王起来,常红叶
(1.吉林省人民医院,吉林长春130021;2.吉林省临床检验中心)
电化学发光免疫法和酶联免疫法检测血清糖类抗原125的对比分析
王起来1,常红叶2*
(1.吉林省人民医院,吉林长春130021;2.吉林省临床检验中心)
人体对发生发展中的肿瘤产生反应或肿瘤自身所产生的蛋白质、激素、酶及癌基因等物质统称为肿瘤标志物,正常人的血清中不存在或仅有很低浓度,且不同肿瘤患者血清中所表达的标志物也各有不同,故对特异性标志物的检测可作为相关肿瘤的观察指标,如早期诊断、评估预后、疗效观察以及术后复发、转移等。CA125是卵巢癌诊治过程中最常用的肿瘤标志物。本实验分别用电化学发光免疫法(ECLIA)和酶联免疫法(ELISA)检测血清糖类抗原125,对检测数据进行比较。
1.1 标本来源就诊于我院妇产科的106例卵巢癌患者血清,均经术后病理证实为卵巢癌者。
1.2 仪器与试剂电化学发光法采用瑞士罗氏Cobas e411全自动分析仪及其配套检测试剂;酶联免疫法采用ELX800全自动酶标仪及CA125诊断试剂盒(康乃格生物工程有限公司)。
1.3 测定方法采静脉血2管,每管3ml,凝血后每分钟3000转离心5min以分离血清,分别用ECLIA及ELISA检测CA125,记录检测数据。所有操作严格按照试剂及仪器操作使用说明书进行。化学发光法CA125线性范围及参考值分别为0.0-2000.0U/ml、0.0-35.0U/ml;酶联免疫法CA125线性范围及参考值分别为0.0-400.0U/ml、0.0-35.0U/ml。
1.4 统计学方法两种方法的检测数据用均数±标准差(¯x±s)表示,进行t检验,P<0.05为差异有统计学意义。
两组数据对比CA125在低浓度(0.0-35.0U/ml)和高浓度(400.1-2 000.0U/ml)有统计学差异;中浓度(35.1-200.0U/ml、200.1-400.0U/ml)无统计学差异,详见表1。
表1 ECLIA及ELISA检测CAl25结果比较
由于卵巢位处盆腔位置特殊,且早期卵巢癌无明显临床症状,常被患者忽视,延误治疗,多数患者确诊时已至中晚期,5年存活率仅为15%,但若能被早期诊断和治疗,其5年生存率可升高至94%[1]。故改善卵巢癌患者的预后情况早期诊断和治疗尤为重要。CA125是黏蛋白样糖蛋白的一种,分子量较高,共有氨基酸残基22152个,分子量在1000KD以上,由定位于染色体19p13.3的MUCl6基因编码,可被单克隆抗体OC125结合,CA125作为目前卵巢癌重要的相关抗原,被认为是检测卵巢上皮癌首选的肿瘤标记物。其在检测卵巢上皮肿瘤患者血清中的阳性率高达82%-94%,在临床实践中研究发现患者血清中CA125的值与临床病理分期有关,随着临床分期的增高,CA125的含量也随之增高。可见卵巢癌的发生、发展和转归与CA125在患者血清中的表达有相关性[2]。其可作为卵巢癌诊断和监测的辅助方法。本实验采用ECLIA及ELISA法对卵巢癌患者血清中CA125进行检测,两组数据对比CA125在低浓度(0.0-35.0U/ml)和高浓度(400.1-2 000.0U/ml)有统计学差异;中浓度(35.1-200.0U/ml、200.1-400.0U/ml)无统计学差异。可见ECLIA与ELISA相比,线性范围更宽。ECLIA是电化学发光和免疫测定相结合的产物,它标记物的发光原理与一般的化学发光不同,包括电化学和化学发光二个过程,由电化学引发,在电场的作用下发生的化学发光反应,具有高度的特异性,精度及可重复性高,监测结果更为稳定等优点,电化学发光能最大程度消除样本底的干扰及对位量的散射,可以获得较高的灵敏度。另外电化学发光法可以完全自动化,可以减少系统误差和随机误差。并且ECLIA试剂保存期长,测定结果快而准,灵敏性高、特异性强、线性范围宽等优点。可作为卵巢癌早期诊断及排除的辅助方法,并可对治疗中的患者进行疗效评估。ELISA操作简便,仪器要求不高,但可受到手工加样、孵育时间、温度、洗板等因素干扰,灵敏度及可重复性受限,但成本低廉,适用于批量标本检测。
[1]袁嘉玲,段瑞岐,郄明蓉.应用受试者工作特征曲线分析人附睾蛋白4和糖链抗原-125联合检测对卵巢癌的诊断价值[J/CD].中华妇幼临床医学杂志,电子版,2012,8(2):155.
[2]Coussy F,Chereau E,Darai E,et al.Interest of CA 125level in management of ovarian cancer[J].Gynecol Obstet Fertol,2011,39(5):296.
2013-08-20)
1007-4287(2014)10-1715-02
*通讯作者