RH抗体致交叉配血不合一例及快速配血策略

严凤好，钟展华，曾少丽

(惠州市中心血站检验科，广东 惠州 516003)

RH抗体致交叉配血不合一例及快速配血策略

严凤好，钟展华，曾少丽

(惠州市中心血站检验科，广东 惠州 516003)

目的 分析Rh血型抗体导致配血不合的原因和血型血清学情况，探讨一种更自动化、快速、准确的血源筛查方法。方法 分别用传统试管法和微孔法为医院送检的疑难标本进行配血，在226个供血者中为患者筛查相合血源，记录并对比两种方法所用的时间。结果 患者血清中存在抗-C和抗-e不规则抗体导致配血不合，快速微孔法、试管法均能筛查出相合血源,前者所用总时间比后者短。结论有输血史及妊娠史的患者输血时,必须采用能检测出不完全抗体的酶、抗人球蛋白或更灵敏的方法配血;微孔配血法能更快筛查出相合血源,为患者的抢救赢得宝贵的时间。

Rh血型；疑难配血；微孔配血法；不规则抗体

RH血型是继ABO血型发现后另一个具有重要临床意义的血型系统，也是最复杂的血型系统之一。RH血型系统的抗原至今已发现了50多个，但涉及到临床问题的主要是5个，即C，D，E，c和e。RH血型不合的输血有可能产生危及生命的溶血性输血反应；母子RH不合的妊娠有可能发生新生儿溶血病，严重者可以导致新生儿死亡，或是使胎儿死于宫内。但是，针对抗体类型从库存血中找出所需血液并不是件容易的事，由于目前临床上所用的血液只进行常规的ABO及Rh（D）鉴定，而没有对其他的血型进行分型，想要及时找到合适的血液就显得很困难。本实验室结合自身条件采用快速微量自动梯形微孔配血法大大缩短了配血时间，现就其与传统方法比较做一介绍。

1 病例介绍

刘某，女，27岁，2013年4月16日入院，临床诊断宫内妊娠39周，待产，免疫性血小板减少性紫癜。有输血史和妊娠史，申请红细胞10个单位。医院ABO同型配血20多袋均主侧凝集后抽血送往本站检查。

2 传统血型血清学检查

2.1 试剂 抗-A、抗-B、抗-C、抗-D、抗-E、抗-c、抗-e、抗人球蛋白试剂，筛选细胞，谱细胞均由上海血液中心提供；凝聚胺试剂由珠海贝索公司提供，抗人球蛋白凝胶卡由达亚美公司提供；A、B、O红细胞本站自制。

2.2 方法与结果

2.2.1 血型鉴定 患者ABO正反定型相符，为A型，Rh分型：ccDEE。

2.2.2 直接抗人球蛋白试验 结果为阴性。

2.2.3 抗体筛查及鉴定 患者血清与筛选细胞在盐水中不凝集，在凝聚胺和抗人球中均凝集，表明患者血清中存在IgG型抗体。再用谱细胞进行抗体鉴定，检出抗-C抗-e抗体，其反应格局，见表1。

表1 患者血清与谱细胞反应格局

2.2.4 交叉配血试验 患者血清与A型ccDEE红细胞配血相合，主侧次侧均无凝集无溶血现象，与A型ccDee、CCDEe、CcDEE配血，主侧均有凝集。

3 快速微量自动梯形微孔配血法

3.1 试剂 同传统方法。

3.2 仪器 梯形微孔板，STAR全自动加样仪(瑞士HAMILTON)，340RT酶标仪（瑞士ANTHON）。

3.3 实验步骤

3.3.1 试剂、标本准备 按已设定好的程序摆放好受者血清、试剂和梯形板，挑选出与受血者ABO同型的献血员标本放入载架。

3.3.2 抗原抗体反应 运行程序，让仪器自动加样加试剂，加样完毕，混匀红细胞、血清及试剂，静置15 min。

3.3.3 判读结果 由于本实验室采用孔壁呈阶梯状的特殊梯形微孔板，阶梯级宽相当于1个红细胞的直径，级高大于1个红细胞的直径，抗原抗体反应时，红细胞聚集成块，挂在阶梯上，均匀平铺于孔底，而未反应时红细胞则沿阶梯滚落于孔底中央，形成实心原点，可运用数码成像和电脑数据处理系统判断血液是否相和。

