酸枣仁加锌合剂对睡眠剥夺小鼠综合学习记忆能力的影响

张红石，崔 淼，张昕烨，刘兴山

（长春中医药大学，长春 130117）

酸枣仁加锌合剂对睡眠剥夺小鼠综合学习记忆能力的影响

张红石，崔 淼，张昕烨，刘兴山*

（长春中医药大学，长春 130117）

目的 探讨酸枣仁加锌合剂对睡眠剥夺小鼠学习记忆能力的影响。方法 在对80只经过筛选获得学习记忆能力的小鼠进行分组。分为空白组、模型组、阳性组、实验组，在酸枣仁加锌合剂灌胃5 d后进行睡眠剥夺，按时间不同每组分为24 h组和36 h组。造模结束后分别对实验鼠进行水迷宫、避暗、跳台检测，观察其已获得的学习记忆能力的变化情况。结果 空白组与模型组之间存在统计学意义（P＜0.05），模型组与实验组之间存在统计学意义（P＜0.05），阳性药物组与模型组之间差异不稳定。结论 睡眠剥对机体的学习记忆能力有负面影响;酸枣仁加锌合剂对小鼠睡眠剥夺引起的学习记忆能力下降有所改善，能较好的维持小鼠已获得的学习记忆能力。

酸枣仁加锌合剂;睡眠剥夺;学习记忆能力;小鼠

睡眠剥夺（sleep deprivation，SD）是机体在一段时间内不能获得有效睡眠，而出现精神、心理、行为等方面改变的状态。医护人员在倒班中常易出现睡眠剥夺状态［1］，其对空间记忆学习能力影响较大［2］，严重影响职业能力和职业寿命。中药酸枣仁有较好的促进睡眠养心安神效果［3］，微量元素锌对睡眠剥夺造成学习记忆能力下降有保护作用［4］。为此，笔者在结合了中医饮食调护的基础上自制酸枣仁加锌合剂，通过水迷宫、避暗、跳台、自主活动实验，观察其对睡眠剥夺小鼠学习记忆能力的影响，报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物分组及给药 实验动物:健康昆明种小鼠160只，购自长春生物制品研究所有限责任公司，CSXK-（吉）2011-0007，经筛选后（通过各项学习测试获得学习能力者）选出80只，雌性各半，体质量18～22 g。实验分组:随机分成空白组20只（清水灌胃正常喂养组）、模型组20只（造睡眠剥夺模型清水灌胃组）、阳性组20只（造睡眠剥夺模型、葡萄糖酸碱灌胃组）、实验组20只（造睡眠剥夺模型、酸枣仁加锌合剂灌胃组）。在造模阶段每组又分为24 h组（40只）和36 h组（40只），雌雄各半。实验灌胃时间为在分组结束后、睡眠剥夺前，按人鼠比例换算0.1 mL/10 g给药，共给药5 d，5 d后开始进入睡眠剥夺状态。

1.1.2 主要药品与仪器 实验药品:二氧化钛（天津福辰，批号:20060220）、葡萄糖酸锌（哈药集团，批号:12030212）、酸枣仁（购自北京同仁堂，按人属比例生药量1∶8进行煎煮，即100 g酸枣仁800 mL清水，文火煎煮至药液浓缩100 mL后待用）。酸枣仁加锌合剂（每100 mL酸枣仁汤剂加100 mL含锌35.3 mg的葡萄糖酸锌）。实验仪器:BA-200避暗仪，香港万科;DT-200小鼠跳台仪，杭州雷琪;Morris水迷宫视频分析系统，成都泰盟。

1.2 实验方法

1.2.1 实验动物造模 采用改良多平台睡眠剥夺法（modified multiple plat-formmethod，MMPM），在标准大鼠笼内，倒入清水，水位平铺布满笼底，在笼底黏附10根直径在2 cm的方形木壮。每笼10只小鼠，当小鼠进入睡眠状态后会从木桩上掉落，因触水而达到觉醒，进而完成睡眠剥夺造模。造模时水温控制在22～23℃，每天持续日光灯照射，排除昼夜明暗交替。造模分24 h和36 h两个时间段。

