硫酸氢氯吡格雷片在多种溶出介质中溶出曲线的比较研究

高宏伟

摘 要：文章对硫酸氯吡格雷片溶出度测定方法进行验证，硫酸氯吡格雷片溶出度测定方法参照2010版中国药典二部附录XC第二法溶出测定法分别以pH2.0盐酸缓冲液、pH1.0盐酸溶液、pH4.5磷酸盐缓冲液、pH6.8磷酸盐缓冲液和水为溶出介质测定2种硫酸氢氯吡格雷片的体外溶出曲线，同时采用f2相似因子法考察两者的相似性，以评价自制硫酸氢氯吡格雷片的质量。

关键词：硫酸氢氯吡格雷片；溶出曲线；f2相似因子

硫酸氢氯吡格雷是新一代血小板聚集抑制剂，其选择性地抑制二磷酸腺苷（ADP）与其血小板受体的结合及继发的ADP介导的糖蛋白GPⅡb/Ⅲa复合物的活化，从而抑制血小板的聚集[1]。市售进口硫酸氢氯吡格雷片（Plavix），由法国赛诺菲公司于1986年研制成功，原料药为Ⅱ晶型。考虑到专利保护及原料药热力学稳定性和溶解度的关系，文章选用Ⅰ晶型硫酸氢氯吡格雷为原料药，以市售片Plavix为参比制剂，制备出与Plavix有相同释药速率和稳定性的硫酸氢氯吡格雷片。

1 材料

ZRS-8G型智能溶出仪（天津大学无线电厂）；ZRS-8G智能溶出仪；PHS-3C酸度计（上海雷磁仪器厂）；Adventurer电子分析天平AR1140（上海奥豪斯国际贸易有限公司）；硫酸氢氯吡格雷片（规格：75mg以氯吡格雷计）自制；波立维（规格：75mg以氯吡格雷计），硫酸氢氯吡格雷对照品（中国药品生物制品检定所），试剂均为分析纯。

2 方法

2.1 标准曲线的绘制

分别精密移取1.0mg/ml的储备液1.25ml、2.5ml、5.0ml、10.0ml、20.0ml置于200ml容量瓶中，溶出介质定容，得到浓度分别是7.25μg/ml、12.5μg/ml、25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml的系列标准溶液，分别测定吸光度。以硫酸氢氯吡格雷浓度C为横坐标，以吸光度A为纵坐标，进行线性回归，回归方程为：A=0.0192C-0.0314R=0.9998。结果表明硫酸氢氯吡格雷在7.25～100μg/ml浓度范围内呈良好的线性关系。

2.2 精密度

精密稱取硫酸氢氯吡格雷适量，甲醇溶解后，pH2.0盐酸缓冲液稀释成氯吡格雷浓度约为25μg/ml对照溶液。连续进样6次，测定吸光度，计算RSD，结果表明，RSD为0.89%，符合方法学要求，系统精密度良好。

2.3 方法回收率

分别精密量取硫酸氢氯吡格雷对照品储备液（氯吡格雷浓度约为1mg/ml）2.0ml、2.5ml、3.0ml于100ml量瓶中，加入空白辅料，溶出介质，摇匀后过滤，作为供试品溶液；精密量取硫酸氢氯吡格雷对照品储备液（氯吡格雷浓度约为1mg/ml）2.5ml至100ml量瓶中，用溶出介质稀释至刻度，得每1ml中约含氯吡格雷25？滋g的溶液，作为对照品溶液；取上述溶液按照分光光度法测定，计算平均回收率。结果表明，平均回收率为99.81，RSD%为1.90。该方法回收率较高，能够准确测定溶出度的样品浓度。

2.4 方法稳定性

将氯吡格雷浓度为25μg/ml的溶液对照品分别在0、2、4、6、8、10、12h时取样测定吸光度A，结果表明在室温条件下，供试品溶液12h内稳定性良好。

2.5 溶出度测定方法

参照2010版中国药典二部附录XC第二法溶出测定法中有关硫酸氢氯吡格雷溶出的测定方法，采用桨法装置，以1000mlpH2.0盐酸缓冲溶液作为溶出介质，转速为50rpm，分别在5、10、20、30、45、60min取出溶出杯中的溶液各10ml（同时补加等量新鲜同温的溶出介质），过滤，测定吸光度；另取硫酸氢氯吡格雷原料药适量，加入甲醇20ml溶解，加入pH2.0盐酸缓冲溶液配置成浓度为25μg/ml的对照溶液，同法测定，采用外标法计算不同时间点的累积释放度[2]。

2.6 释放度数据的统计分析

文章采用FDA推荐的相似因子法评价溶出度[3]，以确定仿制品与对照药品的溶出差异性。其公式如下[4]：

f2=50lg{[1+（1/n）Σ（Rt-Tt）2]-0.5×100}

其中Rt和Tt分别为参比制剂和实验制剂在t时间的累计释放百分率，n是取样点数。相似因子f2值趋近于100，说明曲线的相似性越好。一般f2值大于50，就可以判断参比制剂和自制制剂释放行为相似。

3 市售与自制在不同pH溶出介质下的溶出曲线对比图

为进一步考察自制片体外溶出与市售片Plavix的差异性，文章采用“2.8”溶出度测定方法项下内容，分别考察了市售Plavix与自制样品在pH1.0盐酸溶液、pH2.0盐酸缓冲液、pH4.5醋酸缓冲液、pH6.8磷酸缓冲液和蒸馏水的体外释放情况，分别测定自制片与市售片Plavix的溶出曲线。

结果表明，自制硫酸氢氯吡格雷片与市售片在pH1.0盐酸溶液、pH2.0盐酸缓冲液、pH4.5醋酸缓冲液、pH6.8磷酸缓冲液和蒸馏水中相似因子分别为63，69，81，77，64。

4 结束语

结果表明，在pH1.0与pH2.0盐酸缓冲液下释放度相似因子均大于50；由于硫酸氢氯吡格雷在碱性条件下的溶解度差，因此市售片和自制片在pH4.5、pH6.8和水中并不能完全溶出。通过在pH1.0和pH2.0盐酸缓冲液中的自制片与市售片释放行为比较可以看出，自制片与市售片体外释放基本相同。

参考文献

[1]朱海彦，孙杰，张曼红.硫酸氢氯吡格雷的临床应用进展[J].齐鲁药事，2010，29（11）：674-676.

[2]WS1-（X-475）-2003Z国家食品药品监督管理局国家药品标准.国家药品标准新药转正标准47册.

[3]2011药典征求意见稿.氯吡格雷片.

[4]夏锦辉，刘昌孝.固体药物制剂的体外溶出度的统计学评价分析[J].中国药学杂志，2000，35（2）：130-131.