影响生化自动分析的因素及对策

刘树生

山东省青州市妇幼保健院，山东青州 262500

比色分析是生化自动分析的主要原理，利用不同价态元素特定的颜色对溶液粒子浓度进行分析，从而判断反应物及生成物的增加或减少。催化物、反应物等测定物质的浓度同离子颜色成正比关系，可以通过与标准精准含量物质相对比的方式，分析样品的物质含量。在化学平衡条件下，依据公式，参考将标准物质同样品吸光度的值，即可测定样品的含量。

1 分析过程外对生化自动分析结果的影响因素及对策

1.1 生理因素

生理因素是影响生化自动分析结果的一个重要因素，可以分为不可控因素、可控因素，具体包括季节变化、体位变化、生理性波动、妊娠、运动、海拔、性别、生活方式、情绪和年龄等多方面内容。

性腺激素含量会因性别的不同存在差异，女性血清水平普遍低于男性，女性不同生理周期内性腺激素也会不断变化。针对这一问题应针对性别的不同，合理设置检测项目和参考范围，降低对生化自动分析检测结果的影响；同成年人相比，新生儿和生长期儿童的血清总胆红素、碱性磷酸酶水平各不相同，生化检测结果会因年龄的不同而改变，应在实际检测过程中要针对年龄阶段的不同而制定准确的参考范围[1]；受运动因素的影响，机体代谢速度加快，生化检测结果也会不同，在对患者进行检测时，应尽量选择清晨或起床前对住院病人进行抽血检测，门诊患者应在休息15 min后进行。

1.2 饮食因素

人体多种血液成分都会受饮食的影响，不饱和脂肪酸食物、高蛋白食品、咖啡因等多种食物分别会使胆固醇降低、BUN、UA升高和游离脂肪酸、肾上腺素含量增加[2]。进食后进行生化分析，还会因血脂质的增多使血浆、血清呈现乳白浑浊状态，影响生化自动分析等操作，干扰比色和检测的精确程度。为了避免饮食对生化检测结果带来的影响，应采取空腹采血的方式，保证患者空腹时间在16 h内，从而提高分析的准确性。

1.3 标本采集因素

患者进行标本采集工作时间的不同，会导致血液化学成分发生较大的变化，在波动的状况下很难保证生化检测结果的精确程度。在临床样本采集时尽量选取统一的时间标准，在进食12 h后或清晨空腹时进行采集，确保检验条件相符，使检测结果可以反应患者的真实状况。此外，血液标本采集部位也是影响生化检测结果的因素之一，应将血清标准作为主要的临床生化分析样本，排除标本采集部位的干扰。

1.4 药物因素

化学、物理干扰是药物影响生化自动分析结果的两个关键因素，其中前者主要是因为药物化学性质干扰患者的物质测定，而后者为患者血清物理性质因药物分解而产生的影响。如果长期服用药物，患者肝肾功能也会受药物副作用的影响，从而干扰生化检测结果。住院患者在给予点滴输注治疗后，导致部分项目检测因留取标本稀释而低于正常值，使检测结果不够准确。在排除药物干扰因素时，工作人员要在停药后对患者进行采取样本，避开服药4 h或静点时间段。

1.5 标本处理及储存因素

临床检验工作人员在接收检测样本后，应先对样本进行10 min的水浴（45℃），利用离心机处理5 min，离心转速为3000 rpm，将血清分离开来。标本处理后，如果放置时间过长，会使样本发生溶血现象，还会因为葡萄糖的利用及酵解而降低血清样本中葡萄糖的含量，不同元素的含量及部分酶的活性也会发生的变化，造成生化检测结果高于实际测定值[3]。所以应在规定的时间内尽早进行检测分析，如需储存时，要在密封条件下，在冰箱（4℃）中保存。

2 化学反应条件对生化自动分析结果的影响因素及对策

2.1 湿度因素

化学反应过程中，湿度对生化检测结果的影响主要体现在以下两个方面：在0～4℃的条件下，酶参与的反应不会发生改变，但酶活性会因湿度的增大而降低，从而降低了反应速度；无酶参与的反应中，反应速度会随湿度的增大而加快。最佳湿度的选择是保障生化检测准确性的前提，要参考试剂规定标准，合理调节湿度范围。

