犬精液动态参数分析与研究

2015-01-04 09:19朱文烨
中国工作犬业 2015年5期
关键词:精液精子生育

徐 明 朱文烨

犬精液动态参数分析与研究

徐 明 朱文烨

就犬繁育而言,在公母比例为1∶6的生产群中,公犬精液品质出现问题对受胎率的影响是母犬的6倍。因母犬发情周期较长,一次空胎便使育种的世代间隔增加半年,给警犬繁育工作带来巨大的影响。而通过产仔数量来判断公犬生育能力缺乏准确性和存在滞后性。因而强化对犬精液质量检测,不仅能使犬繁育工作顺利开展,也能减少繁育工作的成本和时间,更是向各级一线公安机关提供量足质优受训犬的保障。

本文旨在通过对种公犬精液动态参数的分析与研究,对精液动态参数中的9项动态参数值(VCL、VSL、VAP、ALH、BCF、M AD、LIN、W O B、STR)的正态分布范围进行观察,用精液动态参数分析法为诊断公犬不育提供参考依据。

一、实验设计

本实验对警犬的精液中的动态参数进行检测,计算确定各项数值的正态分布范围。通过与生育障碍组以及不育组的对比分析,找到影响公犬生育的各项因素。从而总结出一套较为科学,实践操作性强,能应用于临床判断公犬生育能力的检测标准,提高公犬的繁殖水平及产仔量。

(一)生育正常组的检验

1.实验材料

实验用公犬:选取年龄均为2周岁以上,体成熟、性成熟,平均窝产6头以上的公犬。饲养地点设在某警犬基地。

饲养条件:采取分舍饲养。犬舍为半开放式。采取自由饮水,限量采食的方式。日粮按每头犬每日0.45千克某成犬粮饲喂,并喂少量牛肉稀饭,每日进食两次,采取“对时制”方式饲喂。每日由基地繁育员定点散放,时间为半小时。所有犬的饮食及活动量基本一致。

实验仪器及软件:本实验所使用的仪器为W LJ Y-9000精子质量检测系统及相关的恒温设备(北京伟力技贸公司提供),所使用的数理统计材料软件为SAS数理统计软件。

2.实验方法

选取符合实验条件的种公犬15头,使用人工手握法对其分别进行采样、保存。利用W LJ Y-9000型精子质量检测系统对公犬的精液动态参数以及精子活力、精子活率进行检测。所获得的数据通过SAS数理统计软件进行计算,并且各参数检测正常范围均以x±s表示,从而确定生育正常组各项动态参数的正态分布范围。

(二)生育障碍组的检验

1.实验材料

实验用公犬:分别选取少精液(精液量<2m l)、精液密度低(密度<0.8亿每毫升)、精子畸形(畸形率>15%)、精子活力低(A级精子<30%)的2周岁以上,体成熟、性成熟的公犬进行分组比较检测。

饲养条件及实验软件同前。

2.实验方法

使用人工手握法对实验犬分别进行采样、保存。利用W LJ Y-9000精子质量检测系统对公犬的精液动态参数以及精子活力、精子活率进行检测。所获得的数据通过SAS数理统计软件进行计算,与生育正常组进行比较分析,从而获得各种参数对于犬生育能力的影响程度。

(三)不育组的检验

1.实验材料

实验用公犬:选取年龄均为2周岁以上,体成熟、性成熟,无生育能力的公犬。饲养地点设在某警犬基地。

饲养条件及实验软件同前。

2.实验方法

使用人工手握法对实验犬进行分别采样、保存。利用W LJ Y-9000精子质量检测系统对公犬的精液动态参数(VCL、VSL、VAP、ALH、BCF、M AD、LIN、W O B、STR 9项参数)以及精子活力、精子活率进行检测。所获得的数据通过SAS数理统计软件进行计算,并与生育正常组进行比较分析,确定造成犬不育的主要动态参数有哪些?

