宫颈癌新辅助化疗前后Survivin、VEGF和Ki-67的表达及临床意义

谢慧君, 袁明明, 王伟伟, 蔡德巍

(江苏省南通瑞慈医院 病理科, 江苏 南通, 226000)

宫颈癌为女性多发恶性疾病，治愈率低，转移率与复发率高，近年其发病率高居女性恶性肿瘤的第2位[1]。早期宫颈癌首选手术治疗，术前行新辅助化疗可使癌细胞局限，缩小肿瘤，杀灭肿瘤细胞，为手术创造条件，同时可提高患者的3年无瘤生存率[2]。对宫颈癌前病变及癌后的诊断, 对提高手术成功率及防止复发有重要意义。传统方法主要采用宫颈细胞涂片和活体组织学检查诊断宫颈癌，有一定局限性且易受观察者主客观因素的影响[3]。近年随着细胞因子广泛应用于宫颈癌诊断与治疗，将细胞学与免疫组化研究方法结合起来, 增加了宫颈癌诊断的准确率，从而提高临床治疗效果。本组探讨宫颈癌患者新辅助化疗前后Survivin、VEGF、Ki-67的表达及其临床意义，报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本院自2010年1月—2013年10月收治43例宫颈癌患者，均经病理学诊断确诊且为初治者。年龄54～78岁，平均(64.1±2.3)岁。组织学分级：G1级,4例; G2级, 24例; G3级, 15例。组织分化：高分化12例，中分化23例，低分化8例。FIGO分期[4]: ⅠB2期 9例，ⅡA2期4例, ⅡB期 30例。病理报告：有淋巴结转移者18例，未发现淋巴结转移者25例。按照肿瘤生长类型分为：内生型11例，外生型18例，溃疡型10例，颈管型4例。排除标准：化疗禁忌证者；合并其他恶性肿瘤者；心电图异常者；血白细胞计数<4×109/L, 血小板计数≥100×109。43例患者均签署知情同意书，且经本院伦理委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 新辅助化疗方法：采用TP方案，第1天，紫杉醇脂质体(160 mg/m2); 第2、3天奈达铂(80 mg/m2); 给药后间隔3周后，再给用1个疗程，共用2个疗程。疗程结束后手术切除病灶，予子宫广泛切除，同时行盆腔清扫术。

1.2.2 Survivin、VEGF和Ki-67检测：化疗前行宫颈组织活检，术后标本切片进行检测。免疫组织化学试剂均购自福州迈新生物技术开发有限公司，应用SP法，按照试剂盒要求进行检测。

1.3 疗效标准[5]

临床疗效标准：完全缓解(CR), 肿瘤完全消退；部分缓解(PR)，肿瘤显著减少且体积缩小大于50%; 无效(SD), 肿瘤体积有减少，但缩小不到50%; 进展(PD)，肿瘤变大，或者影像学检查有新病灶出现。总有效率=完全缓解率+缓解率。Survivin、VEGF和Ki-67检测阳性率：阳性，细胞质或细胞核中可见棕黄色颗粒分；弱阳性(+), 黄色占0～5%; 阳性(2+)，黄色占26%～50%; 强阳性(3+)，黄色占> 50%。

1.4 观察指标

分析新辅助化疗前、后Survivin、VEGF和Ki-67的表达；新辅助化疗的临床总有效率；疗效与Survivin、VEGF和Ki-67的表达。

2 结 果

2.1 Survivin、VEGF和Ki-67表达

化疗前Survivin、VEGF和Ki-67的阳性率分别为81.4%(35/43)、65.1%(28/43)、76.7%(33/43),化疗后分别为44.2%(19/43)、18.6%(8/43)、20.9%(9/43),化疗前与化疗后比较，差异有统计学意义(P<0.005)。见表1。

表1 新辅助化疗前、后Survivin、VEGF和Ki-67表达情况(n)

2.2 新辅助化疗的临床总有效率

43例宫颈癌化疗后, CR 14.0%(6/43), PR 65.1%(28/43), SD 18.6%(8/43)，PD 2.3%(1/43)，临床总有效率达为79.1%(34/43)。

2.3 有效率与Survivin、VEGF和Ki-67表达

Survivin阳性率完全缓解患者为0%(0/6), 部分缓解为35.7%(10/28)，而无效100%(8/8)和进展中100%(1/1),差异有统计学意义(P<0.005); VEGF完全缓解的患者阳性率为0%(0/6)，部分缓解为3.6%(2/28), 无效62.5%(5/8)和进展中100%(1/1),差异有统计学意义(P<0.005); Ki67阳性率在完全缓解患者为16.7%(1/6)，部分缓解为3.6%(1/28), 无效100%(8/8)和进展中100%(1/1),差异有统计学意义(P<0.005)。见表2。

表2 化疗后有效率与Survivin、VEGF和Ki-67表达(n)