1.2.2 水迷宫实验 Morris水迷宫（Morris water maze，MWM）试验是一种强迫实验动物游泳，学习寻找隐藏在水中平台的一种实验，主要用于测试实验动物对空间位置感和方向感（空间定位）的学习记忆能力。观察指标潜伏期、总距离、平均速度、朝向角［5］。

1.2.3 壁暗实验 利用鼠类的嗜暗习性而设计。记录反射建立过程中的主动回避反应指标来反映实验动物的学习、记忆能力的变化。观察指标潜伏期和次数［6］。

1.2.4 跳台实验 通过测试动物在平台上的潜伏期测试记忆，从而反应出实验动物的学习、记忆能力的变化。观察指标潜伏期和次数［7］。

2 实验结果

2.1 酸枣仁加锌合剂对24 h睡眠剥度小鼠水迷宫的影响 见表1。

表1 酸枣仁加锌合剂对24 h睡眠剥度小鼠水迷宫的影响（±s，n=10）

表1 酸枣仁加锌合剂对24 h睡眠剥度小鼠水迷宫的影响（±s，n=10）

注:与模型组比较，#P ＜0.05

组 别 潜伏期/s 总距离/cm 平均速度 朝向角空白组 84.70 ±20.47 1368.77 ±318.3015.81 ±2.48 39.45 ±16.25模型组 112.32 ±6.48 2113.16 ±200.16 17.78 ±3.21 82.50 ±26.28阳性组 77.24 ±15.92#1665.73 ±518.60#22.86 ±9.39 81.14 ±20.71实验组 81.85 ±22.84#1502.53 ±318.21#16.98 ±4.25 23.70 ±10.35

2.2 酸枣仁加锌合剂对36 h睡眠剥度小鼠水迷宫的影响 见表2。

表2 酸枣仁加锌合剂对36 h睡眠剥度小鼠水迷宫的影响（±s，n=10）

表2 酸枣仁加锌合剂对36 h睡眠剥度小鼠水迷宫的影响（±s，n=10）

注:与模型组比较，#P ＜0.05

组 别 潜伏期/s 总距离/cm 平均速度 朝向角空白组 85.07 ±16.86 1 409.01 ±162.3016.70 ±3.04 29.85 ±11.30模型组 115.62 ±11.98 2 445.47 ±376.47 18.42 ±2.24 65.95 ±49.69阳性组 78.09 ±26.48#1 536.29 ±412.08#22.86 ±9.39 81.14 ±50.71实验组 81.26 ±26.15#1 407.71 ±502.23#16.98 ±4.25 23.54 ±17.97

2.3 酸枣仁加锌合剂对睡眠剥夺小鼠避暗实验的影响 见表3。

表3 对睡眠剥夺小鼠避暗实验的影响（±s，n=20）

表3 对睡眠剥夺小鼠避暗实验的影响（±s，n=20）

注:与模型组比较，#P ＜0.05

组 别 24 h（n=10）潜伏期/s 次数/次36 h（n=10）潜伏期/s 次数/次空白组 281.0 ±46.50 1 260.2 ±44.964模型组 202.3 ±78.40 8 208.0 ±40.00 12阳性组 257.2 ±50.71# 5 243.5 ±62.60# 9实验组 268.0 ±15.49# 2 256.0 ±34.50#2

2.4 酸枣仁加锌合剂对小鼠睡眠剥夺模型跳台实验的影响 见表4。

表4 对小鼠睡眠剥夺模型跳台实验的影响（±s，n=20）

表4 对小鼠睡眠剥夺模型跳台实验的影响（±s，n=20）

注:与模型组比较，#P ＜0.05

组 别 24 h（n=10）潜伏期/s 次数/次36 h（n=10）潜伏期/s 次数/次空白组 233.0±44.9△ 3 259.0±18.7△1模型组 121.6 ±18.5 17 132.0 ±50.2 4阳性组 158.3 ±50.7 8 208.5 ±47.6# 6实验组 182.0 ±66.2# 2 179.3 ±48.7#4

