驴人工授精技术的研究与应用

肖海霞玉山江帕热哈提江托乎提·阿及德丁 旭

（1.新疆畜牧科学院畜牧所,新疆乌鲁木齐 830000；2.石河子大学动物科技学院,新疆石河子 832000；3.新疆昌吉市六公镇畜牧兽医站,新疆昌吉 831100）

驴人工授精技术的研究与应用

肖海霞1玉山江1帕热哈提江1托乎提·阿及德*丁 旭3

（1.新疆畜牧科学院畜牧所,新疆乌鲁木齐 830000；2.石河子大学动物科技学院,新疆石河子 832000；3.新疆昌吉市六公镇畜牧兽医站,新疆昌吉 831100）

人工授精技术作为家畜改良的一项重要的技术，在牛、羊等畜种已成熟应用，并取得了巨大的经济效益和社会效益。但我国驴人工授精的研究工作起步较晚，人工授精技术因各种原因未能在养驴业中发挥相应的作用。项目实施技术小组通过实验攻关，从种公驴人工采精专用假阴道的设计、颗粒和细管冻精制作过程优化及冷冻稀释剂选择等几个方面不断探索和完善驴精液的冷冻技术和冻后精液品质，使驴冷冻精液保存技术不断成熟。结合生产实际，为避免杂菌污染，提高受胎率，研制开发了驴细管冻精。目前，制作的驴颗粒冻精和细管冻精活力均达到0.3以上。通过对驴精液冷冻保存技术的研究，打破种公驴使用的时间和空间的限制，加速品种改良步伐。

1 种公驴人工采精专用假阴道的设计

因我国驴的研究工作起步较晚，未有供人工授精中采精所用的必须设备假阴道，所以，进行了假阴道的试制与发明。经多次试验、测量，最终确定了驴专用的假阴道外壳的尺寸：总长：53 cm、上口内径：13.5 cm、下口内径8.5 cm，采用0.8 mm铁皮委托工厂加工而成。该产品在生产实际中得到了技术人员和农牧民的认可和欢迎。该发明于2008年11月获国家实用新型专利证书。

2 人工采精专用假台驴的制作

近年来，随着社会经济的发展和人们生活水平的提高，人们不只满足于吃牛、羊、猪、鸡等肉食品，对传统的驴肉及其副产品也特别感兴趣，如，阿胶、驴奶等产品倍受青睐，驴资源的稀缺，说明开发前景看好，但是，目前良种驴的利用率低，只要是优良种公驴数量少，饲养成本高，自然繁殖力低是制约驴产业发展重要的瓶颈。

现有人工授精技术一般使用假台畜作为人工采精辅助工具，假台畜是模仿母畜体型高低大小，选用钢管或木料等做成一个具有一定支撑力的支架，然后，在架背上铺以适当厚度的竹绒、棉絮或泡沫塑料等有适当弹性的填充物，其表面再包裹一层备皮或麻袋、人造革。有的则完全模仿制成如同类母畜的模样。有的还将假阴道固定安装在其内相应部位——假台畜的后下部，并可随意调节其角度。在西欧一些国家使用机械假台牛（又称采精车）采精，采精员坐在椅子上，下设轨道，可以自动进退，将假阴道方位角度调整好后，即可顺利地采取公牛精液。教科书等公开了马、猪等家畜采精用假台畜，但对于驴的人工授精研究和实践较少，还未见到假台驴的相关报告。目前，利用母驴诱惑公驴进行人工采精的方法存在公驴射精不充分，射精量不稳定；人畜不安全，采精人员的劳动强度大以及公母驴直接接触，有疾病传播的风险，因此，假台驴的应用可以有效地规避风险。课题组经多次试验、测量，设计了人工采精专用假台驴，该发明于2014年9月11日获国家实用新型专利授权。

