紫茎泽兰提取物对烟青虫的生物活性试验

华劲松+欧阳朝辉

基金项目 四川省教育厅科研重点项目（2012ZA151）。

摘要测试了4种浓度的紫茎泽兰提取液对烟青虫的触杀、胃毒和选择性忌避作用等室内生物活性。试验结果表明，紫茎泽兰提取物对烟青虫的胃毒作用效果比较明显，当浓度大于6 g/L，处理48 h后，烟青虫校正死亡率可达60%以上；选择性忌避作用也较为明显，浓度为10 g/L，处理48 h后，烟青虫忌避率可达为53.33%；而在触杀作用方面效果不太理想，作用较迟缓；对烟青虫的生物活性强度均随提取液浓度的增大和处理时间的延长而增强。

关键词烟青虫；紫茎泽兰提取物；生物活性

中图分类号S435.72文献标识码A文章编号 1007-5739（2014）11-0115-02

烟青虫（Helicoverpa assulta（Guenee））是烟草的一种重要害虫，广泛分布于我国各个烟区，严重影响烟叶的产量和质量[1]。目前我国防治烟青虫主要依赖化学农药，而化学农药的长期使用，不仅导致烟青虫天敌大量死亡，而且致使烟青虫对多种农药产生抗性，造成烟青虫再度猖獗，同时化学农药的大量使用还会导致环境污染，增加烟叶中农药残留，严重影响烟叶质量。面对当前化学农药使用产生的各种问题，植物源杀虫剂以其对害虫的独特作用机制，不容易产生抗药性，以及对天敌、人畜低毒、无残留污染等优点而成为国内外研究的热点。

紫茎泽兰（Eupatouium adenophorum Spreng）为菊科泽兰属，多年生草本植物，原产于墨西哥，自20世纪40年代传入我国，目前在云贵川等地已造成严重危害，是国家环保局公布的我国首批16种外来入侵性有害生物之一，其入侵性位居前列[2]，被称为“生物癌症”。随着对紫茎泽兰的化学成分、综合利用研究的深入，紫茎泽兰中含有杀虫生物活性物质已被证实，据报道，紫茎泽兰提取物对螨虫、菜青虫、蚜虫、仓储害虫等害虫具有较好的毒杀作用[3-5]。为验证将其应用到烟青虫防治上是否具有相同防治效果，笔者测定了几种浓度的紫茎泽兰提取液对烟青虫的室内生物活性，以探索其作为植物源杀虫剂对烟青虫的防治效果，并为紫茎泽兰的开发利用和烟青虫无公害防治提供参考。

1材料与方法

1.1试验材料

供试紫茎泽兰采集于西昌市袁家山，取其地上部分阴干后用粉碎机进行粉碎，然后过40目筛，按乙醇∶紫茎泽兰体积比约4∶1加入95%乙醇，浸泡约24 h，用布氏漏斗进行过滤，再重复浸泡5次，混合所有的浸提液，用旋转蒸发仪进行浓缩直至提取物呈膏状，且重量不再变化，称重、密封，并进行低温避光保存备用。供试烟草品种为凉山州烟草公司提供的云烟85。供试烟青虫采集于德昌县麻栗乡未喷过农药的烟田，将采回的烟青虫卵放在培养皿中让其孵化，饲养至3龄进行触杀、胃毒和选择性忌避试验。幼虫饲养及试验的条件为：温度为（25±2）℃，湿度为75%~80%，光照为16∶8（L∶D）。

1.2试验方法

1.2.1提取液浓度设置。用少量甲醇将提取物溶解，待溶剂自然挥发干后，用含0.1%吐温80的蒸馏水（测定胃毒作用时不加）将提取物稀释成10、6、3、1 g/L等4种浓度作为供试药液。

1.2.2触杀作用测定。采用小型喷雾器喷雾法。取直径为15 cm的玻璃培养皿，在其中放入1张中性滤纸，在上面滴几滴清水用来保湿，接入健康活泼、生长发育一致的3龄幼虫，每皿20头，手持小型喷雾器对准幼虫喷雾，每皿喷药液约1 mL，以喷含0.1%吐温80的蒸馏水为对照。在培养皿中放入1张新鲜幼嫩的烟叶供幼虫取食，叶柄用浸水的脱脂棉包裹，培养皿用保鲜膜封口，用昆虫针扎若干气孔，于喷药12、24、48 h后检查死虫数并计算死亡率和校正死亡率，每处理重复3次。判断烟青虫死亡以细毛笔触及足和触角等附肢时完全不动为死亡[6-8]。计算公式如下：

