慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者的血小板活化程度分析

王道峰　何世贵　闻寅　朱晓兰

(扬州大学附属泰兴市人民医院呼吸内科， 江苏泰兴　225400)

·论著·

慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者的血小板活化程度分析

王道峰何世贵闻寅朱晓兰

(扬州大学附属泰兴市人民医院呼吸内科， 江苏泰兴225400)

摘要目的：探讨血小板活化在慢性阻塞性肺疾病急性加重期(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease, AECOPD)的变化及其对患者预后的影响。方法： 纳入AECOPD患者80例，其中合并肺动脉高压40例(中重度22例，轻度18例)，合并呼吸衰竭33例；以同期30例健康体检者作为对照。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测受试者血液中血小板活化因子(PAF)、11-脱氢血栓素B2(11-DH-TXB2)、P-选择蛋白(P-selectin, CD62P)的水平。结果：AECOPD组患者血液中PAF、11-DH-TXB2、CD62P高于健康对照组(P<0.05)。AECOPD合并肺动脉高压患者血液中的PAF、11-DH-TXB2、CD62P水平高于无肺动脉高压患者(P<0.05)；中重度肺动脉高压患者PAF、11-DH-TXB2、CD62P水平高于轻度肺动脉高压患者(P<0.05)；合并呼吸衰竭患者PAF、11-DH-TXB2、CD62P水平高于无呼吸衰竭患者(P<0.05)。预后相关分析发现，1年内发作次数为2次及2次以上患者血液中的PAF、11-DH-TXB2、CD62P水平高于发作次数少于2次的患者(P<0.05)。结论：AECOPD患者的血小板活化程度较高，其中合并肺动脉高压和(或)低氧血症者表现尤为明显；血小板活化程度与COPD急性加重复发密切相关。

关键词慢性阻塞性肺疾病急性加重期；肺动脉高压；呼吸衰竭；血小板活化

Analysis of Degree of Platelet Activation in Patients with Acute Exacerbation of Chronic Obstructive Pulmonary DiseaseWANGDaofengHEShiguiWENYinZHUXiaolanDepartmentofRespiratoryMedicine,TaixingPeople’sHospitalAffiliatedtoYangzhouUniversity,Taixing225400,China

AbstractObjective：To explore the change of the indexes of platelet activation in patients with acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease (AECOPD) and its effect on patients’ prognosis. Methods:Eighty patients with AECOPD were enrolled. Among them, there were 40 cases accompanied by pulmonary hypertension (22 moderate to severe cases, 18 mild cases) and thirty three cases accompanied by respiratory failure. And thirty healthy controls were included. Platelet activation factor (PAF), 11-dehydro-thromboxane B2 (11-DH-TXB2), and P-selectin (CD62P) levels were detected by ELISA method. Results: PAF, 11-DH-TXB2 and CD62P levels in AECOPD group were significantly higher than those in healthy control group (P<0.05). And PAF, 11-DH-TXB2, and CD62P levels in patients with AECOPD accompanied by pulmonary hypertension were obviously higher than those in AECOPD patients without pulmonary hypertension (P<0.05). And PAF, 11-DH-TXB2 and CD62P levels in AECOPD patients accompanied by moderate to severe pulmonary hypertension, were obviously higher than those in patients accompanied by mild pulmonary hypertension (P<0.05). Furthermore, PAF, 11-DH-TXB2 and CD62P levels in AECOPD patients accompanied by respiratory failure were obviously higher than those in AECOPD patients without respiratory failure (P<0.05). Analysis of prognostic correlation factors indicated that PAF, 11-DH-TXB2 and CD62P levels in the patients who suffered two or more times from AECOPD per year were higher than those in patients who suffered less than two times (P<0.05). Conclusions: The degree of platelet activation in patients with AECOPD is higher, especially in the patients accompanied by pulmonary hypertension and/or hypoxemia. The degree of platelet activation is closely correlated with the recurrence of AECOPD.

Key WordsAcute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease;Pulmonary hypertension;Respiratory failure; Platelet activation

慢性阻塞性肺疾病急性加重(acute exacer-bation of chronic obstructive pulmonary disease，AECOPD)的机制复杂。研究[1]发现，在多种炎性介质的共同作用下，血小板活化导致AECOPD肺部炎性反应及气流受限进一步加重，促进了慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)的不断发展，使患者并发呼吸衰竭、肺动脉高压及慢性肺源性心脏病，严重影响COPD患者的病情进展及预后。近年关于AECOPD患者血小板活化状态的研究多集中在对血小板活化因子(platelet activation factor，PAF)及P-选择蛋白(P-selectin，CD62P)的测定，且研究结果颇具争议[2]；对于11-脱氢血栓素B2(11-dehydro-thromboxane B2，11-DH-TXB2)，多只测定尿液中的含量，而血浆中的11-DH-TXB2水平鲜有报道。因此，本研究拟测定AECOPD患者血液中血小板活化相关指标(PAF、11-DH-TXB2、CD62P)的含量，探讨上述指标的变化及其与AECOPD患者预后的相关性，为AECOPD的临床诊治靶点选择提供参考。