3 小结

水迷宫、避暗、跳台均属于探讨实验动物学习记忆能力的行为学实验。笔者将其引入研究酸枣仁加锌合剂对睡眠剥夺影响的研究，探讨其对睡眠剥夺后小鼠记忆能力的影响。在水迷宫实验中参考值潜伏期和总距离，模型组与其他组别均有统计学意义，而平均速度、倾向角由于小鼠游泳随机性较大，并没有出现倾向性结果。避暗实验和跳台实验，模型组与实验组比较均有统计学意义，而阳性组与模型组在跳台实验中无统计学意义，证明阳性组对学习记忆的影响并不稳定，还需要有其他干预手段配合使用。本实验结果表明，酸枣仁加锌合剂对小鼠睡眠剥夺引起的学习记忆能力下降有所改善，能较好的维持小鼠已获得的学习记忆能力。

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［1］张咏梅，江智霞，王连红，等.护理轮班导致睡眠剥夺对人体免疫功能的影响［J］.护理研究，2011，25（3）:259-260.

［2］陈景元，张云，杨瑞华.睡眠剥夺对大鼠空间学习记忆能力的影响［J］.卫生研究，2007，3（2）:234-236.

［3］李成芹.热浸酸枣仁治疗冠心病失眠患者60例护理体会［J］.泰山医学院学报，2010，31（6）:473-474.

［4］陈俊，李积胜，王华仁，等.锌对睡眠剥夺大鼠学习记忆及大脑皮层一氧化氮合酶的影响［J］.解放军预防医学杂志，2005，23（2）:89-91.

［5］王绪平，呙登俊，陈宇，等.Morris水迷宫实验评价血管性痴呆大鼠模型的学习记忆能力［J］.中华中医药学刊，2013，31（1）:99-100.

［6］赵施施，张科学，包素红，等.丙泊酚对幼小鼠自主活动和学习记忆行为的影响［J］.中国药理学通报，2013，29（2）:198-201.

［7］袁力勇，戴体俊，苏珍，等.跳台实验训练后小鼠自然遗忘时间的观察［J］.徐州医学院学报，2007，27（2）:84-85.

Mixture of spina date seed and zinc gluconate for the ability of learning and memory of sleep deprived mice

ZHANG Hongshi，CUI Miao，ZHANG Xinye，LIU Xingshan*
（Changchun University of Chinese Medicine，Changchun 130117，China）

ObjectiveTo explore the effects of Mixture of Spina Date Seed and Zinc Gluconate for the ability of learning and memory of sleep deprived（SD）mice.Methods80 mice that have got the ability of learning and memory were divided into four groups，including blank group，model group，positive group and experimental group.5 days later，get rid of sleep that time is 24 hours and 36 hours，of 80 mice after they were gavaged with the mixture.The end of the building，the four groups mice were tested in water maze，avoid dark，diving platform，to observing the changes of the acquired the ability of learning and memory.ResultsCompare of blank group and model group，there is the significant difference（P ＜0.05）.Compare of model group and experimental group，there is the significant difference（P ＜0.05）.But there is no stable difference between the positive group and model group.ConclusionSleep deprivation has negative effect of learning and memory ability;The mixture of Spina Date Seed and Zinc Gluconate can improve the mice's ability of learning and memory，as well as can better maintain the acquired ability of learning and memory of mice.

mixture of spina date seed and zinc gluconate;sleep deprived;the ability of learning and memory;mouse

R285.5

A

2095－6258（2014）05－0782－03

10.13463/j.cnki.cczyy.2014.05.008

国家中医药管理局重点学科南京中医药大学中医护理学开放课题项目（ZYHL0305-2）。

张红石（1979－），女，硕士研究生。研究方向:中医康复护理理论与实践。

刘兴山，男，教授，硕士研究生导师，电话:0431-86045377。

2014－01－11）