死亡率（%）=死虫数/总虫数×100

校正死亡率（%）=[（处理死亡率-对照死亡率）/（1-对照死亡率）]×100

1.2.3胃毒作用测定。取新鲜的烟草叶片，将叶柄剪整齐插入药液中浸泡48 h后取出，用浸水的脱脂棉包裹叶柄放入直径为15 cm的培养皿中，培养皿中先放1张中性滤纸，滴清水保湿，然后接入健康活泼、生长发育一致的3龄幼虫（试验前饥饿5 h），每皿20头。对照叶柄浸蒸馏水。培养皿用保鲜膜封口，并用昆虫针扎若干气孔。于12、24、48 h后检查死虫数并计算死亡率和校正死亡率，重复3次[9]。

1.2.4选择性忌避作用测定。将新鲜的烟草叶片剪成直径为7.5 cm的圆叶，用药液涂抹叶片正、反两面，待药液晾干，烟叶表面形成药膜后放入培养皿中，对照用含0.1%吐温80的蒸馏水涂抹。每培养皿中放置2片烟草叶片，药液和蒸馏水处理各1片。将3龄幼虫接入培养皿中，每培养皿接虫20头，培养皿用保鲜膜封口，并用昆虫针扎通气孔，于12、24、48 h后检查烟草叶片上烟青虫栖息数量，并计算忌避率。每处理设重复3次。忌避率（%）=[（对照叶片栖息虫数-处理叶片栖息虫数）/（对照叶片栖息虫数+处理叶片栖息虫数）]×100。

2结果与分析

2.1紫茎泽兰提取物对烟青虫的触杀作用

紫茎泽兰提取物对烟青虫的触杀效果如表1所示。从表1可以看出，紫茎泽兰提取物对烟青虫有一定的触杀作用，但浓度较小时，触杀效果不是很明显，3、1 g/L浓度的紫茎泽兰提取物喷药48 h后，烟青虫校正死亡率仅有16.96%、11.86%。同时，紫茎泽兰提取物对烟青虫的触杀作用较慢，喷药12 h后，4个浓度处理的烟青虫死亡数都较少，但随着处理时间的延长其触杀作用持续增强，喷药24 h和48 h后，各处理的烟青虫死亡数增多，10、6 g/L浓度喷药48 h后，烟青虫校正死亡率分别达到55.91%、40.66%，各浓度处理之间差异达到极显著水平。

2.2紫茎泽兰提取物对烟青虫的胃毒作用

紫茎泽兰提取物对烟青虫具有较强的胃毒作用（表2），即使1 g/L浓度处理，48 h后对烟青虫也有明显的胃毒作用，校正死亡率达21.43%。当紫茎泽兰提取物浓度大于6 g/L时，其校正死亡率可达60%以上；而且从处理烟青虫后不同时间的校正死亡率还可以看出，随着时间的延长，各浓度处理的校正死亡率都呈明显上升趋势，48 h后，10、6、3、1 g/L浓度的紫茎泽兰提取物处理的校正死亡率分别比24 h时增加了24.29%~41.23%。

2.3紫茎泽兰提取物对烟青虫的选择性忌避作用

紫茎泽兰提取物对烟青虫具有一定的选择性忌避作用，其作用随浓度的增大而增强（图1）。48 h后，10、6、3、1 g/L浓度处理烟青虫忌避率分别为53.33%、36.67%、6.67%、3.33%，各处理间差异达极显著水平。同时，低浓度处理（1、3 g/L）对烟青虫的忌避率随着时间的延长呈逐渐下降的趋势，高浓度处理（6、10 g/L）对烟青虫的忌避率随着时间的延长逐渐呈上升趋势。由此可见，紫茎泽兰提取物中含有对烟青虫有驱避作用的物质，在浓度大于6 g/L时，对其忌避效果较好。

3结论与讨论

目前研究表明，植物源杀虫剂对昆虫的防治作用方式主要有触杀作用、胃毒作用、忌避作用等[6]。本试验结果表明，紫茎泽兰提取物对烟青虫的生物活性以胃毒作用效果最好，其次是选择性忌避作用，在触杀作用方面，虽然有一定的效果，但需要的浓度较大，时间较长。

目前大多数植物源农药研究还停留在粗提物和复配阶段，对进一步的有效活性成分分析及杀虫作用毒理研究较少。试验中发现紫茎泽兰提取物防治烟青虫具有较好的效果，因此应对其提取物中的活性物质进行分离纯化，以明确其有效成分及结构，使其成为一种植物源杀虫剂而被开发利用，为紫茎泽兰综合防治利用和烟草优质无害化生产提供理论基础。

4参考文献

[1] 朱贤朝，王彦亭，王智发.中国烟草病虫害防治手册[M].北京：中国农业出版社，2002.

