XT-4000i血液分析仪血小板两种测定方法与血涂片复检的对比分析

2014-09-11 02:35刘美玲曾颖
中国卫生产业 2014年11期
关键词:抗法涂片分析仪

刘美玲 曾颖

广州医学院荔湾医院,广东广州 510170

现阶段,随着医疗技术的不断发展完善,同时也促进了医学检验学的进步,对临床上诸多疾病的诊断提供了准确的借鉴[1]。血小板由于其特殊性,检测结果容易受到血小板聚集、红细胞等因素的影响,然而应用全自动血液分析仪对血小板进行检测有较高的准确性,具有较好的临床应用价值。本文选择在我院进行血常规检查的患者120例作为研究对象,旨在探讨血小板采用XT-4000i血液分析仪两种测定方法与血涂片复检对比,具体信息如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本组共选择研究对象120例,男72例,女48例,年龄6~80岁,平均(63.5±2.7)岁。均为门诊和住院行血常规检测的病例。

1.2 仪器及试剂

准备EDTA-K2抗凝管,Sysmcx XT 4000i全自动血液分析仪,双目光学显微镜。应用原装配套试剂,严格参照仪器说明书操作,定期校准、质控。仪器在检测前状态良好,应用瑞氏染色法染色血涂片。

1.3 方法

遵循不重复原则,从Sysemx XT-4000i检测血常规标本中选择研究对象,其中无提示有血小板直方图异常,电阻抗法(PLTI)计数正常者40例(观察组A),提示有血小板直方图异常,PLT-I计数>100×109/L40例 (观察组B),提示有血小板直方图异常,PLT-I计划数<100×109/L 40例(观察组C),涂片镜检对血小板形态分布和数量进行观察,间接计数血小板,并用光学(PLT-0)行血小板计数。依据《临床检验基础》相关要求制作血涂片,需达边缘整齐,头体尾分明,厚薄适宜。待血液片干燥后,选择瑞氏染色液进行染色镜检,从50%红细胞互相重叠区域观察,逐渐至红细胞完全散开区域,使用油镜观察血小板形态与数量。通常情况下,有10~15个血小板分布于油镜视野之下。<8个,可对血小板减少初步证实,>30个为血小板增加。细胞形态异常在油镜下标准为:红细胞碎片:有不完整的各种形状的细胞碎片存在;小红细胞:<6um直径;血小板聚集:>5个血小板成堆;大、巨大血小板:直径4~6μm或直径>6μm。血小板显微镜下计数:应用城垛式计数方法,在血片体尾交界处区,对N目测血小板数即100个血小板无重复计数,并记录N目测白细胞数即所有涉及视野的白细胞总数,患者血小板严重减少,计数血小板不少于50个;参考仪器计数的白细胞数,对血小板总数进行计算,N仪器×(N目测血小板数/N目测白细胞数)×109/L=血小板数量N。

1.4 统计学分析

统计学软件采用SPSS 13.0版,组间计量数据采用(x±s)表示,计量资料行t检验,P<0.05差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血小板计数结果

采用电阻抗法、光学法、镜检法测得的血小板计数见表1。

表 1 不同方法血小权计数结果[(s)×109/L]

表 1 不同方法血小权计数结果[(s)×109/L]

组别 例数 电阻抗法 光学法 镜检法观察组A观察组B观察组C 40 40 40 192±48.3 249±82.7 66.7±13.5 195±48.2 200±82.1 92.4±15.8 197±49.7 203±85.6 94.8±16.2

2.2 干扰因素

观察组A中无干预因素存在,观察组B小红细胞干扰12例,红细胞碎片干扰28例,观察组C中大血小板干预24例,血小板聚集16例。以镜检为参考,在观察组A中与电阻抗法、光学法比较,P>0.05,故大部分仪器应用电阻抗法。

2.3 干扰因素影响

在大血小板、红细胞碎片、小红细胞组中,镜检和电阻抗法计数有差异(P<0.05),镜检和光学法无差异(P>0.05),就准确性而方,光学法优于电阻抗法。但在血小板聚集组织中,镜检法和电阻抗法有差异(P<0.05),镜检法和光学法计数结果有差异(P<0.05)。光学法有一定局限性存在。见表2。

表 2 干扰因素对计数结果影响分析[(±s),×109/L]

表 2 干扰因素对计数结果影响分析[(±s),×109/L]

注:与镜检法比较,*P<0.05。

组别 小红细胞 红细胞碎片 大血小板 血小板聚集电阻抗法光学法镜检法229±99.1*203±97.4 200±99.5 257±102*237±102 240±105 75.3±8.2*94.5±7.8 96.1±8.4 53.8±8.0*58.3±8.3*102±8.5

3 讨论

在临床止血凝血的检查中,血小板计数是较为重要的观察指标之一。电阻抗检测属于传统的检测技术,然而其检测参数仅为细胞体积,无法将干扰物质进行完全的区分,例如病理样本中的细胞碎片、小红细胞、大血小板,因此不能提供准确的检测结果。所以为确保血小板计数结果的可靠性,通过应用全自动血液分析仪能够很大程度弥补上述的不足[2-3]。

本次研究显示,光学法可使大血小板、红细胞碎片、小红细胞对计数血小板的影响较好消除,但血小板计数受血小板聚集的影响无法消除。相较仪器自动血小板,血小板采用血涂片观察优点较明显[4-5]。通常肉眼在显微镜下,可对细胞碎片、红细胞、血小板区分,在对血小板聚集情况进行观察时,可将血小板凝集、大血小板、细胞碎片、小红细胞对血小板的干预排除,并对各种细胞比例直接计数,为显微镜检对血小板间接计数运用基础[6]。可用PLT-I法作临床实际工作的常规标本检测,若标本特殊时,需行PLT-0法再检,以获取可靠的血小板结果,降低复查例数,节约成本,特殊病例可用显微镜法复查,为临床诊断提供准确参考依据。

综上,血小板检测中,应用光学法可较好消除大血小板、小红细胞等对计数的影响,但血小板聚集时产生的计数干扰无法消除,需结合镜检,以提高检测准确性。

[1]吕红艳,刘雪莲.机采血小板适宜人群的探讨[J].当代医学,2011,17(31):80-81.

[2]Va1erie L.Va1uation of the performance of the sysmex XT-2000ihemato1-ogy ana1yzer with who1e b1oods stored at room temperature[J].Vet C1in Patho1,2009(38):230-241.

[3]罗丽贞,叶金锋,刘伟阳.XE-5000血细胞分析仪血小板计数性能评价[J].检验医学与临床,2011,8(4):400-402.

[4]刘善凤,干利民,曾筱倩,等.涂片镜检对初步纠正血小板假性降低的意义[J].临床血液学杂志,2010,23(4):193-195.

[5]Anton H Sutor,M D.Astrid Croh Mann.ct a1.Prnh1cmswith p1ate1et counting in thromhocytopenis A rapid manna1method tomeusur e 1ow p1ate1et coun1s.Seminar a in thrombosisand bemosiasis,2001,27(3):237-243.

[6]刘发新,孙东明.毛细血管血放置时间对红细胞和血小板测定结果的影响[J].中国社区医师:医学专业,2012,17(14):250.

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