HPLC法测定银黄解毒胶囊中蒙花苷的含量

宋光胜，廉淑伟

(1.济南市市中区食品药品监督管理局，山东济南250001;2.平阴县人民医院，山东平阴250400)

HPLC法测定银黄解毒胶囊中蒙花苷的含量

宋光胜1，廉淑伟2

(1.济南市市中区食品药品监督管理局，山东济南250001;2.平阴县人民医院，山东平阴250400)

摘要:目的建立高效液相色谱法测定银黄解毒胶囊中蒙花苷的含量。方法采用高效液相色谱法，十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱;流动相:甲醇－水－冰醋酸(26∶23∶1) ;紫外检测器检测。结果在8.08～56.56 μg范围内蒙花苷峰面积与进样量线性关系良好，r=0.999 8;样品加样回收率为99.40% (n=6)，RSD为0.92%。结论所建立的方法准确可行，重复性好，可有效控制银黄解毒胶囊的质量。

银黄解毒胶囊是一医院制剂，是由野菊花、茯苓、金银花、甘草、板蓝根、山豆根、射干、连翘、黄芩、栀子、黄柏、苍术、山慈姑等13味中药组方而制成的胶囊剂。该制剂具有滋阴清热，解毒利湿功能。用于病毒引起的带状疱疹、单纯性疱疹等症。为提高医院制剂的质量标准，以蒙花苷为指标，采用高效液相色谱(HPLC)法，测定本制剂中野菊花的含量。

1　仪器与试药

1.1仪器LC－15C高效液相色谱仪(日本岛津) ; SPD－15C紫外检测器(日本岛津) ; SL－250超声波清洗器(220 V/50 Hz) ; Shimadzu电子分析天平。

1.2试剂与样品化学试剂均为色谱纯;蒙花苷对照品(批号: 111528－201308，中国食品药品检定研究院) ;银黄解毒胶囊(自制，批号: 20150121、20150123、20150125)。

2　方法与结果

2.1色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，色谱柱为Diamonsil C18(4.6 mm ×250 mm，5 μm)柱;以甲醇－水－冰醋酸(26∶23∶1)为流动相［1］;检测波长为334 nm［2］。按蒙花苷峰计算理论板数应不低于3 000。

2.2对照品溶液的制备取适量蒙花苷对照品，精密称定，加甲醇制成每1 mL含30 μg的溶液，摇匀，即得。

2.3样品供试液的制备［3］取本品内容物1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇100 mL，称定重量，加热回流3 h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液5 mL，加甲醇至10 mL，摇匀，即得。

2.4阴性对照溶液的制备取处方中药材，除去野菊花，其余药材按处方量和制备工艺，制成阴性对照样品，按“2.3”项下方法，制备成阴性对照溶液。

2.5测定法精密量取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各10 μL，分别注入液相色谱仪，测定色谱图，见图1。从色谱图可见，其他成分对蒙花苷的测定无干扰，符合测定要求。

图1　HPLC色谱图A.蒙花苷对照品; B.阴性对照样品; C.样品

2.6线性关系考察对照品储备液制备:精密称取蒙花苷对照品适量，加甲醇制成每1 mL含0.202 mg的对照品贮备液。精密量取上述对照品贮备液1、2、3、4、5、6、7 mL，置25 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，各精密量取10 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，以峰面积为纵坐标(Y)，以蒙花苷进样量为横坐标(X)，进行线性回归，其回归方程为: Y=34 480X－2 081.7，r=0.999 8。结果显示，在8.08～56.56 μg范围内，蒙花苷进样量与峰面积的线性关系良好。

2.7精密度试验取浓度为28.28 μg·mL－1蒙花苷对照品溶液，重复进样6次，每次10 μL，按上述色谱条件测定峰面积，RSD=0.57%，证明所用仪器精密度良好。

2.8稳定性试验［4，5］精密称取本品内容物1 g，按“2.3”方法操作。置常温下，分别于0、2、4、8、12、24 h，各精密量取10 μL注入液相色谱仪，记录色谱图，量取峰面积，计算RSD。RSD为0.35%，表明在24 h内供试品稳定性良好。

2.9重复性试验精密称取本品内容物6份(同一批号)，按“2.3”项下方法操作。进样，记录峰面积，计算含量。蒙花苷RSD=0.96% (n=6)，证明具有良好重复性。

2.10加样回收率试验［6］取已知含量的样品6份(同一批号)，精密称定，精密加入一定量对照品，按“2.3”项下方法操作。进样10 μL，测定峰面积，进行回收率计算，结果见表1。

表1　样品加样回收率

由以上试验结果可知，该方法回收率良好。可用于本制剂中蒙花苷的含量测定。

2.11样品的测定取3批样品，按“2.3”项下方法操作，制成供试品溶液，样品与供试品溶液分别进样10 μL，记录峰面积(n=5)，并对样品中蒙花苷含量进行计算，结果见表2。

表2　蒙花苷含量测定

3　讨论

3.1供试品溶液的制备曾采用超声处理和加热回流提取两种方法进行试验，检测结果显示，加热回流提取法杂峰少，因此采用加热回流提取的方法来制备供试品溶液。

3.2检测波长的选择，采用紫外检测器，对蒙花苷对照品溶液和供试品溶液在200～400 nm波长范围进行扫描，结果在334 nm有最大吸收，因此，检测波长定为334 nm。

供试品色谱中待测组分分离度良好。在确立的色谱条件下，方法重复性良好。

参考文献:

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·综述·

关键词:银黄解毒胶囊;蒙花苷;高效液相色谱法

Determination of linarin in Yinhuangjiedu Capsules by HPLC

SONG Guang-sheng1，LIAN Shu-wei2
(1.Jinan City Central District Food and Drug Administration，Jinan 250001，China;2.Pingyin People's Hospital，Pingyin 250400，China)

Abstract:Objective To establish an HPLC method for the determination of linarin in Yinhuangjiedu Capsules.Methods HPLC method was adopted with eighteen alkyl silane bonded silica gel column.Mobile phase was methanol－waterglacial acetic acid(26∶23∶1)，and ultraviolet detector were used.Results There was a good linear relationship between the peak area of linarin and sample in the range of 8.08～56.56，r=0.999 8，and the recovery of sample was 99.40% (n=6)，RSD=0.92%.ConclusionThe method was feasible，reproducible，and can effectively control the quality of Yinhuangjiedu Capsules.

Key words:Yinhuangjiedu Capsules; Linarin; HPLC

作者简介:宋光胜，男，主管中药师，研究方向:药品监管、药品检验，E－mail: 624827532@ qq.com

中图分类号:R927.2

文献标识码:A

文章编号:2095－5375(2015) 10－0577－003