[2] 候太平，刘世贵.有毒植物紫茎泽兰研究进展[J].国外畜牧学：草原与牧草，1998（4）：8.

[3] 李小平，胡学难，罗兴毅.紫茎泽兰提取液防治柑桔全爪螨田间药效试验[J].贵州农业科学，1995（1）：48-49.

[4] 王一丁，高平，张其红，等.紫茎泽兰灭蚜活性物质的分离、纯化及其对棉蚜乙酰胆碱酯酶的影响[J].高技术通讯，2002（9）：21-23.

[5] 李云寿，邹华英，佴注，等.紫茎泽兰精油各馏份对4种仓库害虫的杀虫活性[J].西南农业大学学报，2000，22（4）：331-333.

[6] 商显坤，曾涛，曾宪儒.植物源农药对蚜虫控制作用的研究概述[J].广西植保，2009，22（4）：21-24.

[7] 商显坤，韦德卫，周兴华，等.广西4种外来入侵植物提取物对烟蚜的生物活性[J].广西农业科学，2009，39（6）：763-766.

[8] 商显坤.鸦胆子提取物对烟蚜的生物活性研究[J].西南农业学报，2009，21（6）：1591-1594.

[9] 程丽坤，刘小侠，张青文，等.紫茎泽兰提取物对美洲大蠊和米蛾的忌避活性[J].昆虫知识，2007，44（4）：538-541.

基金项目 四川省教育厅科研重点项目（2012ZA151）。

摘要测试了4种浓度的紫茎泽兰提取液对烟青虫的触杀、胃毒和选择性忌避作用等室内生物活性。试验结果表明，紫茎泽兰提取物对烟青虫的胃毒作用效果比较明显，当浓度大于6 g/L，处理48 h后，烟青虫校正死亡率可达60%以上；选择性忌避作用也较为明显，浓度为10 g/L，处理48 h后，烟青虫忌避率可达为53.33%；而在触杀作用方面效果不太理想，作用较迟缓；对烟青虫的生物活性强度均随提取液浓度的增大和处理时间的延长而增强。

关键词烟青虫；紫茎泽兰提取物；生物活性

中图分类号S435.72文献标识码A文章编号 1007-5739（2014）11-0115-02

烟青虫（Helicoverpa assulta（Guenee））是烟草的一种重要害虫，广泛分布于我国各个烟区，严重影响烟叶的产量和质量[1]。目前我国防治烟青虫主要依赖化学农药，而化学农药的长期使用，不仅导致烟青虫天敌大量死亡，而且致使烟青虫对多种农药产生抗性，造成烟青虫再度猖獗，同时化学农药的大量使用还会导致环境污染，增加烟叶中农药残留，严重影响烟叶质量。面对当前化学农药使用产生的各种问题，植物源杀虫剂以其对害虫的独特作用机制，不容易产生抗药性，以及对天敌、人畜低毒、无残留污染等优点而成为国内外研究的热点。

紫茎泽兰（Eupatouium adenophorum Spreng）为菊科泽兰属，多年生草本植物，原产于墨西哥，自20世纪40年代传入我国，目前在云贵川等地已造成严重危害，是国家环保局公布的我国首批16种外来入侵性有害生物之一，其入侵性位居前列[2]，被称为“生物癌症”。随着对紫茎泽兰的化学成分、综合利用研究的深入，紫茎泽兰中含有杀虫生物活性物质已被证实，据报道，紫茎泽兰提取物对螨虫、菜青虫、蚜虫、仓储害虫等害虫具有较好的毒杀作用[3-5]。为验证将其应用到烟青虫防治上是否具有相同防治效果，笔者测定了几种浓度的紫茎泽兰提取液对烟青虫的室内生物活性，以探索其作为植物源杀虫剂对烟青虫的防治效果，并为紫茎泽兰的开发利用和烟青虫无公害防治提供参考。

