GP73与AFP联合检测对原发性肝癌的诊断价值

王延峰, 李南阳, 任雅玲, 薛秀斌, 李林臣, 曹蕾春, 贾儒渊, 于小平

(河北省张家口市第一医院, 河北 张家口, 075000)

原发性肝癌(PHC)为最为常见的恶性肿瘤之一，早期多缺乏典型表现，起病隐匿，且不少患者就诊时已为晚期，失去了手术治疗的最佳时期，故死亡率较高[1]。另外，因中国属于多种慢性肝病的高发地区，进而造成原发性肝癌发病率有增高趋势，其诊断早期主要依赖CT、MRI、超声等影像学检查与甲胎蛋白(AFP)的检测。AFP是目前肝癌诊断中应用最为广泛的标志物，敏感度约40%～65%，特异度约76%～96%，但约1/3肝癌患者AFP检测可呈阴性结果[2]。近年来研究发现，高尔基体糖蛋白(GP73)在肝癌早期诊断中具有一定临床应用价值[3]。为探讨GP73与AFP联合检测对早期PHC诊断的价值，本文回顾性分析66例PHC患者的临床资料，报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取本院2010年8月—2013年7月就诊的疑为PHC患者99例，以最终诊断为PHC的66例作为观察组，其中男43例，女23例，年龄37～66岁，平均(50.7±14.4)岁；所有患者均符合中国抗癌协会肝癌专业委员会于2000年发布的《原发性肝癌诊断标准》[4], 均经病理学诊断确认为肝细胞癌，并除外其他组织器官恶性肿瘤病史，均未接受放化疗治疗。随机选取同期在本院接受健康体检的正常人66例作为对照组，其中男44例，女22例，年龄36～67岁，平均(51.3±14.2)岁，均无系统性疾病病史，且肝功能化验正常。2组人员均除外妊娠哺乳期妇女，且在性别、年龄方面比较差异无统计学意义(P>0.05), 具可比性。

1.2 方法

1.2.1 标本采集: 2组人员均使用 惰性分离胶真空采血管采集空腹静脉血3～5 mL, 于室温下静置30 min, 之后于离心机(半径为16 cm)以4 000 r/min的转速离心15 min, 将血清置-20 ℃冰箱冻存备用。

1.2.2 血清学检测方法: GP73检测使用美国Thermo公司生产的multriskanMK3酶标仪以及热景生物技术有限公司提供的试剂采用双夹心ELISA法进行检测；AFP则使用瑞士罗氏公司生产的Cobas6000全自动生化免疫分析仪以及配套试剂盒采进行检测。上述所有设备的操作均严格按照试剂说明书进行。其中AFP正常值为<25 ng/mL，GP73测量范围为0～250 ng/mL, 对于超过250 ng/mL的样本，则使用配套的稀释液稀释之后重复检测。

1.3 观察项目

对比2组患者血清AFP及GP73水平，对比AFP与GP73单独应用与联合应用对PHC的诊断敏感性、特异性及准确性。

1.4 统计学方法

2 结 果

2.1 2组患者血清AFP及GP73水平比较

经上述检测，观察组患者血清AFP及GP73水平均显著高于对照组(P<0.05)。见表1。

表1 2组患者血清AFP及GP73水平比较

2.2 AFP与GP73单独应用与联合应用对PHC的诊断价值比较

经上述检测，AFP单独应用对PHC诊断的敏感度为54.5%, 特异度为69.7%, 准确度仅为59.6%; GP73增高分别为69.7%、81.8%以及74.7%; 而二者联合应用则再次增高为87.9%、90.9%以及88.9%。3种方法对PHC诊断敏感度及准确度比较差异显著(P<0.05), 而特异度比较则未见明显变化(P>0.05)。见表2。

