尿NGAL、尿L-FABP、血清胱蛋白酶抑制剂C检测诊断早期糖尿病肾病的价值

李 易，操 轩，胡亚琳，陈 健

(湖北省黄石市中心医院，湖北 黄石 435000)

尿NGAL、尿L-FABP、血清胱蛋白酶抑制剂C检测诊断早期糖尿病肾病的价值

李 易，操 轩，胡亚琳，陈 健

(湖北省黄石市中心医院，湖北 黄石 435000)

目的探讨尿NGAL、尿L-FABP、血清胱蛋白酶抑制剂C检测诊断早期糖尿病肾病的价值。方法选取86例糖尿病患者作为研究对象，依据尿微量白蛋白/肌酐比值(UACR)将所有患者分为糖尿病对照组30例、糖尿病微量白蛋白尿组30例与糖尿病大量白蛋白尿组26例，同时选取同期健康体检者30例作为正常对照组。收集各组患者5 mL清晨清洁中段尿，分别检测尿液中NGAL、L-FABP、血清胱蛋白酶抑制剂C的浓度。结果尿L-FABP、血清胱蛋白酶抑制剂C在糖尿病微量白蛋白尿组与大量白蛋白尿组中的浓度水平明显高于正常对照组，且随着UACR的增加逐渐升高，各组间差异均有统计学意义(P均<0.05)；尿NGAL在糖尿病微量白蛋白尿组与大量白蛋白尿组浓度水平明显高于糖尿病对照组与正常对照组，差异均有统计学意义(P均<0.05)；三项指标联合检测对糖尿病肾病的诊断灵敏度及特异度最高。结论尿NGAL、尿L-FABP、血清胱蛋白酶抑制剂C检测对早期糖尿病肾病具有重要的预测价值，且三项指标联合检测能够提高对糖尿病肾病的诊断灵敏度与特异度。

尿NGAL；尿L-FABP；血清胱蛋白酶抑制剂C；糖尿病肾病

随着目前糖尿病发病率的逐步上升，预测糖尿病患者2025年将高达3亿人口[1]。糖尿病肾病是糖尿病严重并发症之一，是一种临床常见病，该疾病起病较为隐匿，是目前引发终末期肾病的主要原因。早期临床上认为，糖尿病肾病主要为肾小球损伤，但是随着越来越多的深入研究，表明在早期糖尿病肾病中，肾小管损伤要早于肾小球损伤[2]。目前，对于糖尿病肾病肾功能损害的诊断，临床上依旧主要使用检测微量白蛋白的方法，但是该方法会受到多种因素的影响，因此，需要找寻某些敏感、特异、简便的标志物来诊断早期糖尿病肾病。尿中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)、尿肝

性脂肪酸结合蛋白(L-FABP)都于近端小管上皮表达，曾有研究表明，这两种物质在多种肾损伤中明显升高，且与肾损伤程度呈正相关[3]。血清胱蛋白酶抑制剂C(Cys C)稳定性较高，不受年龄、性别等因素的影响[4]，是近年来迅速发展起来的用于肾功能损害诊断的重要指标之一[5]。本研究通过检测尿NGAL、尿L-FABP、Cys C在糖尿病各组患者中的浓度水平，探讨其在早期糖尿病肾病中的诊断价值。

1 临床资料

1.1一般资料 选取2012年1月—2014年1月于我院就诊的86例糖尿病患者作为研究对象，年龄≥40岁，且符合糖尿病诊断标准。排除不符合诊断标准者，合并严重心功能不全、恶性肿瘤、非各种糖尿病肾病者，近期合并感染者，妊娠及哺乳期妇女。参照2012年IDF糖尿病肾病诊疗指南[6]测定患者尿标本尿微量白蛋白/肌酐比值(UACR)，根据测定结果不同将患者分为3组：UACR女性<3.5 μg/mg、男性<2.5 μg/mg为糖尿病对照组，共30例，男14例，女16例；年龄(47.1±6.7)岁。UACR男女性2.5～30 μg/mg为糖尿病微量白蛋白尿组，共30例，男13例，女17例；年龄(48.2±7.4)岁。UACR男女性均>30 μg/mg为糖尿病大量白蛋白尿组，共26例，男12例，女14例；年龄(49.4±6.9)岁。另外选取同期健康体检者30例作为正常对照组,男11例，女19例；年龄(48.6±6.4)岁。各组患者一般资料比较差异无统计学意义(P均>0.05)，具有可比性。

