胃饲乙醇预处理对缺血再灌注大鼠肝脏HSP70表达和缺血再灌注损伤的影响*

张晓宁 张 劭

(南华大学附属第一医院，湖南 衡阳 421001)

肝脏缺血再灌注损伤是肝胆外科常见病理损伤，于肝脏相关手术中，因长时间部分或全阻断肝血流供应，致肝脏缺血再灌注，可能致肝细胞损伤与代谢紊乱，不仅影响手术安全还可能影响治疗与康复效果，因此探究缺血预处理方法(ischemia preconditioning,IPC)保护干细胞组织，抑制缺血再灌注损伤非常必要。本次研究以大鼠为实验对象，建立肝脏缺血再灌注损伤模型，以胃饲乙醇IPC，探讨其应用价值。

1 资料及方法

1.1 实验材料

购清洁级雄性大鼠150只，体重280～300 g，选用HSP70 SABC免疫生化试剂盒等试剂。

1.2 方 法

恒温喂养，标准养殖，以随机数字表达法分为实验组50只、实验对照组50只、正常组50只。胃饲乙醇IPC方法，于手术前12 h禁食，给予胃饲40%乙醇5.05 ml/kg体重后于24 h后将实验组与实验对照组分别制备肝脏缺血再灌注模型，缺血时间30 min。实验组建立模型后分别选模型大鼠10只于0、2、4、8、12h处死，于手术台上取肝右前叶组织，经处理后以10%甲醛溶液保存，选用自动切片机制备切片，以电镜行病理检验后进行免疫化学染色检验，取模型大鼠血液标本保存。实验对照组以同样时间、方法预胃饲生理盐水后行病理检验与相关生化检验。正常组不给予预处理，分别于0、2、4、8、12 h处死行病理学检查与相关生化检验。所有生化检验局试剂盒上标示操作方法进行操作。

1.3 统计学处理

2 结 果

2.1 手术及肝功能指标

所有手术均或成功，实验中未见死亡，建立肛血流再灌注模型时模型正常，未见并发消化道出血，恢复血流供应后肝颜均正常恢复，未见大面积坏死，可进行相关检验。经缺血预处理后，实验组、实验对照组肝功能(ALT)高于正常组，实验组4 h ALT指标高于实验对照组，实验组4 h ALT 指标高于其它时间值，对照组2 h ALT高于其它时间值，差异具有统计学意义(P<0.05)；正常组间不同时间段ALT指标差异不具有统计学意义(P>0.05)。

表1 三组大鼠不同时间段肝功能(ALT)指标

注：与正常组相比，*P<0.05；与实验组相比，**P<0.05；与其它时间段相比，△P<0.05。

2.2 HSP70 表达

实验组不同时间段HSP70 表达均高于实验组对照组、正常组，实验对照组高于正常组，实验组、实验对照组HSP70随着时间推移不断上升，差异具有统计学意义(P<0.05)，正常组各时间段HSP70指标差异不显著(P>0.05)(见表2)。

表2 三组大鼠不同时间段比较

注：与正常组相比，*P<0.05；与实验组相比，**P<0.05。

3 讨 论

HSP70是一种热休克蛋白，具有保护机体和细胞的功能，是临床判断细胞损伤重要指标。本次研究中作为肝细胞损伤标志物，同肝功能指标ALT作为实验指标。研究中经预处理两组模型大鼠HSP70随着时间推移，不断上升，较正常组差异显著(P<0.05)，说明预处理起到促进细胞修复的作用，联系波动ALT指标，胃饲乙醇较生理盐水保护效用更强，但作用的时间、效用峰值有一定差异。

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