难治性支气管哮喘患者血清肿瘤坏死因子α水平变化及其临床意义

林茂华，王智辉，唐雨晴，胡春荣

·短篇论著·

难治性支气管哮喘患者血清肿瘤坏死因子α水平变化及其临床意义

林茂华，王智辉，唐雨晴，胡春荣

目的 观察难治性支气管哮喘患者血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平变化，并探讨其临床意义。方法 选取2012年2月—2013年1月惠州市博罗县人民医院收治的支气管哮喘患者68例，根据哮喘诊断标准分为难治性哮喘患者34例(DTA组)和普通哮喘患者34例(非DTA组)，另选取同期体检健康者34例(对照组)。采用酶联免疫吸附试验测定血清TNF-α及白介素6(IL-6)水平，自动血细胞分析仪测定嗜酸粒细胞直接计数(EOS)，肺功能测试仪测定第一秒用力呼气容积(FEV1)。比较3组患者血清TNF-α、IL-6水平及EOS、FEV1，并分析血清TNF-α水平与血清IL-6水平、EOS及FEV1的相关性。结果 DTA组、非DTA组患者血清TNF-α、IL-6水平及EOS高于对照组，FEV1低于对照组(P<0.05)。DTA组患者血清TNF-α、IL-6水平及EOS高于非DTA组，FEV1低于非DTA组(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示，血清TNF-α水平与血清IL-6水平、EOS呈正相关(r值分别为0.725、0.837，P值分别为0.017、0.003)，与FEV1呈负相关(r=-0.742，P=0.012)。结论 难治性支气管哮喘患者血清TNF-α水平明显升高，且与FEV1呈负相关，与血清IL-6水平、EOS呈正相关，临床上可将TNF-α阻断剂作为难治性支气管哮喘的治疗药物之一。

哮喘；肿瘤坏死因子α

支气管哮喘是由中性粒细胞、嗜酸粒细胞、气道上皮细胞等多种细胞及组分引起的慢性炎性疾病[1]。难治性支气管哮喘(DTA)仅占哮喘的5%～10%，但其治疗难度较大，患者大剂量吸入糖皮质激素后仍无法得到有效控制[2]。临床研究证明，DTA患者临床表现为肺功能下降、气道高反应性及气道梗阻[3]。目前，对气道炎症及气道重塑的研究有望为治疗DTA提供新思路。有学者提出，肿瘤坏死因子α(TNF-α)在DTA气道炎症的产生和发展中发挥重要作用。本研究旨在探究DTA患者血清TNF-α水平变化及其临床意义，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2012年2月—2013年1月惠州市博罗县人民医院收治的支气管哮喘患者68例，根据哮喘诊断标准[4]分为难治性哮喘患者34例(DTA组)和普通哮喘患者34例(非DTA组)，另选取同期体检健康者34例(对照组)。排除标准：(1)合并高血压、糖尿病、冠心病患者；(2)心、肝、肾功能严重障碍患者；(3)既往有肺癌、肺结核等肺疾病患者。本研究经博罗县人民医院伦理委员会批准，患者均知情同意并签署知情同意书。

1.2 方法 采取患者清晨空腹静脉血5 ml，EDTA抗凝，室温静置30 min，3 000 r/min离心 10 min，取上清液，采用酶联免疫吸附试验测定血清TNF-α及白介素6(IL-6)水平，人肿瘤坏死因子试剂盒由武汉中帜生物科技公司提供，IL-6试剂盒由北京经纬博恒生物科技公司提供。另取2 ml静脉血进行EDTA-K2抗凝，使用自动血细胞分析仪测定嗜酸粒细胞直接计数(EOS)。采用肺功能测试仪测定第一秒用力呼气容积(FEV1)，测试仪由德国Jaeger公司提供。

1.3 观察指标 比较3组患者血清TNF-α、IL-6水平及EOS、FEV1，并分析血清TNF-α水平与血清IL-6水平、EOS及FEV1的相关性。

2 结果

2.1 3组受试者一般资料比较 3组受试者年龄、性别、吸烟情况比较，差异无统计学意义(P>0.05，见表1)。

表1 3组受试者一般资料比较

注：a为F值

2.2 3组受试者血清TNF-α、IL-6水平及EOS、FEV1比较 3组受试者血清TNF-α、IL-6水平及EOS、FEV1比较，差异有统计学意义(P<0.05)；DTA组、非DTA组患者血清TNF-α、IL-6水平及EOS高于对照组，FEV1低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。DTA组患者血清TNF-α、IL-6水平及EOS高于非DTA组，FEV1低于非DTA组，差异有统计学意义(P<0.05，见表2)。

Table 2 Comparison of serum levels of TNF-α and IL-6，EOS and FEV1among the three groups

组别例数TNF-α(ng/L)IL⁃6(pg/L)EOS(×109/L)FEV1(%)对照组3450 32±16 53131 59±61 270 25±0 0889 23±3 17DTA组34118 21±101 54284 27±104 580 38±0 0960 58±10 23非DTA组3469 47±28 72172 96±71 440 30±0 1283 47±9 54F值5 7344 8634 7534 862P值0 0320 0420 0470 040

注：TNF-α=肿瘤坏死因子α，IL-6=白介素6，EOS=嗜酸粒细胞直接计数，FEV1=第一秒用力呼气容积

2.3 相关性分析 Pearson相关分析结果显示，血清TNF-α水平与血清IL-6水平、EOS呈正相关(r值分别为0.725、0.837，P值分别为0.017、0.003)，与FEV1呈负相关(r=-0.742，P=0.012)。