2.2 反应物浓度因素

反应速度同反应物浓度有直接的关系，反应物浓度越大反应速度越快，试剂稳定较差、样本过早消耗都会使底物浓度发生变化，致使浓度低于实际标准，生化检测结果偏低。而在生化自动分析过程中，采用比色方法进行操作时，应严格的控制相应的范围，超出范围会导致生化检测结果过高。通过机械设定极限值的方法，可以更好的限制反应物浓度值，超出标准后会自动启动警报器，需要进行调节后在进行检测。在确定参考范围时，可以取线性范围的极限值，还采用生化自动分析仪检测吸光度，若反应物吸光度不符合标准数值时，要重新进行配置。

2.3 催化剂因素

激活剂、抑制剂和酶浓度是催化剂因素对生化自动分析结果的主要体现，其中抑制剂对反应的进行起到阻碍的作用，而激活剂可以加快反应速度，在试剂中添加这两种催化剂后，很容易发生试剂交叉感染、反应盘感染等问题。除此之外，比色皿透光性、光径，生化自动分析仪扫描宽度、中心波长，介质成分和稀释程度等因素都会影响计算结果。实际分析检测时，要详细的确定各项实验条件，如果外界反应条件出现变化，应重新进行分析检测。要想使酶浓度与酶反应速度呈线性关系，应确保反应物的浓度，当分析检测物质属于酶的情况，要避免浓度过大，一旦超出标准，要及时进行稀释处理，重新测定。

2.4 pH值因素

酶分子的解离状态会因pH值的变化而发生改变，不同PH值条件下，反应物与酶相互结合的过程受到干扰，最终导致化学反应速度减慢，加样针污染、反应盘污染是pH值影响生化检测结果的两个主要方面。检测试剂在进行自动分析的过程中，由于样品量较少，所以酸碱程度的差异会严重影响试剂检测结果，酸碱缓冲物质无法发挥较大的作用[4]。在生化自动分析时，一定要将反应盘进行彻底的清洗，分别用清水、含氯消毒剂、蒸馏水进行冲洗和浸泡消毒，晾干后即可应用于临床分析检测。此外，在加样前，要利用蒸馏水对加样针进行熏蒸，降低样本感染情况的发生机率，就是更换蒸馏水清洗液，杜绝一切感染源。

3 生化自动分析仪的使用影响因素及对策

除分析过程外干扰因素、化学反应条件干扰因素外，生化自动分析仪是否正常使用也会对检测结果产生一定程度的影响。如果操作使用不规范，就会增大重复检测的次数。因此一定要加强对工作人员的约束，做好反应试剂、定标物质选取等工作，参照使用说明，提高测定结果的准确性。

临床测量工作人员在使用生化自动分析仪时，一定要根据操作规范进行测量，并定期对仪器进行保养，做好日、周、月的维护工作。遇到检测项目转移的情况，应彻底清洗比色皿，对剩余试剂进行合理的处理，以免影响后期分析检测工作的顺利进行。在试剂使用前，一定要查看是否在使用期限内，并依据具体说明对相关参数进行合理的设置，储存试剂的环境温度要控制在2℃～8℃的范围内。如果试剂发生污染的情况，要适当使吸液量增大，通常将项目检测试剂的吸液量标准设为400～700 uL，通常选取500 uL，提升生化测定精确度，将交叉感染限制在1%的范围[5]。

在对样品进行处理的过程中，要做到以下几点：避免样品在不封闭的状况下放置时间过长；依据规范标准，合理储存、处理样品；测定时要降低样品中防腐剂、药物和抗凝剂等物质的影响；确保样品无浑浊、凝块的现象；作样本空白，降低乳糜微粒和溶血对生化测定结果的干扰。在选择延迟时间设定方法、测试方法时，尽量选取两点法、速率法及终点法等。在应用两点法时，应作样本空白；而采取速率法时，在37℃、30℃和25℃的环境下，要分别确保15 s、12 s和10 s以上的延时；使终点法的延时时间在10 s以上。

[1]王瑞丽,孙中立,刘好.影响临床生化自动化分析前质量的因素[J].中国误诊学杂志，2008(35):8633-8634.

[2]李熙建.临床生化检验前过程对检验质量的影响分析[J].中国误诊学杂志，2008(16):3807-3808.

[3]王兴宁,李静.临床生化自动化分析后的质量控制[J].实用医技杂志，2005(2):223.

[4]朱国朝,袁红萍.临床生化定量测定室内质量控制方法的设计和应用[J].现代检验医学杂志，2003(3):39-40.

[5]高佩增,张健,杨清溪.全自动生化分析仪应用的质量保证[J].中国误诊学杂志，2002(3):463.