4 结果

患者血清中存在抗-C和抗-e抗体，以上两种配血方法均可为患者找到4袋相合的血液，经比较可看出，传统方法总耗时约为220 min，而微孔法只需100 min，提前2 h找到所需血液，见表2。

表2 传统配血方法与梯形微孔法耗时比较（min）

5 讨 论

根据以上实验，可以证实患者血清中存在抗-C和抗-e抗体，因本站实验室条件有限，无法用生物学方法证实是否是抗-Ce复合抗体。但据Issitt等[1]认为，一种常见的Rh基因复合体只存在其中一种复合抗原，即抗-Ce只能与CDe/cDE基因型的红细胞反应，不能与CDE/cDe红细胞反应，因为前者红细胞C、e抗原存在于同一条染色体上，呈顺式排列，后者存在不同染色体上，呈反式排列，虽然二者表现型相同。结合配血结果，我们推测患者存在混合型抗-C和抗-e，因此与含有C抗原或e抗原的红细胞都能发生凝集反应。

Rh系统的不规则抗体是除ABO系统抗体以外引起输血反应和新生儿溶血病的主要原因，Rh抗体绝大多数是免疫抗体，经妊娠或输血免疫而产生，可通过胎盘进入胎儿体内，与胎儿红细胞起反应，从而使胎儿红细胞遭到破坏，甚至胎死宫内；新生儿则可发生不同程度的黄疸、贫血、肝脾肿大、水肿、智力障碍等。文献报道我国汉族人群中孕妇体内致Rh-HDN的不规则抗体以抗-E居多，因为Rh(E)阴性频率远高于Rh(D)，而Rh(E)抗原又是Rh系统中除Rh(D)外最强的抗原，一次随机输血后产生抗-E的机会大于抗-D，而C抗原阴性的比例很低，像笔者碰到的这位患者ccDEE更少见。本站筛查200多袋血也只发现4例Rh血清学分型与其完全一样的，因此，这种患者如果产生抗-C抗-e将会给临床输血造成很大的麻烦。对于孕妇来说产前抗体筛查是很必要的，但Rh(D)阳性的孕妇往往被忽视了这一点，医院一般检出阳性就不再做分型和抗体筛查了，只有阴性的孕妇医生才建议做，导致部分患者错过了最好的治疗时期，直至要分娩用血时才发现。

随着医学的进步，Rh不合引起的输血反应和新生儿溶血病越来越受到广泛的关注，张晨光[2]从我国785份孕妇血清样本中筛查出7份Rh特异性不规则抗体，其中5份引起HND，这无疑给我们敲了一次警钟。为了减少Rh不合造成HDN及输血反应，我们有必要做到以下几点：(1)产前定期进行不规则抗体筛查。(2)有妊娠史、输血史的患者最好使用ABO、Rh同型的血液。(3)提高配血技术，Rh抗体，尤其是抗-E、抗-c抗体，常为酶增强性抗体，有时表现出唯酶特性[3]，必须采用能检出不完全抗体的酶，抗人球或更灵敏的方法配血。

临床上遇到疑难配血，传统的方法是先对患者的红细胞和血清进行分析鉴定，找出配血不合原因后，再用已知抗原或抗体去筛查库存血液，最后再进行配血。这种方法耗时长、成本高、操作繁琐，对于急救患者，有可能会因得不到及时输血而对生命造成威胁。对此，很多实验室各出奇招[4-5]，本实验室也利用现有的设备资源，如全自动加样器和酶标仪，配合梯形微孔板，可批量地完成筛血工作，快速地找到相合的血液，为挽救患者生命赢得宝贵的时间。

[1]Issitt PD,Issitt CH.Applied Blood Group Serology Spectral Biologicals[M].Oxford California,1979:130-131.

[2]张晨光.Rh血型系统不规则抗体与新生儿溶血病的相关性[J].现代预防医学,2007,34(11):2036-2038.

[3]王培华.输血技术学[M].北京:人民卫生出版社,1998:200-201.

[4]罗海玲,伍伟健,余晋林.自动加样快速微孔板法在疑难配血中的应用[J].国际医药卫生导报,2010,16(24):3018-3020.

[5]钟展华,严凤好,李雪群,等.快速自动微板血源筛查法在疑难配血中的应用[J].检验医学与临床,2012,9(14):031-032.

R457

B

1003—6350（2014）10—1527—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.10.0591

2013-10-22)

严凤好。E-mail：775443294@qq.com