1.2方法 收集所有受检者清晨清洁中段尿液5 mL，经1 500 r/min离心5 min，取上清液保存于-80 ℃冰箱中备用，待所有标本收集完毕后进行统一检测。同时采集所有受检者清晨空腹静脉血3 mL，常规离心处理后分离血清，标本用于CysC水平的检测。采用酶联免疫吸附法检测尿NGAL浓度，试剂盒由武汉新启迪生物科技有限公司提供，严格按照试剂盒说明书进行操作检测；尿L-FABP的浓度测定采用酶联免疫吸附法，试剂盒由广州固康生物科技有限公司提供，严格按照试剂盒说明书进行操作；血清Cys C采用乳胶增强免疫比浊法进行检测，试剂盒由上海抚生实业有限公司提供。其中NGAL含量<1.5 μg/L为阴性，NGAL含量≥1.5 μg/L为阳性；L-FABP含量<1.3 μg/mL为阴性，L-FABP含量≥1.3 μg/mL为阳性；Cys C含量<1.2 mg/L为阴性，Cys C含量≥1.2 mg/L为阳性。单项指标检测结果超过参考区间上限判为阳性，多指标联合检测时，任一指标检测结果超过参考区间上限即判为联合检测阳性。其中诊断灵敏度计算公式为：真阳性/(真阳性+假阴性)×100%；诊断特异度计算公式为：真阴性/(真阴性+假阳性)×100%。

2 结 果

2.1各组肾功能相关指标比较 UACR在糖尿病各组中浓度均明显高于正常对照组，且随着肾损伤的严重程度增加而递增，各组间差异均有统计学意义(P均<0.05)；糖尿病大量白蛋白尿组血肌酐(SCr)明显高于其他各组(P均<0.05)；糖尿病各组尿素氮(BUN)均明显高于正常对照组(P均<0.05)；且糖尿病大量白蛋白尿组BUN水平明显高于其他糖尿病组(P均<0.05)；与正常对照组进行比较，eGFR水平在糖尿病对照组出现轻度升高，在糖尿病大量白蛋白尿组明显降低，差异均有统计学意义(P均<0.05)。见表1。

2.2各组尿NGAL、尿L-FABP、血清Cys C水平比较 糖尿病微量白蛋白尿组与大量白蛋白尿组尿L-FABP、血清Cys C水平明显高于正常对照组，且随着UACR的增加逐渐升高，各组间差异均有统计学意义(P均<0.05)；糖尿病微量白蛋白尿组与大量白蛋白尿组尿NGAL水平明显高于糖尿病对照组与正常对照组(P均<0.05)。见表2。

表1 各组肾功能相关指标比较

注：①与正常对照组比较，P<0.05；②与糖尿病对照组比较，P<0.05；③与糖尿病微量蛋白尿组比较，P<0.05。

表2 各组肾功能相关指标比较

注：①与正常对照组比较，P<0.05；②与糖尿病对照组比较，P<0.05；③与糖尿病微量白蛋白尿组比较，P<0.05。

2.3单一指标与联合指标检测诊断糖尿病白蛋白尿灵敏度及特异度的比较 尿NGAL、尿L-FABP、Cys C联合检测对糖尿病肾病的诊断灵敏度与特异度最高，其次是任意两项指标的联合检测，单一指标检测诊断灵敏度及特异度最低。见表3。

3 讨 论

糖尿病肾病是糖尿病患者较为常见的慢性并发症，其发病率较高，并且是引发糖尿病患者病死的重要原因之一。在临床上，持续微量白蛋白尿作为肾小球损害的标志，是目前用于早期诊断糖尿病肾病的常用方法[7]。糖尿病一旦在临床上发展为糖尿病肾病，肾脏损害将不可逆转，绝大多数患者会在较短的时间内进入终末期肾病。由于尿微量白蛋白尿在早期糖尿病肾病诊断方面具有一定的局限性，因此，临床上需要找寻灵敏度高且简单无创的生物标志物来对早期肾损伤进行反映。近年来，尿NGAL、尿L-FABP、Cys C等肾小管损伤标志物对早期糖尿病肾病的诊断价值引起了较大的关注。

NGAL是一种分泌性糖蛋白，由一条多肽链构成，含有178个氨基酸残基，主要于近端小管表达，当肾小管上皮细胞受到损伤刺激时大量分泌[8]，其参与炎症反应的清除，同时能够调节免疫应答。在糖尿病肾病早期，NGAL通过诱导肾小管中性粒细胞的凋亡抑制炎症反应，进而降低炎症对肾脏的损害[9]。但是，长期大量的蛋白尿能够造成重吸收，引发肾小管损伤加重，进而使尿NGAL的表达得到促进。本研究结果显示，糖尿病微量白蛋白尿组与大量白蛋白尿组尿NGAL水平明显高于糖尿病正常组与正常对照组，表明NGAL水平在病理性白蛋白尿出现前就已经升高，并未随肾损伤加重而升高，该物质是于糖尿病肾病早期出现的标志物。该研究结果与文献[10]结果相一致。

