结核感染T细胞斑点试验在结核病诊断中的应用价值

刘锐

(河北省胸科医院 河北石家庄 050041)

结核病是一种由结核杆菌感染所引起的慢性传染病,结核杆菌会入侵到人类机体中的各个器官,对人体造成了巨大的危害。通常情况下医院所采用的临床诊断方法为结核菌素试验(TST),但此方法受患者自身的免疫力影响大,故灵敏性和特异性不够。国外学者以结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT-TB)的方法,具有高灵敏性和特异性的特点。本研究通过比较T-SPOT-TB与TST,探讨二者在结核病诊断中的灵敏性和特异性。

1 资料与方法

1.1 临床资料

该试验收集了2013年7月-2014年5月的某医院的128例疑似结核病患者,这其中男72例,女56例,平均年龄(45±5.7)岁。肺结核及肺外结核疾病的明确诊断根据其临床表现、影像学检查、组织病理学和对抗痨治疗反应等判断标准。

1.2 检测方法

T-SPOP-TB检测方法:此试验方法需按照试剂盒中的说明书具体步骤进行操作。首先抽取这128例患者的外周静脉血液5ml,并分离出外周血单个核细胞(PBMC)。在抗体微量板中的4个小孔里分别注入不同的阳性对照物,分别是植物血凝素、阴性对照细胞培养液、A抗原早期分泌性靶抗原6以及B抗原滤液培养蛋白10。

之后依次向4个小孔中加入2X105浓度的PBMC,并将其放在37℃条件下的CO2培养箱内等待20小时。再将PBS溶液进行洗脱处理后加入碱性磷酸酶标记的抗干扰素抗体,在室内常温条件下孵育处理2个小时,PBS溶液会在洗脱处理后显色,利用PBS溶液终止反应,会在细胞因子分泌处形成斑点,通过记录斑点数量检测出试验结果[1]。

TST检测方法:针对128例患者提取0.1ml的结核菌素,并对患者进行前臂尺侧皮内试验,2-3天内可看出试验结果,结果表明TST阳性结果是硬结直径≥10毫米。

1.3 评价指标

本次试验根据灵敏性、特异性以及假阳性率和假阴性率的数据作为结核病诊断试验的评价指标。

1.4 统计学处理结果

表1 T-SPOT-TB试验结果比较

表2 TST试验结果比较

数据以SPSS13.0软件分析,采用X2检验,P＜0.05表示差异具有统计学的意义。

2 结果

2.1 临床诊断结果

128例疑似结核病患者共确诊结核病85例,其中肺结核45例。肺外结核40例。

2.2 T-SPOT-TB试验与最终诊断结果进行比较

详细结果见表1。

2.3 TST试验结果与最终诊断结果比较

详细结果见表2。

2.4 两种方法比较研究

通过这两种方法的比较研究,T-SPOT-TB试验方法的灵敏度和特异性要优于TST方法(P＜0.05),而假阴性率和假阳性率则要明显低于TST试验方法[2]。

3 讨论

T-SPOT-TB试验方法是由西方发达国家传入到我国的,经过近几年的钻研,这项技术在结合结核病的诊断方面被证实有较高的灵敏性和特异性。在传统的结核病诊断方法中,更多的还是采取TST技术,该方法对诊断活动性结核病以及测定人类机体中的细胞免疫功能具有一定的参考意义,是临床中十分常见的判断结核病十分感染的重要指标[3]。根据我国的实际情况来看,大多数人都接种了卡介苗疫苗,会导致TST方法中的假阳性率偏高,因此在临床中作用有限。

而T-SPOT-TB试验方法主要是应用了结核分枝杆菌特异性抗原刺激PBMC的方法来检测抗原特异性T淋巴细胞的反应状况,并且不会受到卡介苗和人体自身免疫细胞的影响。

通过试验结果显示,T-SPOT-TB试验无论从灵敏性还是特异性上来看,都要明显优于传统的TST试验,同时,其假阳性率和假阴性率还要比TST方法低。根据这项结论可以看出,T-SPOT-TB试验更加适用于结核病感染的诊断,能够有效避免误诊的产生,具有十分显著的意义。

[1]陶臻,曾娟.结核感染T细胞斑点试验在结核病诊断中的应用价值[J].临床肺科杂志,2012,(09):1632-1633.

[2]赵静,蒋彩花,汪运山,王海英.抗结核抗体及结核感染T细胞斑点试验在结核病诊断中的应用[J].中国防痨杂志,2009,(01):19-21.

[3]周晴,胡必杰,黄声雷,周春妹,高晓东,蒋文海,王学理,阴忆青.结核感染T细胞斑点试验在结核诊断中的价值[J].中华医院感染学杂志,2013,(07):1726-1728.