鼠诱发性肝癌模型的研究进展

曹涤非，王 雷，王东凯，吴 琼，李 瑶，黄国庆，姜 洋，黄婷婷，赵金海，侯婉滢

（1.黑龙江省科学院高技术研究院，哈尔滨150020;2.建华医院，黑龙江 齐齐哈尔 161000）

肝癌（HCC）是我国发病率较高的恶性肿瘤之一，近几年来，肝癌的发病率呈上升状态，已占我国恶性肿瘤的第2位［1］。肝癌的发生发展过程是多因素作用的结果，目前肝癌的致病机理尚未研究清楚，没有安全有效的治疗手段，因此深入探讨发病机理是治疗肝癌的重要基础。实验动物癌症模型是人类癌症研究中建立的能够模拟人类癌症表现的模型，可分为自发瘤型、诱发型、移植型和转基因动物等［2］。因此利用鼠模型研究肝癌的发病原因和致病机理，是对肝癌研究的重要手段，本文将对诱发性鼠肝癌模型的研究进展进行综述。

1 给药途径

主要有经口给药法和注射给药法两种。经口给药法又包括自动口服给药和强制灌胃给药，自动口服给药是通过饮水或饲料摄取，灌胃给药是将诱癌剂给鼠灌胃。注射法是将诱癌剂注射给药，其中腹腔注射最常见，根据不同的诱癌剂可选择不同的注射部位与方法。

2 诱癌剂的种类

诱癌剂有很多，本文将对以下几种常用诱癌剂进行论述。

2.1 二乙基亚硝胺（diethylnitrosamine，DEN）

诱发大鼠肝癌模型:第一，DEN水溶液按10 mg/kg体重用量0.25%的浓度灌胃每周1次，其余时间按0.025%的浓度饮水，约4个月可诱导肝癌的发生，5～6个月80%以上可发生癌症［3］;亦可用浓度为0.05%的 DEN饮水8个月诱发肝癌［4］。第二，Solt-Farber诱癌模型的方法［5］:第1 d根据大鼠体重换算按200mg/kg一次性腹腔注射DEN，2周后开始饲喂2－乙酰氨基芴（2－acetylaminofluorene，2-AAF）饲料含有0.02%的DEN 2周，在第3周末做2/3肝切除术，第4周末恢复标准饲料喂养，在第4周显微镜下观察可见肝内出现变异肝细胞灶。第三，选用体重200 g的雄性Wistar大鼠，根据体重换算200 mg/kgDEN腹腔注射，然后给予浓度为0.05%的 DEN饮水，12周诱癌成功［6］。第四，选用体重200 g的雄性Wistar大鼠，通过应用DEN 自由饮水，16 周诱癌成功［7］。

2.2 黄曲霉素B1（AflatoxinB1，AFB1）

诱癌方法:第一，用含AFB1 4～5 g的饲料连续饲喂大鼠6周，3个月诱癌率可达100% 。此方法AFB1最低剂量达 0.001 ～ 0.005 g/d［8］。第二，用二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide DMSO）溶解AFB1，根据体重换算400 g/kg，每天腹腔注射1次，连续14 d后停注 AFB1，改饲含浓度为0.015%的2-AAF饲料30 d（实验第21 d开始切除大部分肝脏）;或根据体重换算0.75～1.5 mg/kg AFB1，一次性注射，14 d后给予2-AAF加肝大部分切除，此方法建立的AFB1是肝癌的短期实验模型［9］。第三，用含2%的DEM水溶液和0.004%的AFB1 DMSO溶液交替灌胃7周，可诱发大鼠肝癌［10］。

2.3 亚胺基偶氮甲苯（o-aminoazotoluene，OAAT）

诱癌方法:第一，用浓度为1% 的OAAT苯溶液在鼠的两肩胛间皮肤上涂抹2～3滴，每隔1 d 1次，大约涂100次。给药后2个月可出现肿瘤结节，7个月以上可诱发小鼠肝肿瘤，诱癌率约55%［11］。第二，用浓度为2.5 mg的OAAT溶于植物油中，皮下注射4次，每次间隔2周，可诱发肝癌。此方法多用于病因学、发生学、发病机制和遗传学方面的研究［12，13］。