1材料与方法

1.1试验材料

供试紫茎泽兰采集于西昌市袁家山，取其地上部分阴干后用粉碎机进行粉碎，然后过40目筛，按乙醇∶紫茎泽兰体积比约4∶1加入95%乙醇，浸泡约24 h，用布氏漏斗进行过滤，再重复浸泡5次，混合所有的浸提液，用旋转蒸发仪进行浓缩直至提取物呈膏状，且重量不再变化，称重、密封，并进行低温避光保存备用。供试烟草品种为凉山州烟草公司提供的云烟85。供试烟青虫采集于德昌县麻栗乡未喷过农药的烟田，将采回的烟青虫卵放在培养皿中让其孵化，饲养至3龄进行触杀、胃毒和选择性忌避试验。幼虫饲养及试验的条件为：温度为（25±2）℃，湿度为75%~80%，光照为16∶8（L∶D）。

1.2试验方法

1.2.1提取液浓度设置。用少量甲醇将提取物溶解，待溶剂自然挥发干后，用含0.1%吐温80的蒸馏水（测定胃毒作用时不加）将提取物稀释成10、6、3、1 g/L等4种浓度作为供试药液。

1.2.2触杀作用测定。采用小型喷雾器喷雾法。取直径为15 cm的玻璃培养皿，在其中放入1张中性滤纸，在上面滴几滴清水用来保湿，接入健康活泼、生长发育一致的3龄幼虫，每皿20头，手持小型喷雾器对准幼虫喷雾，每皿喷药液约1 mL，以喷含0.1%吐温80的蒸馏水为对照。在培养皿中放入1张新鲜幼嫩的烟叶供幼虫取食，叶柄用浸水的脱脂棉包裹，培养皿用保鲜膜封口，用昆虫针扎若干气孔，于喷药12、24、48 h后检查死虫数并计算死亡率和校正死亡率，每处理重复3次。判断烟青虫死亡以细毛笔触及足和触角等附肢时完全不动为死亡[6-8]。计算公式如下：

死亡率（%）=死虫数/总虫数×100

校正死亡率（%）=[（处理死亡率-对照死亡率）/（1-对照死亡率）]×100

1.2.3胃毒作用测定。取新鲜的烟草叶片，将叶柄剪整齐插入药液中浸泡48 h后取出，用浸水的脱脂棉包裹叶柄放入直径为15 cm的培养皿中，培养皿中先放1张中性滤纸，滴清水保湿，然后接入健康活泼、生长发育一致的3龄幼虫（试验前饥饿5 h），每皿20头。对照叶柄浸蒸馏水。培养皿用保鲜膜封口，并用昆虫针扎若干气孔。于12、24、48 h后检查死虫数并计算死亡率和校正死亡率，重复3次[9]。

1.2.4选择性忌避作用测定。将新鲜的烟草叶片剪成直径为7.5 cm的圆叶，用药液涂抹叶片正、反两面，待药液晾干，烟叶表面形成药膜后放入培养皿中，对照用含0.1%吐温80的蒸馏水涂抹。每培养皿中放置2片烟草叶片，药液和蒸馏水处理各1片。将3龄幼虫接入培养皿中，每培养皿接虫20头，培养皿用保鲜膜封口，并用昆虫针扎通气孔，于12、24、48 h后检查烟草叶片上烟青虫栖息数量，并计算忌避率。每处理设重复3次。忌避率（%）=[（对照叶片栖息虫数-处理叶片栖息虫数）/（对照叶片栖息虫数+处理叶片栖息虫数）]×100。

2结果与分析

2.1紫茎泽兰提取物对烟青虫的触杀作用

紫茎泽兰提取物对烟青虫的触杀效果如表1所示。从表1可以看出，紫茎泽兰提取物对烟青虫有一定的触杀作用，但浓度较小时，触杀效果不是很明显，3、1 g/L浓度的紫茎泽兰提取物喷药48 h后，烟青虫校正死亡率仅有16.96%、11.86%。同时，紫茎泽兰提取物对烟青虫的触杀作用较慢，喷药12 h后，4个浓度处理的烟青虫死亡数都较少，但随着处理时间的延长其触杀作用持续增强，喷药24 h和48 h后，各处理的烟青虫死亡数增多，10、6 g/L浓度喷药48 h后，烟青虫校正死亡率分别达到55.91%、40.66%，各浓度处理之间差异达到极显著水平。