1资料与方法

1.1一般资料参照2011年版中华医学会呼吸病学会《慢性阻塞性肺疾病诊治指南》的AECOPD诊疗标准[3]，选择2012年10月—2013年10月在我院呼吸内科住院的AECOPD患者共80例，其中男性47例，女性33例；年龄58~76岁，平均年龄(65.11±11.78)岁。所有患者在吸氧及抗感染等常规治疗前留取血样，测定肺动脉压。选择30例本院健康体检者作为对照，男性16例，女性14例；年龄57~75岁，平均年龄(62.67±11.62)岁。两组间年龄及性别等差异无统计学意义，具有可比性。

根据肺动脉压的检测结果，将AECOPD患者分为单纯AECOPD组40例(肺动脉压<30 mmHg，1 mmHg=0.133 kPa)、AECOPD合并轻度肺动脉高压组18例(30 mmHg≤肺动脉压<41 mmHg)及AECOPD合并中重度肺动脉高压组22例(肺动脉压≥41 mmHg)；按动脉血氧分压的测定结果将80例AECOPD患者分为呼吸衰竭组33例(氧分压<60 mmHg)、无呼吸衰竭组47例(氧分压≥60 mmHg)。

1.2观察指标及测定方法

1.2.1血浆PAF、11-DH-TXB2、CD62P的测定清晨空腹时采集患者静脉全血5 mL(枸橼酸钠抗凝，1∶9)，4 000 r/min离心15 min (r=16.3 cm)，收集血浆并贮存于-80℃冰箱。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血浆中PAF、11-DH-TXB2、CD62P的浓度。PAF检测试剂盒及CD62P检测试剂盒购自研域(上海)化学试剂有限公司，11-DH-TXB2检测试剂盒购自上海基免实业有限公司。依据试剂盒说明书建立浓度标准曲线，使用酶标分析仪测定光密度(D)值，根据标准曲线，将测得的D值转化为浓度值。

1.2.2氧分压的检测使用肝素抗凝管采集AECOPD患者桡动脉或股动脉血2 mL，用自动血气分析仪检测动脉血气指标。

1.2.3肺动脉压的检测采用经胸多普勒超声心动图(心超)测定肺动脉压力。在心超检测出的三尖瓣反流束引导下用连续多普勒超声测量三尖瓣最大反流流速及跨瓣压差(ΔP)，即先用脉冲多普勒超声或连续多普勒超声测量三尖瓣反流速度，根据多普勒公式获得右房与右室间收缩期最大压力差(ΔP)，此ΔP加上右房压即等于右室收缩压，而一般情况下右室收缩压等于肺动脉收缩压。右房压的确定常用经验估测方法：小儿为5 mmHg，健康成人为8 mmHg，伴右心衰者为10 mmHg，估测肺动脉收缩压为ΔP+8 mmHg。

2结果

2.1两组受试者血小板活化相关指标的对比AECOPD组患者PAF、11-DH-TXB2、CD62P水平高于健康对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1　AECOPD组与健康对照组血小板活化指标的比较

注：与健康对照组相比，*P<0.05

2.2AECOPD患者亚组分析

2.2.1是否合并呼吸衰竭呼吸衰竭组患者PAF、11-DH-TXB2、CD62P水平明显高于无呼吸衰竭组患者(P<0.05)。见表2。

2.2.2是否合并肺动脉高压合并肺动脉高压的AECOPD患者PAF、11-DH-TXB2、CD62P水平高于无肺动脉高压AECOPD患者的水平，而这些指标在中重度肺动脉高压患者中的水平高于轻度肺动脉高压患者，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表2。

2.3AECOPD患者预后分析1年内发作≥2次患者的PAF、11-DH-TXB2、CD62P水平较1年内发作<2次患者明显升高(P<0.05)。见表3。

表2　AECOPD是否合并呼吸衰竭及肺动脉高压组血小板活化指标比较

注：与无呼吸衰竭组相比，*P<0.05；与无肺动脉高压组相比，▲P<0.05；与轻度肺动脉高组压相比，ΔP<0.05

表3　1年内发作不同次数患者组血小板活化指标比较

注：与1年内发作<2次相比，*P<0.05

3讨论

COPD的本质是气道、肺实质及肺血管的慢性炎性反应，以气流受限不完全可逆且呈进行性发展为主要表现。近年来，血小板活化在AECOPD的发生、发展中的作用逐渐被人们认识[4]。血小板活化因子PAF能通过对血小板和白细胞的趋化作用、释放氧自由基、调节血清基质金属蛋白酶-1和金属蛋白酶-1组织抑制因子间的平衡等多种途径参与COPD的慢性炎性反应[5-6]；而CD62P、11-DH-TXB2作为临床判断血小板活化状态的重要指标，在促进血液高凝状态、血栓形成及肺动脉高压形成中发挥重要作用[7-9]。因此，研究AECOPD与血小板活化的关系，对于明确AECOPD的发生机制、更好地认识AECOPD、寻找新的治疗手段、改善预后具有重要意义。