3 讨 论

宫颈癌是发病率仅次于乳腺癌的女性常见恶性肿瘤，发展中国家发病率较多，且近年来发病有年轻化趋势[6]，其治疗目前多采用手术与新辅助化疗联合治疗。新辅助化疗是指在宫颈癌手术前或放疗前，行2～3个疗程化疗，主要针对高危型宫颈癌进行治疗，可减少宫颈癌患者盆腔淋巴结转移、宫旁组织侵袭率和血管间隙受侵率等不良预后，目前被广泛应用[7]。本组采用新辅助化疗即采用TP方案，给予紫杉醇脂质体与奈达铂联合应用。紫杉醇是目前唯一可促进微管聚合的新型抗肿瘤药物，可使肿瘤细胞停止于G2和M期，抑制肿瘤细胞合成，促进其凋亡，其脂质体具有靶向定位性。奈达铂与紫杉醇配合可以提高抑瘤率，交叉使用无耐药性、不良反应发生率[8]。宫颈癌的发生不仅与癌细胞的异常增殖有关，与细胞分化水平的改变也具有密切关系，是细胞癌变的关键步骤[9]。因此近年有关细胞因子的异常表达研究也受到了关注。宫颈上皮内瘤变与HPV感染、抑癌基因的失活、细胞癌基因的激活均有一定的相关性。Survivin是凋亡抑制蛋白(IAPs)家族的一员，参与宫颈癌细胞的激活。正常生理条件下胚胎发育受Survivin调控，同时在成人的大肠黏膜、子宫内膜等组织中Survivin均有低表达。而在恶性肿瘤组织中，如卵巢癌、宫颈癌、乳腺癌中Survivin为异常表达增高,因此可用来预示诊断疾病及进展情况[11-12]。Survivin在正常宫颈组织中呈现低表达，在宫颈炎组织中略有升高为微量表达，而在宫颈上皮内瘤变及早期宫颈癌中呈高表达，随着宫颈病变的进展，表达增加，与CIN级别的升高呈正相关[13-14]。本组研究表明，化疗前Survivin表达为81.4%，新辅助化疗后阳性率为44.2%, 表明化疗前恶性宫颈病变中Survivin为高表达，治疗后完全缓解患者中Survivin阳性率为0%, 部分缓解为35.7%, 而在无效和进展中Survivin阳性率均为100%，表明Survivin可反映宫颈疾病的进展，可以作为宫颈癌的预测及诊断指标。VEGF是重要的血管生成因子，VEGF可促进内皮细胞发生有丝分裂，有较强地促进血管生长作用，对肿瘤新生血管生长起到重要的促进作用，在肿瘤增生及复发中可刺激肿瘤血管新生[15-16]。VEGF高表达可使肿瘤生长呈不可控性，同时新生血管结构的不完整性和血管通透性增加，导致肿瘤细胞间隙增宽，肿瘤细胞更易进入血液循环，出现复发及远处转移。因此VEGF高表达不仅与癌症发病有关，还与癌症的复发和远处转移有显著相关性[17]。本组研究表明，化疗前VEGF表达为65.1%, 新辅助化疗后阳性率为18.6%, 表明化疗前恶性宫颈病变中VEGF为高表达，新辅助化疗后完全缓解患者中VEGF阳性率为0%, 部分缓解为7.1%, 而在无效和进展中, VEGF阳性率分别为62.5%及100%, 表明VEGF可作为宫颈癌的诊断指标。Ki67是一种细胞增殖标记物,是一种在细胞G1、G2、S、M期均会出现的核抗原，是近年最有前途的肿瘤标记物。正常生理条件下正常宫颈有表达, 在诊断宫颈病变时, Ki67常与其他抗体联合诊断肿瘤[18-19]。Ki67水平变化与癌症进展程度密切相关，可直接反映癌细胞增殖的程度，许多肿瘤研究中显示与肿瘤的分化程度、浸润、转移及预后密切相关，因此被广泛用于癌症的基因检测因子。本组研究表明，化疗前Ki67表达为76.7%, 新辅助化疗后阳性率为18.6%, 表明化疗前的恶性宫颈病变中Ki67为高表达，新辅助化疗后完全缓解患者中Ki67阳性率为16.7%, 部分缓解为3.6%, 而在无效和进展中, Ki67阳性率均为100%。

综上所述, Survivin、VEGF和Ki-67在新辅助化疗前阳性率显著高于新辅助化疗后，治疗有效的患者阳性率明显著低于无效患者。因此Survivin、VEGF和Ki-67在诊断宫颈癌疾病进展方

面有一定的应用价值。但由于本组样本量较小，且未比较不同病理分级、淋巴是否转移、肿瘤大小与相关基因因子表达的关系，同时3个基因因子之间的表达有无关联也暂未涉及，因此尚待进一步的研究探讨。

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