唐 伟,李多孚,彭洪霞(.川北医学院第二临床医学院/南充市中心医院,四川南充 637000;.川北医学院医学检验系008级,四川南充 637000)
C反应蛋白(CRP)是肝脏分泌的一种重要的急性时相反应蛋白,其临床应用广泛[1]。检测CRP的方法主要有免疫比浊法、荧光免疫法等,检测仪器有特种蛋白分析仪、生化分析仪以及床旁检测(POCT)仪。POCT作为一种快速检验手段,越来越受到临床科室的青睐。但POCT测定CRP要使用全血标本,而不同红细胞压积(HCT)量可能会干扰CRP的检测。对此,作者将速率散射比浊法检测血清CRP作为比较方法(IMMAGE 800),免疫比浊法检测全血CRP作为试验方法进行POCT,来评价两种方法检测CRP的一致性,以期为临床使用POCT设备者提供参考。
1.1 一般资料选取低HCT(<0.35)标本40例,其中男18例,女22例;正常HCT(0.37~0.50)标本40例,其中男19例,女21例;高HCT(>0.5)标本25例,其中男13例,女12例。分别用乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝管和无抗凝剂的真空管采集血液,抗凝管采血2mL,充分混匀,待用。真空管采血3mL,待血清分离后,4 000r/min离心5min,待用。采血后2h内完成全部检测。
1.2 仪器与试剂
1.2.1 NEPHSTAR PLUS三通道特定蛋白分析仪及其配套试剂(免疫比浊法),深圳市国赛生物技术有限公司产品。
1.2.2 IMMAGE 800特定蛋白分析仪及其配套试剂(速率散射比浊法),美国Beckman-coulter公司产品。
1.2.3 SYSMEX XE-2100全自动血细胞分析仪及配套试剂。
1.3 方法
1.3.1 室内质控在控条件下,XE-2100全自动血细胞分析仪检测全血标本HCT。
1.3.2 分别按照各仪器操作规程测定各组标本的全血CRP和血清CRP,记录结果。NEPHSTAR PLUS仪器试剂设定的HCT值是0.40,对低HCT组标本和高HCT组标本,测定结果按照仪器给定公式:校正结果=0.6÷(1-HCT)×全血CRP,进行结果换算。
1.4 统计学处理采用SPSS19.0对数据进行统计学分析,数据以±s(95%可信区间)表示,检测结果比较采用配对资料t检验,相关性分析采用直线相关分析。以α=0.05为检验水平,P<0.05为差异有统计学意义。
2.1 正常HCT标本,全血CRP和血清CRP结果差异无统计学意义(t=1.34,P>0.05),见表1。二者相关性良好,相关系数r=0.992,Y=0.996 X+0.063。见图1。
图1 正常HCT标本CRP的相关性
2.2 低HCT标本和高HCT标本,全血CRP与血清CRP测定结果差异有统计学意义(低HCT组t=3.25,P<0.05;高HCT组t=3.56,P<0.05),见表1。
表1 不同HCT测定全血CRP与血清CRP结果(±s,mg/L)
表1 不同HCT测定全血CRP与血清CRP结果(±s,mg/L)
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2.3 结果经过校正后,全血CRP测定结果与血清CRP测定结果差异无统计学意义(低HCT组t=1.53,P>0.05;高HCT组t=1.78,P>0.05),见表2。
表2 校正后全血CRP与血清CRP结果(±s,mg/L)
表2 校正后全血CRP与血清CRP结果(±s,mg/L)
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POCT仪器测定CRP,具有标本用量少,检测过程简便、快速等优点,能满足临床及时判断患者病情的需要。本研究结果显示,在HCT正常的情况下,NEPHSTAR PLUS测定的结果与IMMAGE 800所得结果有良好的相关性(r=0.992,P>0.05)。而在低HCT或高HCT的情况下,NEPHSTAR PLUS测定结果有明显的偏差,与相关文献所得结果基本一致[2-3]。但对所得值进行换算后,其结果与IMMAGE 800所得结果一致,说明校正公式的应用对于低或高HCT标本是必需的。这主要是由于CRP存在于循环血浆中,IMMAGE 800检测的是单位体积血清中的CRP量,POCT检测的是单位体积血液中的CRP量,二者明显有差异,不同的HCT直接导致单位体积内血浆比例不同;此外,在检测过程中,非正常浓度的红细胞会干扰比浊结果。POCT已设计了正常HCT条件下测定全血CRP的试验参数,并将其换算成单位体积血清中的作为报告方式。当患者血液的HCT与仪器的HCT设定值相近时,测得的CRP值就与其血清中的水平相近,否则就会出现偏差[3]。
临床上,大量体液、血液丢失,真性红细胞增多症、新生儿等均可引起HCT增高,各种原因引起的贫血可导致HCT降低,不同年龄也可引起HCT差异。不同海拔地区HCT也会出现超出正常范围的情况[4]。以上因素均可影响全血CRP测定结果的准确性,使用POCT设备有一定的局限性[5]。因此,在应用POCT检测CRP时,应重视标本的HCT值,才能保证检验结果的准确性。
[1]孔祥锋,陈明,王萍.高敏C-反应蛋白及颈动脉粥样硬化与急性脑梗死的关系[J].中华老年医学杂志,2010,29(8):629-631.
[2]隆维东,李坚,刘万彬.不同红细胞HCT对全血CRP测定的影响及校正措施[J].国际检验医学杂志,2012,33(1):107-109.
[3]甄萍,姚新洁,乔艳梅.全血C-反应蛋白快速检测的应用[J].临床血液学杂志,2011,24(10):585.
[4]宋晓萍,傅新文.血液分析仪对不同年龄组红细胞HCT参考值分析[J].实验与检验医学,2008,26(2):207.
[5]曾正莲,欧阳蓉.POCT血糖仪的质量管理及意义[J].国际检验医学杂志,2010,31(4):404.