盐酸甲氧氯普胺注射液中抗氧剂亚硫酸氢钠的含量测定

吴浩萍+蒋宇丹+陆嘉悦

摘   要   目的：建立盐酸甲氧氯普胺注射液中抗氧剂亚硫酸氢钠的含量测定方法。方法：基于在SO2存在下能使酸性品红溶液褪色的原理，采用比色法在549 nm 波长处测定吸光度， 用标准曲线法测定含量。结果：无水亚硫酸钠在9.917～29.75 mg/ml，吸光度的倒数与其浓度（以SO2计）呈良好的线性关系，r = 0.999，平均回收率为99.3%。结论：该方法操作简单，结果准确可靠，可作为制剂中抗氧剂亚硫酸氢钠的含量测定。

关键词    亚硫酸氢钠    盐酸甲氧氯普胺注射液    比色法    质量控制

中图分类号：R975.4; R927.1; O657.32            文献标识码：A            文章编号：1006-1533（2014）23-0071-03

Determination of antioxidant sodium bisulfite

in metoclopramide dihydrochloride injection

WU Haoping*， JIANG Yudan， LU Jiayue

（Shanghai Harvest Pharmaceutical Co.， Ltd.， Shanghai 201206， China）

ABSTRACT   Objective： To develop a method for the determination of sodium bisulfite in metoclopramide dihydrochloride injection. Methods： Based on the fading of fuchsin acid solution in the present of SO2， a colorimetric method was established to be used for the determination of absorbance at the wavelength of 549 nm. The amount of sodium bisulfite in sample was calculated by reference to a calibration curve obtained. Results： The reciprocal of absorbance and the concentrations of anhydrous sodium sulfite （calculated based on sulfur dioxide） showed a good linear relationship over the range of 9.917～29.75 mg/ml （r=0.999） with an average recovery of 99.3%. Conclusion： This method is simple and accurate and can be used for the determination of sodium bisulfite in metoclopramide dihydrochloride injection.

KEY WORDS    sodium bisulfite; metoclopramide dihydrochloride; colorimetric method; quality control

甲氧氯普胺又名胃复安，是多巴胺受体阻断剂，可抑制胃平滑肌松弛，具有强大的中枢性镇吐作用，临床上普遍用于癌症放、化疗和手术后的呕吐、反流性食管炎、胆汁反流性胃炎等胃肠道疾病[1]。盐酸甲氧氯普胺注射液中常加入亚硫酸氢钠作为抗氧剂，目前该注射液现行国家标准尚未对抗氧剂的含量进行控制[2]，也未有相关报道。亚硫酸氢钠在中国药典现行版中有收载，含量测定方法为容量分析法[2]1193，但该法不利于微量亚硫酸氢钠的测定，也无法消除注射液中其他成分的干扰。亚硫酸氢钠为亚硫酸氢钠与焦亚硫酸钠的混合物[2]1193，以二氧化硫（SO2）计算，文献[3-6]报道多采用离子色谱法和气相色谱法进行测定，考虑到成本问题，为增强注射剂的安全性，本文建立了比色法测定盐酸甲氧氯普胺注射液中亚硫酸氢钠的含量的方法。

仪器与试药

TU-1901紫外-可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）。CPA225D电子天平（德国Sartorius公司）。无水亚硫酸钠对照品（批号：20120201，含量100%）和亚硫酸氢钠（批号：120301，含量65.5%）均为湖南尔康制药股份有限公司产品。盐酸甲氧氯普胺注射液（1 ml：10 mg，Y120401、Y120402、Y120403）为本公司产品。其他试剂均为分析纯。

酸性品红溶液：取酸性品红0.34 g，置1 000 ml量瓶中，沿壁加浓硫酸1 ml，加水稀释至刻度，摇匀。

醋酸盐缓冲液：取乙酸钠40.8 g，加依地酸二钠0.8 g，置2 000 ml量瓶中，加水1 500 ml溶解后，用冰醋酸调节至pH 3.3，加水稀释至刻度，摇匀。