本研究选择PAF、11-DH-TXB2、CD62P作为血小板活化的检测指标，结果显示，AECOPD组PAF、11-DH-TXB2、CD62P水平高于健康对照组，合并肺动脉高压组PAF、11-DH-TXB2、CD62P水平则进一步升高；发生呼吸衰竭时，无论是否存在二氧化碳潴留，其血小板相关指标水平也显著高于未合并呼吸衰竭组。这些结果表明AECOPD患者存在血小板功能的异常活化，提示缺氧和血管痉挛可加重血小板活化，而活化的血小板所引发的各种炎性介质的释放进一步导致相关并发症的发生。AECOPD患者体内血小板活化后，血栓素B2(thromboxane B2, TXB2)合成及释放增加，强烈收缩血管及支气管平滑肌，引起黏液分泌增加、微血管渗出增多，同时促进平滑肌细胞增生、肥大，加重气道狭窄和阻塞，导致气道结构重塑，直接或间接影响患者的心肺功能，加重肺动脉高压。2011慢性阻塞性肺疾病全球倡议(GOLD)首次提出关注COPD不仅要控制目前症状，还要评估未来急性加重的风险，将上一年发生2次或以上的急性加重或第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%pred)<50%列为高风险患者[10]。据此，本研究将COPD 1年内急性发作≥2次与1年内发作<2次的患者进行比较，发现PAF、11-DH-TXB2、CD62P水平在两组间有显著差异，提示反复发作的AECOPD患者血小板活化程度更高，同时提示更差的预后，需要临床积极处理。

本研究发现，AECOPD患者存在异常血小板活化，当合并呼吸衰竭及肺动脉高压时，血小板活化程度更高。检测AECOPD患者血浆PAF、11-DH-TXB2、CD62P对肺动脉高压形成的判断和预防具有重要意义。尽早判断AECOPD患者的血小板活化状态，可以避免或减少微小血栓形成，延缓呼吸衰竭、肺动脉高压的发生，还可间接判断AECOPD患者的全身状态，适时进行干预，这对纠正缺氧、控制肺动脉高压、减少肺心病等并发症以及改善患者的生存质量及预后、降低病死率有重要意义。

综上所述，本研究提示血小板活化与COPD预后密切相关，为AECOPD的治疗开辟了新的思路。抑制血小板过度活化的治疗、抗凝治疗在AECOPD患者中有着较好的应用前景。

参考文献

[ 1 ]Miller AC, Gladwin MT. Pulmonary complications of sickle cell disease[J].Am J Respir Crit Care Med,2012,185(11):1154-1165.

[ 2 ]Ying-fang S, Jing-fang H, Huan-zhang L, et al. Effect of platelet-activating factor on cell proliferation & NF-kappaB activation in airway smooth muscle cells in rats[J].Indian J Med Res,2007,126(2):139-145.

[ 3 ]孙丽娜,陈亚红,常春,等.新病情评估法对慢性阻塞性肺疾病稳定期患者药物治疗方案的影响[J].中华医学杂志,2015,95(8):570-576.

[ 4 ]李萍,葛利军,杨朝,等.血小板活化因子及其乙酰水解酶在COPD相关肺动脉高压中的作用[J].国际呼吸杂志,2014,34(21):1673-1678.

[ 5 ]Cui H, Liu L, Wei Z, et al. Clinical value of mean platelet volume for impaired cardiopulmonary function in very old male patients with chronic obstructive pulmonary disease[J].Arch Gerontol Geriatr,2012,54(2):e109-e112.

[ 6 ]Maclay JD, McAllister DA, Johnston S, et al. Increased platelet activation in patients with stable and acute exacerbation of COPD[J].Thorax,2011,66(9):769-774.

[ 7 ]Biljak VR, Pancirov D, Cepelak I, et al. Platelet count, mean platelet volume and smoking status in stable chronic obstructive pulmonary disease[J].Platelets,2011,22 (6):466-470.

[ 8 ]Harrison MT,Short P,Williamson PA,et al.Thrombocytosis is associated with increased short and long term mortality after exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease: a role for antiplatelet therapy?[J].Thorax,2014,69(7):609-615.

[ 9 ]Malerba M, Clini E, Malagola M, et al. Platelet activation as a novel mechanism of atherothrombotic risk in chronic obstructive pulmonary disease[J].Expert Rev Hematol, 2013,6(4):475-483.

[10]Pan L, Yang YH, Dong DQ.Integrin-associated proteins in blood plasma of patients with acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease[J]. Zhonghua Jie He He Hu Xi Za Zhi,2010,33(4):265-267.

中图分类号R 563

文献标识码A