橘皮提取物的抗氧化能力与有效成分分析

天津医科大学临床医学院（200032）田勤娟

我国盛产柑橘，每年的产量超过了107t，而橘皮至少占了整个柑橘重量的1/5，橘皮除了大家熟知的维C和精油外，还具有大量的黄酮类[1]。对橘皮的研究，国内外都取得了较大的成就，最近有研究表明，橘皮中的成分能够开发出抑菌与抗氧化的成分[2]。鉴于此，以下就主要分析5种橘皮测定物对DPPH于亚硝酸盐的清除能力，并分析主要影响成分。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试剂和原料 柑橘原料来自天津市综合水果市场，将橘皮剥下在45℃干燥环境下烘干，再粉碎成橘皮粉末，将粉末保存在4℃环境中；柠檬苦素标准品来源于南京景竹生物科技有限公司，DPPH来源于北京中生瑞泰科技有限公司，其他的试剂，均来源于中国医学科学院放射医学研究所。

1.1.2 仪器和设备 料理机：瑟诺电器有限公司，真空干燥箱：北京恒泰丰科试验设备有限公司，旋转蒸发仪：成都康宇仪器科技有限公司，紫外可见光光度计：深圳欧克仪表科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 溶剂橘皮提取物的制备 先准备好500ml的正丁醇、去离子水、氯仿、乙酸乙酯、石油醚溶剂，在溶剂中加入50g的橘皮粉，都提取6h，再离心并收集上清液，反复3次，将收集到的上清液用选择蒸发仪浓缩，将浓缩的样品烘干，得到5种不同成分的提取物，保存在4℃的环境中。

1.2.2 DPPH清除能力测定 称取12mgDPPH试样，将其溶于250mL装有DPPHH容量瓶,使得瓶中浓度为0.12mmol/L,并遮光保存。对于不同的溶剂提取物进行浓度配比，分别配为：0.8、0.4、0.2、0.1、0.05mg/mL等试样浓度。另取待测样品加入到2mL配置好的DPPH溶液，将其均匀混合之后避光放置30min，研究517nm处测其吸光度。

1.2.3 亚硝酸清除能力测定 采用盐酸萘乙二胺法进行测定，向有色管中加入2mL，25ug/L的硝酸钠液以及3mL的样品液，样品液按照上述标准进行配比，将其置于80℃水浴10min，然后加入到氨基苯磺酸中混合均匀，静置15min之后，研究538nm波长处测其吸光度。

1.2.4 有效成分含量测定法 对于有效成分的含量测定主要是对酚、黄酮、单宁、柠檬苦素等进行测定。对于酚进行测定，称取0.005g没食子酸标准样品，将其溶解之后，加入福林酚剂，并摇匀，研究760nm波长处测定吸光度。黄酮测定时，则称取20mg芦丁，按照上述溶液浓度标配进行配液，混合匀质之后静止5～6min，随后研究510nm波长处测定吸光度。但是单宁仍然采用510nm波长处测定其吸光度，而柠檬苦素则研究500nm波长处测定吸光度。

2 结果

结果表明，不同溶剂的橘皮提取物都对DPPH与亚硝酸盐有清除能力，只是清除能力的强弱有一定的差别，其中的乙酸乙酯的清除能力表现的最强。这5种不同溶剂的提取物中黄酮、柠檬苦素、总酚的含量具有明显的差异，石油醚与氯仿提取的橘皮提取物中的单宁含量差异不大，乙酸乙酯、正丁醇、去离子水3者的单宁含量差异较大。

乙酸乙酯提取物的四种成分均远高于其他的溶剂提取物的成分含量，测定结果显示黄酮的含量最高，可以达到40.40mg/g，不同的容积橘皮提取物中黄酮的含量均为最高。柠檬苦素的含量在5种溶剂中橘皮的提取物中具有显著性差异，黄酮、总酚的含量也如此，氯仿的提取物中油醚的含量与单宁的含量也存在着显著性差异，较之其他单宁含量更显著。

3 结论

据研究结果表明，五种溶剂的提取物中黄酮含量最大，对于黄酮的提取又与DPPH呈正比例关系，因此在推测橘皮的主要抗氧分能力与黄酮的含量具有直接的关系。而且清除亚硝酸盐的主要存在活性成分是黄酮、酚、柠檬苦素等。