无水亚硫酸钠对照品溶液：取无水亚硫酸钠适量，用0.4 mg/ml依地酸二钠溶解并定量稀释制成每1 ml约含0.5 mg的溶液。

方法与结果

专属性试验

按处方量，不加亚硫酸氢钠，配制干扰溶液。分别精密量取干扰溶液2 ml和注射用水2 ml，分别置50 ml量瓶中，加酸性品红溶液2.0 ml，加醋酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀，室温放置1 h后，在549 nm波长处测定吸光度。另取盐酸甲氧氯普胺注射液1.0 ml，同法测定。结果显示，盐酸甲氧氯普胺注射液中盐酸甲氧氯普胺及其他辅料对本方法中亚硫酸氢钠的测定均无干扰，该方法具有较强专属性。

线性范围

分别精密量取无水亚硫酸钠对照品溶液（2、3、4、5、6 ml），置50 ml量瓶中，精密加酸性品红溶液2.0 ml，加醋酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀，室温放置1 h后，照紫外-可见分光光度法，在549 nm波长处测定吸光度。以无水亚硫酸钠浓度（以SO2计）为横坐标，吸光度的倒数为纵坐标，作标准曲线，Y=0.053 98X+1.249，r=0.999。无水亚硫酸钠（以SO2计）在9.917～29.75 mg/ml范围内，吸光度的倒数与浓度（以SO2计）线性良好。

重复性试验

取同一批供试品（批号：Y120401），按2.5项下操作，在549 nm波长处测定吸光度，照标准曲线法计算含量。结果测定6次含量的平均值为 0.047 4%（W/V），RSD为0.77%。

回收率试验

分别按处方量配制含处方量亚硫酸氢钠80%、100%、120%的盐酸甲氧氯普胺注射液，按2.5项下操作，在549 nm波长处测定吸光度，照标准曲线法测定含量，计算回收率。结果平均回收率为99.3%，RSD为1.3% （n=9）。

供试品测定

分别精密量取无水亚硫酸钠对照品溶液（2、3、4、5、6 ml），置50 ml量瓶中，精密加酸性品红溶液2 ml，加醋酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀，室温放置1 h后，在549 nm波长处测定吸光度。以对照品溶液吸光度的倒数与其浓度（以SO2计）拟合标准曲线。另取盐酸甲氧氯普胺注射液1.0 ml，同法测定，将吸光度的倒数代入标准曲线，计算。测定三批盐酸甲氧氯普胺注射液中亚硫酸氢钠（以SO2计）的含量分别为0.047 4%，0.047 6%，0.047 9%（W/V）。

讨论

亚硫酸盐在溶液中分解释放出的二氧化硫能使酸性品红溶液褪色，据此原理，参考文献建立了盐酸甲氧氯普胺注射液中亚硫酸氢钠的含量测定方法[7-11]。文献将样品放置时间确定为25 min[7]，但按该方法，吸光度小于0.3。为将吸光度控制在0.3～0.7，采用文献[12]将醋酸盐缓冲液的pH定为3.3。为此，重新确定反应时间。试验结果表明测定样品在室温放置45 min开始稳定，为减少对照品与供试品的反应误差，将反应时间定为1 h。在操作过程中，对照品与样品加酸性品红溶液和醋酸盐缓冲液的时间应平行进行，以减小实验误差。

取无水亚硫酸钠对照品溶液与盐酸甲氧氯普胺注射液供试品溶液，在400～600 nm波长扫描，最大吸收波长均在549 nm。故选择549 nm为检测波长。

市售亚硫酸氢钠因含有焦亚硫酸钠[2]1193，故参考文献选用相对稳定的无水亚硫酸钠作为对照品[11]，其纯度可达97%以上。并且在计算亚硫酸氢钠时，均以二氧化硫（SO2）计算。二氧化硫具有还原性，本法据此原理进行，若样品本身具有还原性或样品中含有其他还原剂，则该法不适合。

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（收稿日期：2014-07-24）