尼莫地平缓释制剂对家兔血管刺激性试验

阮莉莎　谷勇

摘要[目的]采用家兔耳缘静脉注射法考察尼莫地平缓释制剂对家兔血管刺激性试验。[方法]将家兔分为阴性对照组（生理盐水组）、尼莫地平注射液组和尼莫地平缓释制剂组，分别通过耳缘静脉注射，给药剂量为0.5 mg/kg。[结果]生理盐水组和尼莫地平缓释制剂组没有出现明显的血管刺激现象，而尼莫地平注射液组出现强烈的血管刺激现象。[结论]尼莫地平缓释制剂与原制剂尼莫地平注射液相比，有效降低了家兔血管刺激性，为其临床上广泛应用提供了一定基础。

关键词尼莫地平缓释制剂；血管刺激性；家兔

中图分类号S829.1文献标识码A文章编号0517-6611（2014）23-07781-01

作者简介阮莉莎（1981-），女，四川自贡人，讲师，从事生理学方面的教学科研工作。

收稿日期20140709 目前，市售尼莫地平注射液由于含有40% 有机溶剂： 23.7% （v/v） 乙醇和17% （v/v） PEG400，在临床使用过程中容易引起注射疼痛和在注射部位发生局部炎症，进而导致患者顺应性低，甚至导致静脉炎[1]。

笔者在血管刺激性研究中主要参照文献以及《化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》等评价了血管刺激性的症状，同时观察了动物注射部位耳缘静脉的病理切片，综合评价并比较了尼莫地平缓释制剂与市售尼莫地平注射液的血管刺激性。

1材料与方法

1.1试验仪器戴安高效液相色谱仪P680A四元低压梯度泵、PDA-100二极管阵列检测器、TCC-100柱温箱、Chromeleon色谱工作站；瑞士Precisa电子天平（XR 205SM-DR）；Rota vapor R-114旋转蒸发仪（Büchi， Switzerland）；Water bath B-480 （Büchi， Switzerland）；pH计 （HSP0113R， Heroways）；RM2235型石蜡切片机（Leica， German）；Axiovert200型显微镜（Zeiss， German）。微量输液泵 （成都豪乙生物科技有限公司）；一次性使用静脉输液针（成都市新津事丰医疗器械有限公司，国食药监械准字2010第3150406号）。

1.2主要试剂与药物 尼莫地平对照品（中国药品生物制品检定所，100270-200002）；尼莫地平注射液（山西亚宝药业集团股份有限公司，国药准字H20034057）；氯化钠注射液（太极西南药业股份有限公司，国药准字H50021611，产品批号1191022）； 甲醇和乙腈均為色谱纯，其余试剂均为分析纯；水为超纯水。

1.3实验动物12只新西兰大耳家兔，体重（2.0±0.5）kg，雄性由宜宾卫生学校动物中心提供。

1.4试验方法

1.4.1尼莫地平缓释制剂的制备。参照文献和预试验，采用共沉淀法制备尼莫地平混合胶束，具体制备方法为：称取处方量的尼莫地平原料药、蛋黄卵磷脂（EPC）、甘氨胆酸（SGC），置于圆底烧瓶（25 ml）中，加入一定体积的无水乙醇充分溶解，超声分散均匀。60 ℃旋转蒸发除去有机溶剂，形成1层透明薄膜。再用含一定浓度的NaOH的生理盐水溶解，调节pH。12 000 r/min离心5 min，除去不溶解的药物，上清液即为尼莫地平缓释制剂的分散体溶液[2]。

1.4.2血管刺激性试验。设定生理盐水为阴性对照，选用耳缘静脉作为用药部位。12只家兔（体重2.5～3.0 kg）随机分为2组：Ⅰ组注射氯化钠注射液；Ⅱ组注射尼莫地平注射液；Ⅲ组注射尼莫地平缓释制剂。每只家兔按0.5 mg/kg给药，按临床上给药方式，连续静脉滴注7 d。尼莫地平注射剂和生理盐水的体积一致。

每天给药前以及最后1次给药后48 h对家兔进行肉眼观察[2]。48 h后处死动物，并进行组织病理学检查。2周后继续观察剩余动物，并进行组织病理学检查。

处死动物后，剪取距注射部位1 cm处兔耳。用生理盐水清洗血迹，固定于福尔马林溶液中约48 h。用石蜡包埋，HE染色后光镜下观察注射后对兔耳血管的刺激性反应。家兔血管过敏性评价标准为：0级，给药部位无明显反应；1级，给药部位静脉血管轻度瘀血、红肿；2级，给药部位静脉血管中度瘀血、红肿；3级，给药部位静脉血管重度瘀血，周围组织严重红肿。

2结果与分析

2.1肉眼观察结果在尼莫地平输注过程中动物出现深度呼吸，且极度挣扎；氯化钠注射和尼莫地平缓释制剂过程中呼吸平缓，均未出现此现象。