表2 AFP与GP73单独应用与联合应用对PHC的诊断价值比较

3 讨 论

PHC是目前全球范围内最为常见的恶性肿瘤之一，恶性程度极高，进展速度较快，预后较差，死亡率极高。该病是一个多因素共同作用、多阶段发展的最终结果，其发展需经历激发期、促进期及演进期3个阶段，若能在较早时期进行正规的医学干预，可能有效改变疾病进程，改善患者预后，提高患者生活质量[5]。对该病的高危人群，目前最为常用的检测手段即为定期检测血清AFP水平，并结合腹部超声、CT等影像学资料进行综合判断。但由于早期肿瘤体积较小，影像学检查可能较难发现。AFP虽是目前PHC诊断中应用最为广泛的血清学标志物，但30多年临床应用及统计学分析得出，其敏感性为40%～65%, 特异性76%～96%，另外有近1/3 PHC患者可表现为AFP阴性[6], 且在急慢性肝炎、肝硬化睾丸癌或卵巢癌等疾病患者中可有AFP水平的增高。因此，仅仅依赖AFP检测早期诊断PHC尚不够理想[7], 寻找一种敏感性及特异性均更高的新型血清学标志物成为近年来该病研究的热点和重点问题。随着近年来基因技术、蛋白质组分、肿瘤免疫等多方面研究的不断进展，一些新型的肝癌标志物脱颖而出。其中GP73被广泛认为在该病早期诊断中最具潜力，且最有可能作为广泛应用的新型PHC早期诊断的血清学标志物。GP73是国外相关学者在人巨细胞性肝炎的研究中发现的一种跨膜糖蛋白[8]。目前已经证实在稳定状态下，GP73是高尔基体顺面膜囊上的一种整合膜蛋白， 在肝脏组织中主要由胆管上皮细胞表达，肝细胞不表达或表达量极其微弱，但在病变肝细胞中的表达则明显增高[9-10]。这种表达的增高与急性肝损伤的触发及慢性肝脏重构及纤维化等有关[11]。为探讨AFP与GP73联合用于PHC诊断的应用价值，本文对66例PHC患者进行了相关检测和对比分析。结果显示，与正常人群比较，PHC患者血清AFP及GP73水平均明显增高。并通过统计其诊断的敏感度、特异度及准确度结果显示，单独应用AFP对PHC诊断的敏感度及准确性显著低于单独应用GP73，而单独应用GP73的敏感度及准确度均显著低于二者联合检测，但3种方法的特异度比较均无显著差异。由此可见，若能够联合检测上述2项指标对PHC进行早期诊断，可使诊断的敏感性和准确性大幅提升[12]。关于特异度的分析结果可能与本研究所采用的仅仅为相对较为特异的指标进行检测所致，并未与其他相关指标进行对比，故其差异并不明显。

[1] 房勇, 梁爽, 陈思佳, 等.中国北方地区隐源性肝炎及乙型肝炎表面抗原阴性肝癌患者中隐匿性HBV感染流行状况分析[J].国际免疫学杂志, 2013, 36(6): 472.

[2] 李利军, 李新丰, 王高雄.GP73联合AFP/VEGF检测对原发性肝癌的诊断价值[J].世界华人消化志, 2009, 17(29): 3056.

[3] 陈霖, 刘振红, 徐军, 等.血清标志物GP73在原发性肝癌诊断中的作用[J].中华实验和临床病毒学杂志, 2013, 27(6): 446.

[4] 中国抗癌协会肝癌专业委员会.原发性肝癌诊断标准[J].中华肝脏病杂志, 2000, 8(3): 135.

[5] 吴孟超.原发性肝癌在中国的治疗和研究现状[J].成都医学院学报, 2012, 7(2): 161.

[6] 白雪峰.常用肿瘤标志物在肝癌诊断中的应用现状[J].实用医药杂志, 2011, 28(5): 473.

[7] 沈秋瑾, 葛天翔, 覃文新.肝癌诊断生物标志物的研究进展[J].中华医学杂志, 2013, 93(10): 789.

[8] Kladney R D, Cui X, Bulla G A, et al.Expression of GP73, a resident golgi membrane protein, in viral and nonviral liver disease[J].Hepatology, 2002, 35(6): 1431.

[9] 朱国民, 周晓庆, 林长青.新肝癌标志物高尔基体蛋白GP73在肝癌血清学诊断中的应用[J].中华医院感染学杂志, 2010, 20(15): 2350.

[10] Bao Y X, Cao Q, Yang Y, et al.Expression and prognostic significance of Golgiglycoprotein73(GP73) with Epithelial-mesenchymal transition(EMT) related molecules in Hepatocellular Carcinoma (HCC)[J].Diagn Pathol, 2013, 61(9): 639.

[11] Sun G Z, Zhao X Y, Li J H, et al.Detection of alpha-fetoprotein-L3 using agglutinin-coupled spin column to be used in diagnosisof hepatocellular carcinoma[J].Zhonghua YiXue ZaZhi, 2008, 88(28): 1986.

[12] 郭婧婧, 肖成锋, 钟白云, 等.GP73与AFP在原发性肝癌诊断中的意义[J].中国现代医学杂志, 2013, 23(31): 35.