3 驴人工授精技术

3.1 冻精颗粒的制作

为提高优良种畜的利用率，加快品种改良和选育的进程，进行了驴冻精颗粒的制作和生产应用。制作过程如下：

3.1.1 原精液的处理

原精液用等温的缓冲液按1∶1的比例稀释。

3.1.2 精液浓缩与稀释

将稀释后的精液分装进行离心处理，制成精子粥，再按照1∶1的比例用“三糖”血清液稀释。

3.1.3 平衡

置于6℃～8℃，保持25～30 min。

3.1.4 滴冻

在降温的铝板上滴成0.5 ml的颗粒，置于液氮面1 cm处5 min，之后投入液氮中保存。

3.1.5 解冻

将冻精颗粒投入到升温到40℃的解冻液中，复苏10 min后，镜检0.3级以上即可输精。

3.2 细管冻精的制作

3.2.1 原精液的处理

原精液用等温的缓冲液按1：1的比例稀释。

3.2.2 精液浓缩与稀释

将稀释后的精液分装进行离心处理，制成精子粥，稀释液为I液和Ⅱ液。

I液：基础液加入一定量的卵黄和抗生素配制而成，用作精液第一次稀释。

Ⅱ液：Ⅱ液中加入甘油等抗冻剂，配制而成用作精液第2次稀释。

3.2.3 平衡

加入I液置于3℃～4℃，保持2～3 h。加入Ⅱ液置于3℃～4℃，保持2～2.5 h。

3.2.4 冷冻

精液吸入0.5 ml细管封口后，置于液氮面3 cm处8 min，之后投入液氮中保存。

3.2.5 解冻

将细管冻精放入39℃水浴15 s，镜检0.3级以上即可输精。

3.3 人工授精技术的研究和应用

3.3.1 人工授精程序

包括采精、精液稀释、精液分装、精液保存、检查、输精等基本环节。

3.3.1.1 直肠检查

通过直肠检查，触摸卵巢来确定母驴的发情配种适期。

3.3.1.2 采精

①台驴的选择与保定：选择处在发情期，体格健壮、温顺、经产母驴。将选定好的台驴保定在采精栏旁。②假阴道的准备：安装好假阴道，先用75%酒精消毒内胎及集精杯，待挥发后，再用稀释液冲洗。灌入1 500～2 000 ml的42℃的温水，使假阴道内壁温度保持在39℃～41℃。吹气加压，使内胎缩成三角形为宜。用玻璃棒蘸润滑剂抹至假阴道内壁的前1/3。③清洗公驴外生殖器：用软毛巾蘸温水清洗种公驴外生殖器。④采精：采精员站在台畜右侧，右手握采精筒，待种公驴阴茎勃起，爬上台驴后，顺势轻托公驴阴茎，导入假阴道。公驴射精后，立即将假阴道的气孔打开，慢慢放气，假阴道随即逐渐竖起，使全部精液流入集精杯内，以纱布封口，送到精液处理室。

3.3.1.3 精液检查

①肉眼观察：精液用四层纱布过滤到集精杯内，以便除去胶质，随即用肉眼观察，如发现异常色要分析原因，停止使用。同时记录射精量。②镜检：用显微镜观察精子活力，并计算密度和畸形镜子数，同时分别记录。

3.3.1.4 输精

将受配母驴保定，对外阴部消毒后，再用煮沸凉温水冲洗，并用消毒纱布擦干。输精时，输精员站在母畜后方偏左侧，右手握输精胶管，五指形成锥形，缓慢插入母畜阴道内，快速握住子宫颈，将精液胶管插入子宫颈口内，轻缓注入精液。然后缓慢抽出输精胶管，并用手指轻轻按捏子宫颈外口以刺激子宫颈收缩，防止精液外流。经多次观察、试验，驴的最佳输精时间为有发情表现后24～48h。

在乌拉泊科创畜牧繁育中心和项目区色也克乡、策勒乡建立了种公驴冻精实验室，进行冻精颗粒的制作，共计制作2.16万剂冻精，在喀什、和田等地进行推广。经统计分析，人工授精较自然交配，其繁殖受胎率提高10%，驴人工授精技术在新疆首次成功应用，极大地促进了土种驴的良种化进程。

3.3.2 技术要点

3.3.2.1 发情鉴定

在季节性多次发情家畜中，驴由于受生殖激素的作用和神经系统的调节出现周期性发情。与牛不同的是在激素类型上是属于促卵泡素（FSH）占优势的类型，所以发情期较长，间情期较短。因此驴的发情鉴定较牛、羊、猪等难掌握。为确保适时配种时机和减少配种次数，提高母驴的受胎率，掌握发情鉴定技术尤为重要。母驴的发情鉴定以直肠检查为主，结合试情法、外部观察法和阴道检查确定适宜的配种时间。

3.3.2.2 适时输精

驴的发情季节多在2～8月份，以5、6月份居多。发情周期为22～25 d，每次发情持续7～14 d，排卵多在发情的第7～10 d内，而常于发情停止前的12～24 h排卵，给母驴配种应在排卵前1～36 h进行。

3.3.3 注意事项

3.3.3.1 输精注意事项

①输精部位应在子宫体或子宫角基部为宜，不要过深，一般输精管插入子宫颈口5～7 cm为好。

②输精量为15～20 ml，但要保证输入有效精子数为2亿～5亿个。

③输精速度要慢，以防精液倒流。注射器内不要混入空气，防止感染。发现精液倒流时，可用手捏住宫颈，轻轻按摩，促使子宫收缩，或轻压背腰部，使其伸展，并牵行运动。

3.3.3.2 为避免疾病的传播，应使用一次性输精器材。

国家公益性行业（农业）科研专项（201003075）、自治区科技兴新项目（2011039A13）、自治区重大专项项目（201230116—8）、自治区高新项目（201411106）。

肖海霞（1975.11—），女，副研究员，在职博士，主要从事动物遗传育种与繁殖的研究。

托乎提·阿及德，研究员。