3 讨论

支气管哮喘是以气道高反应性和变应性炎症为主要特征的慢性疾病，患者肺功能急剧下降，出现呼吸道梗阻[5-6]。糖皮质激素作为治疗支气管哮喘的首选药物，在多数哮喘疾病的治疗中取得良好成效[7]，但对DTA的治疗效果不佳。有报道称，DTA的炎症机制包括嗜酸粒细胞型、单核细胞型等，部分患者在大剂量糖皮质激素作用下仍存在较为严重的气道炎性反应。有研究发现，支气管哮喘患者的血清TNF-α水平异常[8]，但其临床意义仍有待研究。

本研究结果显示，DTA组、非DTA组患者血清TNF-α、IL-6水平及EOS明显高于对照组，FEV1明显低于对照组；DTA组患者血清TNF-α、IL-6水平及EOS明显高于对照组和非DTA组，FEV1明显低于对照组和非DTA组。哮喘患者气道重塑包括气道上皮、平滑肌、血管等，主要由气道炎症引起[9]。DTA与非DTA患者FEV1存在差异性表明DTA患者的肺功能明显下降，气道重塑更为明显。IL-6的生物效应十分复杂，具有抗炎和促炎的双重特性，其能诱导B淋巴细胞分泌IgE，IgE与受体结合后激活Th2细胞，促进DTA患者的气道炎性反应[10]。IL-6作为IgE合成的必需细胞因子，在DTA中的高表达提示其在DTA进展中发挥重要作用。为进一步明确TNF-α的表达与DTA之间的联系，本研究中Pearson相关分析结果显示，血清TNF-α水平与FEV1呈负相关，提示血清TNF-α水平升高对DTA患者的肺功能产生负面影响，可能参与DTA的炎性反应和气道重塑。此外，TNF-α与IL-6呈正相关。TNF-α主要由巨噬细胞和单核细胞产生，在机体炎性反应和免疫反应中扮演重要角色[11]。TNF-α可以选择性地杀伤肿瘤细胞，参与免疫调节，一般当机体受到细菌、病毒侵袭时TNF-α分泌增多[12]。因此推测TNF-α与IL-6在哮喘中具有一定的协同作用。EOS作为DTA患者气道炎症的主要表型之一，与TNF-α呈正相关，推断TNF-α可能通过直接活化EOS发挥作用。同时，EOS能够进一步产生TNF-α，抑制自身凋亡。方丽萍等[13]认为，TNF-α可通过介导血管内皮细胞黏附白细胞、EOS、淋巴细胞等在炎症部位聚集，刺激IL-6细胞因子生成，使嗜酸粒细胞、肥大细胞聚集，抑制EOS凋亡，从而产生气道持续性炎症，与本研究结果相似。

综上所述，难治性支气管哮喘患者血清TNF-α水平明显升高，且与FEV1呈负相关，与血清IL-6水平、EOS呈正相关，可能是影响DTA病情和疗效的主要作用机制。原淑莉[14]提出抗IgE生物制剂、表型特异性治疗、支气管热成形疗法、支气管肺泡灌洗术、氦氧混合气体驱动疗法等治疗DTA的临床效果良好。笔者认为临床上可将TNF-α阻断剂作为DTA的治疗药物之一，但其安全性和可行性有待进一步研究。

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(本文编辑：毛亚敏)

Changes and Clinical Significance of Serum TNF-α Level in Patients with Refractory Asthma

LINMao-hua,WANGZhi-hui,TANGYu-qing,etal.DepartmentofRespiratoryMedicine,People′sHospitalofBoluoCounty,Huizhou516100,China

Objective To observe the changes of serum TNF-α level in patients with refractory asthma，to investigate its clinical significance.Methods From February 2012 to January 2013 in the People′s Hospital of Boluo County，a total of 68 patients with asthma were selected，and they were divided into A group(with refractory asthma，n=34)and B group(with ordinary asthma,n=34)according to asthma diagnosis standard；a total of 34 healthy cases were selected as control group at the same time.ELISA was used to detect the serum levels of TNF-α and IL-6，automatic hemocyte analyzer was used to detect eosinophilic granulocyte direct count(EOS)，pulmonary function test instrument was used to detect FEV1.Serum levels of TNF-α and IL-6，EOS and FEV1were compared among the three groups；correlations between serum TNF-α level and serum IL-6 level，EOS，FEV1were analyzed.Results Serum levels of TNF-α and IL-6，EOS of groups A and B were statistically significantly higher than those of control group，while FEV1of groups A and B was statistically significantly lower than that of control group，respectively(P<0.05).Serum levels of TNF-α and IL-6，EOS of A group were statistically significantly higher than those of B group，while FEV1of A group was statistically significantly lower than that of B group(P<0.05).Pearson correlation analysis showed that，serum TNF-α level was positively correlated with serum IL-6 level(r=0.725,P=0.017)，EOS(r=0.837,P=0.003)，respectively；was negatively correlated with FEV1(r=-0.742,P=0.012).Conclusion Serum TNF-α level is obviously increased in patients with refractory asthma，and it is negatively correlated with FEV1，positively correlated with serum IL-6 level and EOS，so TNF-α blockers can be used in the treatment of refractory asthma.

Asthma；Tumor necrosis factor-alpha

516100广东省惠州市博罗县人民医院呼吸内科

林茂华，王智辉，唐雨晴，等.难治性支气管哮喘患者血清肿瘤坏死因子α水平变化及其临床意义[J].实用心脑肺血管病杂志，2015，23(6)：51-52，57.[www.syxnf.net]

R 562.25

B

10.3969/j.issn.1008-5971.2015.06.015

2015-03-23；

2015-06-16)

Lin MH,Wang ZH,Tang YQ,et al.Changes and clinical significance of serum TNF-α level in patients with refractory asthma[J].Practical Journal of Cardiac Cerebral Pneumal and Vascular Disease，2015，23(6)：51-52，57.