2.2紫茎泽兰提取物对烟青虫的胃毒作用

紫茎泽兰提取物对烟青虫具有较强的胃毒作用（表2），即使1 g/L浓度处理，48 h后对烟青虫也有明显的胃毒作用，校正死亡率达21.43%。当紫茎泽兰提取物浓度大于6 g/L时，其校正死亡率可达60%以上；而且从处理烟青虫后不同时间的校正死亡率还可以看出，随着时间的延长，各浓度处理的校正死亡率都呈明显上升趋势，48 h后，10、6、3、1 g/L浓度的紫茎泽兰提取物处理的校正死亡率分别比24 h时增加了24.29%~41.23%。

2.3紫茎泽兰提取物对烟青虫的选择性忌避作用

紫茎泽兰提取物对烟青虫具有一定的选择性忌避作用，其作用随浓度的增大而增强（图1）。48 h后，10、6、3、1 g/L浓度处理烟青虫忌避率分别为53.33%、36.67%、6.67%、3.33%，各处理间差异达极显著水平。同时，低浓度处理（1、3 g/L）对烟青虫的忌避率随着时间的延长呈逐渐下降的趋势，高浓度处理（6、10 g/L）对烟青虫的忌避率随着时间的延长逐渐呈上升趋势。由此可见，紫茎泽兰提取物中含有对烟青虫有驱避作用的物质，在浓度大于6 g/L时，对其忌避效果较好。

3结论与讨论

目前研究表明，植物源杀虫剂对昆虫的防治作用方式主要有触杀作用、胃毒作用、忌避作用等[6]。本试验结果表明，紫茎泽兰提取物对烟青虫的生物活性以胃毒作用效果最好，其次是选择性忌避作用，在触杀作用方面，虽然有一定的效果，但需要的浓度较大，时间较长。

目前大多数植物源农药研究还停留在粗提物和复配阶段，对进一步的有效活性成分分析及杀虫作用毒理研究较少。试验中发现紫茎泽兰提取物防治烟青虫具有较好的效果，因此应对其提取物中的活性物质进行分离纯化，以明确其有效成分及结构，使其成为一种植物源杀虫剂而被开发利用，为紫茎泽兰综合防治利用和烟草优质无害化生产提供理论基础。

4参考文献

[1] 朱贤朝，王彦亭，王智发.中国烟草病虫害防治手册[M].北京：中国农业出版社，2002.

[2] 候太平，刘世贵.有毒植物紫茎泽兰研究进展[J].国外畜牧学：草原与牧草，1998（4）：8.

[3] 李小平，胡学难，罗兴毅.紫茎泽兰提取液防治柑桔全爪螨田间药效试验[J].贵州农业科学，1995（1）：48-49.

[4] 王一丁，高平，张其红，等.紫茎泽兰灭蚜活性物质的分离、纯化及其对棉蚜乙酰胆碱酯酶的影响[J].高技术通讯，2002（9）：21-23.

[5] 李云寿，邹华英，佴注，等.紫茎泽兰精油各馏份对4种仓库害虫的杀虫活性[J].西南农业大学学报，2000，22（4）：331-333.

[6] 商显坤，曾涛，曾宪儒.植物源农药对蚜虫控制作用的研究概述[J].广西植保，2009，22（4）：21-24.

[7] 商显坤，韦德卫，周兴华，等.广西4种外来入侵植物提取物对烟蚜的生物活性[J].广西农业科学，2009，39（6）：763-766.

[8] 商显坤.鸦胆子提取物对烟蚜的生物活性研究[J].西南农业学报，2009，21（6）：1591-1594.

[9] 程丽坤，刘小侠，张青文，等.紫茎泽兰提取物对美洲大蠊和米蛾的忌避活性[J].昆虫知识，2007，44（4）：538-541.

