海南两种含笑属植物叶中提取小白菊内酯的研究

夏伟 闫浩 杜金风

摘 要：大量的研究证实小白菊内酯具有多种药理作用，包括抗炎免疫抑制作用、抗氧化、抗肿瘤、抑制血管平滑肌细胞的增殖、抑制破骨细胞的活性及抑制细胞核因子-κB的表达等。文章在对已有的香籽含笑、白花含笑两种植物的叶提取物研究的基础上进行了深入研究，其研究成果为后期海南地区小白菊内酯的研究和开发打下了坚实的基础。

关键词：小白菊内酯；提取方法；HPLC-MS分析

小白菊内酯（parthenolide， PAR，分子式C15H20O3，相对分子质量248.32，结构式见图1）是从艾菊内纯化出的一种倍半萜稀内酯化合物（sesquiterpene lactone），被证实为药理活性最好的成分[1]。小白菊提取物具有很强的抗肿瘤活性，研究表明，小白菊内酯能够摧毁急性骨髓性白血病细胞，对研制白血病新药大有帮助；可有针对性地消灭引发急性和慢性骨髓性白血病的干细胞，从根本上遏制疾病的发生；可用于治从偏头痛到风湿性炎等多种疾病；可用于驱风剂，治疗肠胃胀；可用于通经剂，杀虫剂（寄生虫）可以用于减轻肾痛，头晕和早上呕吐现象；还可以帮助改善感冒、发烧时的不适症状等[2]。

就目前情况看，因植物中小白菊内酯的含量低且提取工艺复杂，国内外小白菊内酯的价格都普遍偏高，但需求情况仍呈现出供不应求的状态，说明了小白菊内酯在医药领域的需求的是炙手可热的，且贡献非常重要。另外，海南省昌江县霸王岭保护区内大量生长着香籽含笑、白花含笑两种植物，在已有的研究基础上利用高效液相色谱与质谱联用的分析方法对小白菊内酯标准品与上述两种植物叶提取物进行了分析对照，确认了该两种植物叶提取物中存在的类似化合物为小白菊内酯的事实。下面对该两种植物研究小白菊内酯的进一步研究过程及结果做一综述。

1 提取方法

将晒14天后的样品干叶粉碎后，称取10.0g粉碎置于250ml烧杯中，加入95%乙醇常温超声提取30min后取上清液，再重复2次提取，合并3次提取液。用30ml95%乙醇溶液分3次洗涤滤渣，将洗涤液合并到提取叶中，减压旋蒸后制得浸膏，浸膏转移至分液漏斗并分别用20mL、30mL、30mL20%的乙醇溶液溶解圆底烧瓶壁上的浸膏残留，将溶解液依次转移至分液漏斗内，用100mL乙酸乙酯萃取溶液三次并合并乙酸乙酯层萃取液，减压旋蒸得到浸膏。此方法得到香梓浸膏0.0883g，白花浸膏0.1827g[3]。

2 检测条件与方法

高效液相检测条件，A相为0.1%磷酸，B相为乙腈，A：B=40：60，检测波长为254nm，柱温25℃，进样量为10μL。检测相近的保留时间内是否具有类似的吸收峰，通过HPLC-MS確定待测样品中是否含有与标准品相同的化合物。

3 检测结果

3.1 高效液相色谱与质谱联用对小白菊内酯标准品的分析结果，如图2所示：

3.2 高效液相色谱与质谱联用对香梓含笑叶样品的分析结果，如图3所示：

3.3 高效液相色谱与质谱联用对白花含笑叶样品的分析结果，如图4所示：

4 图谱分析

图2的小白菊内酯标准品HPLC-MS谱图反应了在液相色谱中停留时间在10分钟的位置有一明显的吸收峰，对该吸收峰位置的化合物进行质谱分析时确定该化合物的分子量为231.4；同时对香梓含笑叶样品和白花含笑叶样品进行HPLC-MS分析，在相同吸收峰的位置的化合物情况基本一致，香梓含笑叶样品及白花含笑叶样品检测分别得到分子量为231.3和231.9，认定为同一化合物，即确定该两个样品中均含有小白菊内酯。

参考文献

[1]周惠琼.小白菊内酯的生物特性与药理作用研究进展[J].中国新药杂志，2009.

[2]李申恒，李小云，等. 小白菊内酯及其衍生物药理作用研究进展[J].中成药，2012.

[3]闫浩，杜金风，等.海南含笑属植物提取小白菊内酯的研究[J].生物制药技术，2013.

作者简介：夏伟（1984-），男，海南人，本科，助教，研究方向：化学分析、化工生产。

闫浩（1987-），男，内蒙古人，本科，助教、技师，研究方向：化学、自然科学。

杜金风（1983-），女，山东人，研究生，讲师、技师，研究方向：自然科学，该项目负责人。