表2。

表2 痔疮患者创面平均愈台时间比较d，±s

表2 痔疮患者创面平均愈台时间比较d，±s

患病类型 试验组(n=103) 对照组(n=112) t值 P值外痔8.59±1.56 10.95±1.82 4.52 ＜0.01混合痔 11.95±1.64 13.87±1.58 3.91 ＜0.01合计10.19±2.32 12.51±2.23 4.741 ＜0.01

3 讨论

3.1 冷沉淀的作用机制 冷沉淀主要含有5种成分:FXⅢ、纤维粘连蛋白、vWF、Fg、和 FⅧ［2］。各种成分的作用机制，FⅧ因子参与内源性凝血的过程，能够形成内源性凝血活酶。Fg纤维蛋白原参与血液凝固，并且能够通过多种作用方式与生物的组织进行结合，进而将血液凝块固在胶原上;由于纤维蛋白所降解产物在一定条件下具有可重新溶解性质，因此凝固的血块进行液化后，能够有效的防止局部出现持续性的血栓。Fn纤维结合蛋白能够有效的提高炎症区白细胞的活性，并能够在一定的程度上增强单核-巨噬细胞对受损组织碎屑、免疫复合物、细胞和其他有害物质的清除能力［3］;同时Fn纤维结合蛋白在细胞的上皮化和细胞的移动上具有一定的支架作用，除此之外，Fn纤维结合蛋白对细胞的生成活性还具有一定的促进作用，同时对上皮细胞的进入“分裂增生期”和DNA的合成也具有一定的促进作用。Fn还参与机体的免疫的调控作用，可以与机体内的纤维蛋白、细菌以及胶原碎片等进行有效的结合，净化伤口，修复破损的组织。vWF因子血小板通过vWF粘附到胶原上，从而vWF因子便参与到了凝血的过程中。

3.2 冷沉淀的制备 传统的冷沉淀的手工制备方法:在全血采集后的6 h以内将血液进行分离制备成新鲜的冰冻血浆(FFP)，然后将FFP放入40℃的冰箱中，放置时间控制在14～18 h，在血浆的融化过程中进行轻轻的摇动，当冰渣剩余量在60 ml左右时将血浆取出，然后在40℃的温度下和2 000 g进行离心15 min，然后再无菌的条件下将血浆进行移除，留下未溶解的白色胶状物约20 ml左右，最后将其即刻存放于零下30℃的冰箱中，得到的就是冷沉淀［4］。随着储存时间的推移，FⅧ含量也会发生一定的变化，通过统计和分析发现，储藏的前6个月时间段的FⅧ含量明显高于6～12个月时间段的FⅧ含量［4］。

3.3 冷沉淀的病毒灭活 冷沉淀的病毒灭活的方法有有机溶剂法(SD)［5］，使用该方法对病毒进行灭活，主要是在冷沉淀中加入含量为2%的磷酸三丁酯(TnBP)，然后再在37℃的温度环境下放置4 h，或者1%TnBP和1%Triton X-45在37℃ 4 h。经此法灭活后，FⅧ、vWF:Rco(瑞斯托霉素辅因子)和有凝血活性的Fg的平均回收率均一般在93%以上，研究发现，使用SD方法进行病毒灭活，不仅能够有效的提高病毒的灭活性能，同时还能有效的提高冷沉淀的Fg、vWF和 FⅧ的活性［6］。

3.4 去白细胞冷沉淀凝血因子 冷沉淀是1～50℃的温度环境下不会溶解的新鲜冰冻血浆的白色沉淀物，该白色沉淀物只有在加热至37℃的环境下才会进行溶解，冷沉淀主要含有的成分是纤维结合蛋白(Fn)、ⅩⅢ因子、vW因子、纤维蛋白原以及Ⅷ因子等。在二十世纪六十年代冷沉淀就已经被人们成功的研发和进行应用，因为冷沉淀中含有丰富的Ⅷ因子，因此冷沉淀最早被运用于治疗血友病，并且冷沉淀中含有的Fg和FⅧ因子对其治疗的效果有着直接的影响。

3.5 肛肠科疾病通常都是属于二级愈合，二类切口［7］。肛肠科的伤口的恢复过程大致可以分为三个阶段:(1)炎性期，(2)纤维增生期，(3)上皮覆盖期;全过程大致需要 11 ～30 d［8，9］。(1)早期伤口以炎性渗出为主，此期应用冷沉淀，其中的纤维结合蛋白(Fn)能够参与机体免疫的调控，它能与某些细菌、纤维蛋白、胶原碎片以及一些衰老的细胞组织碎片等进行结合，并促进吞噬细胞吞噬免疫复合物，使伤口得到净化，同时纤维蛋白作为一种趋化因子，还能够在一定程度上有效的提高白细胞的活性，增强单核-巨噬细胞吞噬功能，因此能起到抗感染、抑制细菌的作用，为组织修复创造条件［10］。(2)中期伤口分泌物极少，以肉芽组织增生为主。(3)后期的伤口创面在基本是被肉芽组织填平修复的，在伤口修复的后期创面的上皮细胞会逐渐的向创面的中心进行靠拢，最后覆盖整个伤口创面，达到创口愈合的效果［11］。此期应用冷沉淀，冷沉淀中的纤维结合蛋白(Fn)可在肉芽表面构成网状结构，且较为坚硬，为上皮细胞定居和固着提供坚实的物质基础和结构基础，能够粘附于新生和伸展的上皮细胞和邻近的下层组织位置，使上皮细胞在受到大量的糖蛋白和胶原蛋白的影响下，出现分化、移动、附着的现象，同时其也会在正常基膜与创缘桥接并向创面爬行生长，连续的细胞层由此形成，上皮组织完成愈合。

3.6 冷沉淀的创面愈合原理 冷沉淀主要成分是凝血因子、纤维蛋白原和纤维粘连蛋白，有关报道显示，严重烧伤患者伤后血浆纤维粘连蛋白迅速降低，其含量与创面的愈合具有一定的相关性［11］。除此之外，纤维结合蛋白中的成分可以有效的促进创伤组织修复、愈合以及促进肉芽组织再生、减少炎性反应等。据有关文献报道显示，冷沉淀通过它所包含的纤维粘连蛋白的生物活性，在创面上能形成坚固的保护膜，减轻创面炎症，促进创面吸收，从而减少渗出达到抑菌作用［12］。在应用冷沉淀治疗中需要注意的是部分患者会出现过敏反应，症状轻微，但是一旦反应较大，要立即停止应用改为其他止血用品。

冷沉淀中的纤维结合蛋白(Fn)在痔瘘手术创面修复全过程有着其他药剂不可比拟的独到之处，并且冷沉淀换药对于伤口疼痛优于其他药物，患者感觉良好无任何不适［13］。本研究在冷沉淀的应用范围及制作工艺上有所创新:血站为了保证FⅧ因子和Fg的含量，在制作冷沉淀时不做病毒灭活处理;如果冷沉淀外用，做病毒灭活处理后，既不影响疗效，又最大程度的防范了血源性疾病的传播和同种免疫反应［14］。

综上所述，冷沉淀作为血液制剂的副产品，简单易得、疗效显著，如果外用于临床，可要求血站做病毒灭活处理，最大限度的保障医疗安全。由此可见，冷沉淀对皮下组织和肌肉层的治疗效果较为明显，可以广泛的应用于临床的应用中。

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R 632.5

A

1002-7386(2015)21-3279-03

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066000 河北省秦皇岛市中医医院(冯秋斌、赵苏丹、王艳红、刘占彦、赵琦、张娜);河北省抚宁县中医医院(李会来)

2015-04-28)