顶空-气相色谱法测定托芬那酸中有机溶剂残留

孙培锋 卢小逸 张启明

（浙江启明药业有限公司，浙江 上虞 312369）

托芬那酸是一种非甾体抗炎药，与其他的非甾体抗炎药类似，托芬那酸具有抗炎、镇痛及解热作用。在生产过程中，常用甲苯和DMF作为溶剂，导致托芬那酸中存在甲苯和DMF的有机残留，而有收录该产品的欧洲药典（EP7.5）均未对溶剂残留做相应的规定，鉴于其毒性，因此很有必要建立一种可以测定甲苯和DMF残留量的检测方法。本文根据2010版中国药典的要求，特制定了用顶空气相色谱法测定托芬那酸中有机溶剂残留量的方法。该法灵明度高，定量准确，分离度好。

1 仪器

1.1 仪器：Agilent 6890N气相色谱仪；Agilent7694E顶空进样器。

1.2 色谱条件：气相色谱柱：DB-624；柱温：初始柱温为60℃，保持3min后以20℃/min的速率升温至200℃，保持4min；检测器：FID；载气流量：N2，50ml/min；空气400ml/min，氢气40ml/min；温度：检测器250℃，进样口220℃，分流比：20：1。

1.3 顶空进样器条件：平衡温度：100℃；进样温度110℃；传输管温度120℃；样品平衡时间：30min。

2 试液

2.1 试药：托芬那酸（浙江启明药业有限公司，批号为：140501、140502、140503）；甲苯（分析纯）；二甲基甲酰胺（DMF）（分析纯）；二甲基亚砜（DMSO）（色谱纯）。

2.2 空白溶液的制备：取10ml顶空瓶3个，分别加入1ml的甲苯、DMF和DMSO。

2.3 供试品溶液的制备：精密称取3批托芬那酸各1.0g，分别置于3个10ml顶空瓶中，加DMSO1ml，摇匀，即得。

2.4 对照品储备溶液的制备：用微量注射器精密称取0.088gDMF和0.089g甲苯，分别置于有适量DMSO的100ml量瓶中，加DMSO至刻度，摇匀。

2.5 对照品溶液的制备：精密量取对照储备溶液各1.0ml，置同一个10ml量瓶中，加DMSO稀释至刻度，摇匀，即得。

3 方法与结果

3.1 系统适应性试验

取各空白溶液至顶空进样器内，经顶空进样色谱分析表明：R甲苯=4.169min，RDMF=5.054min，RDMSO=6.403min； 各 溶 剂峰分离度良好，符合要求。

3.2 系统精密度

将对照品溶液经顶空连续进样6次，记录色谱图。根据实验结果计算表明：RSD甲苯=0.84%；RSDDMF=0.31%， 甲 苯 和DMF的精密度满足要求。

3.3 线性及范围

线性溶液的配制：精密量取对照储备溶液 0.2ml、0.5ml、0.8ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml分别置于6个10ml量瓶中，用DMSO稀释至刻度，摇匀。分别移取1ml至6个10ml顶空瓶中。

将上述6种线性溶液及DMSO的空白溶液分别经顶空进样色谱分析，记录甲苯、DMF的峰面积。以检测物的峰面积（Y）为纵坐标，浓度（X）为横坐标进行线性回归。回归方程分别为： 甲苯：Y =1.1643X-4.9325，r=0.9995；DMF Y=0.3326X-18.019 r=0.9992。根据试验结果计算表明：在17.6～176μg /ml的范围内甲苯和DMF的线性关系良好。

3.4 检测限试验

分别取甲苯和DMF对照品储备溶液采用逐步稀释法，调节检测限试夜浓度，使峰高为基线噪音的3倍左右。结果最小检测浓度甲苯为0.3731μg/ml，DMF为2.3326μg /ml 。

3.5 回收率试验

精密称取140501批托芬那酸1.0g置于10ml顶空瓶中，平行操作10份，向瓶中分别加入1ml空白溶剂DMSO（1份），线性试验下对照0.8ml、1.0ml、1.5ml溶液各1ml平行3份（共9份），加盖摇匀溶解后经顶空进样分析，甲苯的平均回收率=97.5% RSD=0.4%（n=9），DMF的平均回收率=98.8% RSD=0.8% （n=9）。根据试验结果表明：此方法检测甲苯和DMF的回收率都在规定的范围内，证明本法具有较好的准确性。

3.6 样品检测

取DMSO空白溶液、对照品溶液和3批供试品溶液，经顶空进样分析，按外标法计算样品中甲苯和DMF的残留量。140501、140502和140503的3批托芬那酸产品残留溶剂均符合要求（甲苯均未检出；DMF140501=0.0242%；DMF140502=0.0186%；DMF140501=0.0215%）。

结语

托芬那酸中残留溶剂是指在合成和精制过程中使用的挥发性有机化学物质，在实际的生产中未能完全被清除。根据中国药典2010版二部残留溶剂测定法附表1的要求，甲苯的残留限度0.089%，DMF的残留限度为0.088%。本方法用顶空进样技术分析托芬那酸中残留的甲苯和DMF，要求精密度RSD≤10%，相关物质的分离度＞1.5，本法连续进样6针，各溶剂峰的RSD均小于2%，分离度均大于2%，最低检测限小于3μg /ml，回收率在98%左右，各项指标均符合中国药典的要求。故本方法适用于托芬那酸中残留溶剂的定量分析。

[1]European Pharmacopoeia， 7.5. 1238.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典（二部）[M].中国医药科技出版社，2010.