基金项目 四川省教育厅科研重点项目（2012ZA151）。

摘要测试了4种浓度的紫茎泽兰提取液对烟青虫的触杀、胃毒和选择性忌避作用等室内生物活性。试验结果表明，紫茎泽兰提取物对烟青虫的胃毒作用效果比较明显，当浓度大于6 g/L，处理48 h后，烟青虫校正死亡率可达60%以上；选择性忌避作用也较为明显，浓度为10 g/L，处理48 h后，烟青虫忌避率可达为53.33%；而在触杀作用方面效果不太理想，作用较迟缓；对烟青虫的生物活性强度均随提取液浓度的增大和处理时间的延长而增强。

关键词烟青虫；紫茎泽兰提取物；生物活性

中图分类号S435.72文献标识码A文章编号 1007-5739（2014）11-0115-02

烟青虫（Helicoverpa assulta（Guenee））是烟草的一种重要害虫，广泛分布于我国各个烟区，严重影响烟叶的产量和质量[1]。目前我国防治烟青虫主要依赖化学农药，而化学农药的长期使用，不仅导致烟青虫天敌大量死亡，而且致使烟青虫对多种农药产生抗性，造成烟青虫再度猖獗，同时化学农药的大量使用还会导致环境污染，增加烟叶中农药残留，严重影响烟叶质量。面对当前化学农药使用产生的各种问题，植物源杀虫剂以其对害虫的独特作用机制，不容易产生抗药性，以及对天敌、人畜低毒、无残留污染等优点而成为国内外研究的热点。

紫茎泽兰（Eupatouium adenophorum Spreng）为菊科泽兰属，多年生草本植物，原产于墨西哥，自20世纪40年代传入我国，目前在云贵川等地已造成严重危害，是国家环保局公布的我国首批16种外来入侵性有害生物之一，其入侵性位居前列[2]，被称为“生物癌症”。随着对紫茎泽兰的化学成分、综合利用研究的深入，紫茎泽兰中含有杀虫生物活性物质已被证实，据报道，紫茎泽兰提取物对螨虫、菜青虫、蚜虫、仓储害虫等害虫具有较好的毒杀作用[3-5]。为验证将其应用到烟青虫防治上是否具有相同防治效果，笔者测定了几种浓度的紫茎泽兰提取液对烟青虫的室内生物活性，以探索其作为植物源杀虫剂对烟青虫的防治效果，并为紫茎泽兰的开发利用和烟青虫无公害防治提供参考。

1材料与方法

1.1试验材料

供试紫茎泽兰采集于西昌市袁家山，取其地上部分阴干后用粉碎机进行粉碎，然后过40目筛，按乙醇∶紫茎泽兰体积比约4∶1加入95%乙醇，浸泡约24 h，用布氏漏斗进行过滤，再重复浸泡5次，混合所有的浸提液，用旋转蒸发仪进行浓缩直至提取物呈膏状，且重量不再变化，称重、密封，并进行低温避光保存备用。供试烟草品种为凉山州烟草公司提供的云烟85。供试烟青虫采集于德昌县麻栗乡未喷过农药的烟田，将采回的烟青虫卵放在培养皿中让其孵化，饲养至3龄进行触杀、胃毒和选择性忌避试验。幼虫饲养及试验的条件为：温度为（25±2）℃，湿度为75%~80%，光照为16∶8（L∶D）。

1.2试验方法

1.2.1提取液浓度设置。用少量甲醇将提取物溶解，待溶剂自然挥发干后，用含0.1%吐温80的蒸馏水（测定胃毒作用时不加）将提取物稀释成10、6、3、1 g/L等4种浓度作为供试药液。

1.2.2触杀作用测定。采用小型喷雾器喷雾法。取直径为15 cm的玻璃培养皿，在其中放入1张中性滤纸，在上面滴几滴清水用来保湿，接入健康活泼、生长发育一致的3龄幼虫，每皿20头，手持小型喷雾器对准幼虫喷雾，每皿喷药液约1 mL，以喷含0.1%吐温80的蒸馏水为对照。在培养皿中放入1张新鲜幼嫩的烟叶供幼虫取食，叶柄用浸水的脱脂棉包裹，培养皿用保鲜膜封口，用昆虫针扎若干气孔，于喷药12、24、48 h后检查死虫数并计算死亡率和校正死亡率，每处理重复3次。判断烟青虫死亡以细毛笔触及足和触角等附肢时完全不动为死亡[6-8]。计算公式如下：

