文 / 蒲秀瑛,任 菁,刘 璐,马小龙,李海兵,李晓玥(兰州理工大学 生命科学与工程学院 甘肃省中藏药筛选评价及深加工重点实验室,甘肃 兰州 730050)
甘 草 不 同 提 取 部 位 对a-葡 萄 糖 苷 酶 活 性 的 影 响
文 / 蒲秀瑛,任 菁,刘 璐,马小龙,李海兵,李晓玥(兰州理工大学 生命科学与工程学院 甘肃省中藏药筛选评价及深加工重点实验室,甘肃 兰州 730050)
目的:研究甘草不同提取物对a-葡萄糖苷酶活性的影响。方法:采用PNPG法,以阿卡波糖为阳性对照,对采取不同提取方法制备得到的甘草提取物进行α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选。结果:甘草多糖的抑制效果最佳,皂苷和生物碱的抑制作用较好,黄酮的抑制作用较弱。结论:本实验为今后进一步从甘草中分离纯化出高活性的α-葡萄糖苷酶抑制活性因子提供了科学依据。
甘草;阿卡波糖;α-葡萄糖苷酶;α-葡萄糖苷酶抑制因子
甘草为豆科植物甘草属甘草的根及根状茎,气微,味甜而特殊[1]。功能主治清热解毒、祛痰止咳等[2]。甘草的主要化学成分是三萜类和黄酮类化合物,还有少量生物碱、多糖、木质素、香豆素和多种氨基酸。具有抑制单胺氧化酶、抑制醛糖还原酶、抗癌等功效[3-7]。
α-葡萄糖苷酶抑制剂是一类以延缓肠道碳水化合物吸收而达到治疗糖尿病的口服降糖药物[8],已广泛应用于临床,具有延缓单糖吸收、降低餐后高血糖之功效,因此,开发α-葡萄糖苷酶抑制剂已成为热点,本研究旨在从甘草中分离提取α-葡萄糖苷酶抑制剂活性成分。
1.1 材料
甘草,购于兰州市黄河药材市场。
1.2 试剂与仪器
试剂:PNPG购自北京博奥拓达科技有限公司,α-葡萄糖苷酶购自江苏瑞阳生物科技有限公司,其他试剂均为分析纯。
仪器:紫外可见分光光度计(上海精密科学仪器有限公司752N);电子天平(长沙湘平科技发展有限公司ES-2002H);数显恒温水浴锅(江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司HH-2);循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司);旋转蒸发仪RE-52(上海亚荣生化仪器厂)。
2.1 甘草提取物的制备
甘草取50g,用95%的乙醇提取2次,每次2小时,抽滤,合并滤液,滤液浓缩至浸膏,加水溶解后,再依次用氯仿,乙酸乙酯,正丁醇萃取,分别得到甘草提取物多糖,生物碱,黄酮,皂苷。避光,冷藏,待用做分定性检测及酶动力学测定。
2.2 甘草提取物对α-葡萄糖苷酶抑制活性的测定
反应系统为P H 6.8磷酸钾缓冲液2.0mL、8mmol/LPNPG 0.1mL、8.0mg/mLα-葡萄糖苷酶0.1mL,37℃下保温10min后加入8mmol/LPNPG 0.1mL,于37℃下反应15min,加入0.lmol/LNa2CO3终止液2mL,在405nm处测定吸光度。将5.0mg/mL甘草提取物及阳性药物阿卡波糖分别加入到酶活力测定系统中,进行测定。
甘草各组分对α-葡萄糖苷酶抑制活性测定结果如图1所示。
Study on Inhibifive Effect of Extracts from Different Parts of Radix Glycyrrhizae on α-Glucosidase
PU Xiu-ying*, REN jing, LIU Lu,MA Xiao-long, LI Hai-bing,LI Xiao-yue
College of Life Science and Engineering, Lanzhou University of Technology
The Key Lab of Screening, Evaluation and Advanced Processing of TCM and Tibetan Medicine, Gansu Educational Department,
Lanzhou 730050, China
Objective: To fnd screening of α-glucosidase inhibitors from natural products Radix Glycyrrhizae. Method: In this experiment, PNPG was used to examine the activity of α-glucosidase, compared to positive drug (Acarbose) reaction rate, selecting screening of α-glucosidase inhibitors from polysaccharides,alkaloids,favonoids and saponins. Result:The result indicates polysaccharide have better inhibitory effect on α-glucosidase, close to the acarbose, the second is saponin and alkaloids , favonoids were weak activity. Conclusion:The further separation and purifcation for the effective part, they will be novel a-glucosidase inhibitors from Radix Glycyrrhizae.
Radix Glycyrrhizae; Acarbose; α-glucosidase;α- glucosidase inhibitor
兰州理工大学科研基金项目(10-0089)