2.4 二甲基氨基偶氮苯（p-dimethylaminoazobenzene，DAB）

诱癌方法:一般用浓度为0.06% 的DAB添加到饲料中喂养大鼠，同时限制鼠的维生素B2的摄取量（不超过1.5 ～2 mg/kg体重），经4 ～6 个月可诱发出肝癌［14，15］。

2.5 2－乙酰氨基芴（2-acetylaminofluorene，2-AAF）

诱癌方法:以浓度为0.05% 的2-AAF添加到饲料中喂养SD大鼠，21 d后可出现癌变。显微镜下观察可见细胞变性，有大小不等的增生性结节和癌巢结节形成［16］。此方法还适用于兔、狗、鸡等动物的肝癌模型［17］。

3 展望

鼠肝癌模型会随着肝癌的治疗手段的发展和临床基础研究的日益深入和发展而不断改进、完善。利用分子生物学技术，继续研究更适合肝癌的多种生物学特性的鼠模型，建立更稳定的新品种模型;减少或消除个体差异，提高实验的可行性和准确性，寻求一种更适的模型建立方式，这些可能成为鼠肝癌模型的发展方向。

［1］吴孟超.原发性肝癌的诊断和治疗进展［J］.中华外科志，1998，36（9）:515—518.

［2］魏泓.医学实验动物学［M］.成都:四川科学技术出版社，2001:421—424.

［3］邵成伟，田建明，王培军，等.两种大鼠肝癌模型制作方法的比较研究［J］.临床放射学杂志，2002，21（12）:985—987.

［4］姜幼纯，董奇男，肖邦良，等.非坏死剂量二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌模型的研究［J］.华西医科大学学报，2001，32（4）:555—558.

［5］SOLTD B，MEDLINE A，FARBER E.Rapid emergency of cacinogen-in-duced hyperplastic lesion in a new model for the sequential analy-sis of liver carcinogenesis［J］.Am JPatho，1977，88（3）:595—618.

［6］张新立，史景泉，卞修武.DEN诱发大鼠肝癌变的病理形态与细胞增殖活性的定量研究［J］.第三军医大学学报，2001，23（3）:304—307.

［7］金星林，千昌石，杜希臣，等.改良法建立大鼠原发性肝癌变模型与病理形态学研究［J］.中国现代医学杂志，2009，19（17）:2593—2596.

［8］RESSOLINOVITCH SD，MIHAILOVICH N，WOGAN GN，et al.AflatoxinB1，a hepatocarcinogen in infantmouse［J］.Cancer Res，1972，32（11）:2289—2291.

［9］WOLF M.Influence of matrigel on biodistribution studies in cancer research［J］.Pharmazie，2008，63（1）:43—48.

［10］RESSOLINOVITCH SD，MIHAILOVICH N，WOGAN GN，et al.AflatoxinB1，a hepatocarcinogen in infantmouse［J］.Cancer Res，1972，32（11）:2289—2291.

［11］郑建明，陶文照，郑唯强，等.人肝癌裸鼠皮下－肝原位移植瘤模型的建立［J］.第二军医大学学报，2000，21（5）:456—459.

［12］杨富春，郑树森，蒋天安.改良法大鼠原发性肝癌模型的建立［J］.中华医学杂志，2004，84（23）:2018—2019.

［13］GIAVAZZIR，JESSUP JM，CAMPBELL D E，etal.Experimental nudemousemodel of human colorectal cancer livermetastases［J］.Nat Cancer Inst，1986，77（6）:1303—1308.

［14］党双锁，袁利超.肝癌动物模型的研究现状［J］.世界最新医学信息文摘，2004，3（1）:968—970.

［15］徐玉音，陈莉.肝癌动物模型建立的方法［J］.临床与实验病理学杂志，2011，27（4）:405—408.

［16］吴细丕.实验动物与肿瘤的研究［M］.北京:中国医药科技出版社，2000:176.

［17］万继英，韩庶勇.肿瘤实验动物模型的建立及应用研究进展［J］.医学综述，2009，15（19）:2959—2961.