死亡率（%）=死虫数/总虫数×100

校正死亡率（%）=[（处理死亡率-对照死亡率）/（1-对照死亡率）]×100

1.2.3胃毒作用测定。取新鲜的烟草叶片，将叶柄剪整齐插入药液中浸泡48 h后取出，用浸水的脱脂棉包裹叶柄放入直径为15 cm的培养皿中，培养皿中先放1张中性滤纸，滴清水保湿，然后接入健康活泼、生长发育一致的3龄幼虫（试验前饥饿5 h），每皿20头。对照叶柄浸蒸馏水。培养皿用保鲜膜封口，并用昆虫针扎若干气孔。于12、24、48 h后检查死虫数并计算死亡率和校正死亡率，重复3次[9]。

1.2.4选择性忌避作用测定。将新鲜的烟草叶片剪成直径为7.5 cm的圆叶，用药液涂抹叶片正、反两面，待药液晾干，烟叶表面形成药膜后放入培养皿中，对照用含0.1%吐温80的蒸馏水涂抹。每培养皿中放置2片烟草叶片，药液和蒸馏水处理各1片。将3龄幼虫接入培养皿中，每培养皿接虫20头，培养皿用保鲜膜封口，并用昆虫针扎通气孔，于12、24、48 h后检查烟草叶片上烟青虫栖息数量，并计算忌避率。每处理设重复3次。忌避率（%）=[（对照叶片栖息虫数-处理叶片栖息虫数）/（对照叶片栖息虫数+处理叶片栖息虫数）]×100。

2结果与分析

2.1紫茎泽兰提取物对烟青虫的触杀作用

紫茎泽兰提取物对烟青虫的触杀效果如表1所示。从表1可以看出，紫茎泽兰提取物对烟青虫有一定的触杀作用，但浓度较小时，触杀效果不是很明显，3、1 g/L浓度的紫茎泽兰提取物喷药48 h后，烟青虫校正死亡率仅有16.96%、11.86%。同时，紫茎泽兰提取物对烟青虫的触杀作用较慢，喷药12 h后，4个浓度处理的烟青虫死亡数都较少，但随着处理时间的延长其触杀作用持续增强，喷药24 h和48 h后，各处理的烟青虫死亡数增多，10、6 g/L浓度喷药48 h后，烟青虫校正死亡率分别达到55.91%、40.66%，各浓度处理之间差异达到极显著水平。

2.2紫茎泽兰提取物对烟青虫的胃毒作用

紫茎泽兰提取物对烟青虫具有较强的胃毒作用（表2），即使1 g/L浓度处理，48 h后对烟青虫也有明显的胃毒作用，校正死亡率达21.43%。当紫茎泽兰提取物浓度大于6 g/L时，其校正死亡率可达60%以上；而且从处理烟青虫后不同时间的校正死亡率还可以看出，随着时间的延长，各浓度处理的校正死亡率都呈明显上升趋势，48 h后，10、6、3、1 g/L浓度的紫茎泽兰提取物处理的校正死亡率分别比24 h时增加了24.29%~41.23%。

2.3紫茎泽兰提取物对烟青虫的选择性忌避作用

紫茎泽兰提取物对烟青虫具有一定的选择性忌避作用，其作用随浓度的增大而增强（图1）。48 h后，10、6、3、1 g/L浓度处理烟青虫忌避率分别为53.33%、36.67%、6.67%、3.33%，各处理间差异达极显著水平。同时，低浓度处理（1、3 g/L）对烟青虫的忌避率随着时间的延长呈逐渐下降的趋势，高浓度处理（6、10 g/L）对烟青虫的忌避率随着时间的延长逐渐呈上升趋势。由此可见，紫茎泽兰提取物中含有对烟青虫有驱避作用的物质，在浓度大于6 g/L时，对其忌避效果较好。

3结论与讨论

目前研究表明，植物源杀虫剂对昆虫的防治作用方式主要有触杀作用、胃毒作用、忌避作用等[6]。本试验结果表明，紫茎泽兰提取物对烟青虫的生物活性以胃毒作用效果最好，其次是选择性忌避作用，在触杀作用方面，虽然有一定的效果，但需要的浓度较大，时间较长。

目前大多数植物源农药研究还停留在粗提物和复配阶段，对进一步的有效活性成分分析及杀虫作用毒理研究较少。试验中发现紫茎泽兰提取物防治烟青虫具有较好的效果，因此应对其提取物中的活性物质进行分离纯化，以明确其有效成分及结构，使其成为一种植物源杀虫剂而被开发利用，为紫茎泽兰综合防治利用和烟草优质无害化生产提供理论基础。

4参考文献

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