表3 单一指标与联合指标检测诊断糖尿病白蛋白尿灵敏度及特异度的比较

L-FABP是一类胞内分子蛋白，其基因结构高度保守，由10个反向平行的β链与2个短的α螺旋组成，有两个脂肪酸结合位点，因此，游离脂肪酸的亲和力要高于其他类型的FABP。L-FABP主要于肝、肾、小肠等组织细胞中表达，在肾脏中主要于近端肾小管细胞内表达[11]。在肝脏疾病中，血清L-FABP通过肾小球滤过可能会对尿L-FABP含量产生影响，但尿L-FABP水平不受血L-FABP的影响[12]。本研究结果显示，糖尿病各组尿L-FABP水平明显高于正常对照组，并且L-FABP水平随着UACR的增加而逐渐增高，表明尿L-FABP水平对早期糖尿病肾病诊断以及其严重程度具有非常重要的价值，与相关研究结果一致[13]。

血清Cys C是一种内源性非糖基蛋白，属于胱蛋白抑制剂家族成员之一。由于该分子量较小，带正电荷，因此能够自由通过肾小球基底膜，在近曲小管重吸收，并且被完全代谢，外加肾小管不分泌该物质，肾脏是其唯一的排泄途径。本研究结果显示，Cys C在糖尿病各组患者中的水平明显高于正常对照组，并且随着UACR的增加而逐渐增高，在糖尿病大量白蛋白尿组的水平最高，表明血清Cys C是诊断早期肾损伤的敏感标志物，对糖尿病肾病的早期诊断具有一定的价值[14]。

在疾病早期诊断方面，实验室指标的诊断灵敏度及特异性受到极高的重视。本研究对单一指标检测与多指标联合检测的诊断价值进行了比较，结果提示单一指标检测的诊断灵敏度及特异度较2项或3项指标联合检测低，且3项指标联合检测的诊断灵敏度最高。

综上所述，尿NGAL、尿L-FABP、血清Cys C对早期糖尿病肾病的诊断都具有重要的价值，且三项指标联合检测能够明显提高对糖尿病肾病的诊断灵敏度及特异度。

[1] 蒋晓春,樊静,王俊. 彩色多普勒超声在早期糖尿病肾病诊断中的价值[J]. 中国现代医生,2013,51(8):81-82

[2] 邱晓萍,朱东辉,王燕萍,等. 尿液转铁蛋白、微量清蛋白检测在糖尿病肾病早期诊断中的临床意义[J]. 福建医科大学学报,2008,42(5):436-437

[3] Xu PC,Zhang JJ,Chen M，et al. Urinary kidney injury molecule-1 in patients with IgA nephropathy is closely associated with disease severity[J]. Nephrol Dial Transplant，2011,26(10):3229-3236

[4] Vaidya VS,Niewczas MA,Ficociello LH,et al. Regression of mic-roalbuminuria in type 1 diabetes is associated with lower levels of urinary tubular injury biomarkers,kidney injury molecule-1, and N-acetyl-β-D-glucosaminidase[J]. Kidney Int，2011,79(4):464-470

[5] 王文武,杨杰,张真路. 血清胱氨酸蛋白酶抑制剂C在高血压患者肾功能早期损伤诊断中的应用价值[J]. 中华老年心脑血管病杂志,2007,9(11):730-732

[6] 莫一菲,周健,贾伟平. 国际糖尿病联盟2012年全球2型糖尿病指南解读[J/CD]. 中国医学前沿杂志:电子版,2012,4(11):70-77

[7] Ninomiya T,Perkovic V,de Galan BE,et al. Albuminuria and kidney function independently predict cardiovascular and renal outcomes in diabetes[J]. J Am Soc Nephrol,2009,20(8):1813-1821

[8] 杜悦,崔家鹏,侯玲. 尿NGAL和KIM-1在儿童急性肾损伤中的改变及临床意义[J]. 中国医科大学学报,2012,41(3):247-249

[9] 王冬梅,袁小伟,丁莉. 血和尿NGAL指标检测在糖尿病肾病诊断中的价值[J]. 宁夏医学杂志,2014,36(9):809-811

[10] 蔡雷鸣,厉倩,金才峰. 血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白检测在急性肾功能损伤早期诊断中的临床意义[J]. 检验医学,2012,27(4):287-289

[11] 张红霞,原杰,柳洁,等. 三种肾小球滤过率评估方程对早期糖尿病肾病的诊断价值比较[J]. 中华肾脏病杂志,2011,27(5):341-345

[12] 喻长法,张仙森,王丽君,等. 尿微量蛋白及血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C的检测对糖尿病肾病的早期诊断价值[J]. 检验医学,2009,34(6):478-479

[13] 顾峻菱,徐勇,钟海花，等. Cystatin C在2型糖尿病肾病早期诊断中的应用[J]. 重庆医学,2006,10(35):896-897

[14] 刘爱忠,滕春燕,刘昕鸣. 胱氨酸抑制剂C在早期糖尿病肾病诊断中的价值[J]. 吉林医学,2009,30(18):2057-2059

操轩，E-mail：cxhyl4678@163.com

10.3969/j.issn.1008-8849.2015.32.026

R587.2

B

1008-8849(2015)32-3604-03

2014-12-04