二、实验过程与结果

(一)实验过程

1.采精

对于首次采精和主动防御性强的公犬而言,犬主人必须在场,采精前先让公犬排尿,清理公犬腹部及包皮,剪掉包皮周围的毛,用0.1%高锰酸钾溶液将公犬包皮附近洗净消毒,并用生理盐水冲洗干净。

2.镜检

采集后的精液,在17℃环境下经过20m in的液化。打开W LJ Y-9000精子质量检测系统的动态分析功能,输入犬相关信息。点击“活动显示”按钮,点击“计算分析”按钮,再点击视野中任意位置开始分析,在数据选用对话框中点击选择“采用此组数据”,提示是否结束分析下一场次时选“是”,此时进入下一场次的分析,移动检测板使视野发生变化,再点击视野中任意位置开始分析,如此反复,取6~8个视野。此时结束分析,检测系统自动生成该精液样本的各项动态参数数据。

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(二)实验结果

本实验是对利用W LJ Y-9000精子质量检测系统所检测出的各项动态参数(VCL、VSL、VAP、ALH、BCF、M AD、LIN、W O B、STR、活力、活率)数值,采用数理统计方法中根据数据的分布范围及数量,选取数据中95%置信区间进行计算,从而获得的正常生育组各项精液动态参数的正态分布范围。

正态分布范围的计算公式:

X±1.96S (注: S表示标准差)

(注: x表示平均值,n表示样标本数量)

1.生育正常组检验结果(见表1、表2)

正常组犬动态参数数据(表1)

正常组犬动态参数数据(表2)

4

生育障碍组犬动态参数数据(表3)

3.不育组检验结果(见表5、表6)

(三)实验分析

由于实验所获得的样本数据数量十分有限,为了能获取较有参考依据的种公犬精液动态参数总体情况,仅靠这些数据是远远不够的。所以需要使用生物统计学中关于利用样本均数和样本标准差求总体均数的方法对所获得的数据进行计算、验证,以确定所获得的数据是否具有参考价值,能否做为衡量精液质量的具体标准,故需要对所求数据中各项动态参数的T进行检验,检验结果是总体均数相等,故承认其存在研究的价值。

生育障碍组犬动态参数数据(表4)

不育组犬动态参数数据(表5)

不育组犬动态参数数据(表6)

1.正常组与生育障碍组的比较(见表7)

精液动态参数的t值表(表8)

精液动态参数的各t值表(表9)

由此可以得到各数据的t值,具体见表8。

2.正常组与不育组的比较(见表9)

3.相关性检测

为了获晓实验数据间是否具有相关性。故取9项动态参数中的VSL作为统计计算中的自变量,其余参数为因变量(LIN、W O B、STR为参数比值,故不列入分析范围),来求取各数据间的关系。利用公式:

(注:r表示相关性)

可求得:

VSL与各动态参数的相关性(表10)

由此可见:VSL在变化过程中与VAP、BCF、VCL存在着显著的相关性,而于MAD、ALH的相关性不显著。为了检测其与VAP、BCF、VCL所存在的关系,则进一步利用公式对其进行一元线性回归求解。结果:随着精子直线速度(VSL)的上升,其曲线速度(VCL)、平均路径速度(VAP)上升明显,而鞭打频率(BCF)呈下降趋势。

三、实验结论

(一)经实验检测的30例样本经过t检验证实:具有生物统计参考价值,能够做为衡量精液质量总体情况的具体标准。

(二)正常精液组和异常精液组各项精子动态参数比较,均存在统计学差异; 随着精子活动的下降,曲线速度(VCL)、直线速度(VSL)、平均路径速度(VAP)、平均移动角度(MAD)、侧摆幅度(ALH)、前向性(STR)下降明显,鞭打频率(BCF)呈上升趋势,而直线性(LIN)、摆动性(W OB)差异无显著性。

(三)单个动态参数间无显著性差异,即无法直接作为判断公犬生育能力的标准。由此而得出的结论是:警犬精子动态参数不一定能提供直接判断公犬生育能力的诊断依据,但是能在评估精液质量时,提供重要的参考价值,可以对公犬繁殖能力的诊断、治疗和研究提供充分的依据。

(作者单位:公安部南昌警犬基地,330100)

(编辑:李 冰)

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