微生物检验培养基质量控制问题分析

李 飞

(鹤壁市卫生监督局，河南 鹤壁458030)

培养基是生物实验中一种为微生物、植物及动物组织提供生存及生长的人工配制养料。养料中含有多种生物所需的水、维生素、碳水化合物、含氮物质以及微量元素等。同时也有专用的培养基，其中含有特定抗生素及色素，是专门用于某些单种微生物培养及鉴定。然而随着近年来生物科学技术的突飞猛进，生物实验及微生物检验中所需的培养基逐渐呈现出越来越广泛的运用趋势，而随之培养基生产厂商在市面上也不断增多［1］。规模化生产的培养基虽然为微生物检验提供了极大的方便，但据市场调查及研究结果显示，市场化生产的培养基存在有制作工艺、生产质量等还未达到规范化指标，整体水平有待提高。而培养基的质量是微生物实验室检验结果的保障，同时也是微生物实验室质量控制的重要环节之一。笔者就商品培养基和自制培养基从其采购、制备、灭菌、储存及性能测试和人员素质等方面所应采用的质量控制方法作一简要的阐述。

1 培养基的采购及验收

1.1 培养基的采购 如今市面上的培养基生产厂家很多，但其产品质量均存在一定的差异。因此在进行实验室微生物培养基的采购方面，需要严格控制其采购质量。首先应尽量选择通过ISO9001 或其他国家认可的质量认证体系的商家，其次实验室采购者必须让生产企业提供培养基名称、独立成分、添加成分、有效期、性能评价、所用的测试菌株、技术数据清单、质控证书以及必要的安全危害数据等，以利于使用者对产品进行记录和比较验收［2］。市场信誉度高并且质量确实经得住实践考验的供货商可以考虑并且长期合作，以利于培养基的一致性和稳定性。

1.2 培养基的验收 包含了对采购完成后培养基进行的各项检验工作，微生物实验室收到培养基后应有专人负责做好培养基的接收与验收工作。并且负责制作培养基的入库记录，内容应详细记录生产商家、培养基的名称、接收日期、批号、有效期、包装及其完整性。即使是长期合作的供应商也应该认真完成以上手续，一旦发现采购后的培养基任何一项有差异及问题，一律归为验收不合格，并且不得使用。

2 培养基的制备

2.1 培养基的配制 配制培养基要按照严格、科学的流程进行，依据处方进行认真操作，并且将操作流程记录下来。应考虑到培养基处方需要的生物制品种类繁多，而不同的厂家、批次、日期都会造成产品质量存在差异，所以在配制过程中一定要注意原料成分之间的差异性，做好严格的质量控制工作。同时记录不同成分的具体情况，从而方便查询和检验。自制培养基过程中应严格按照培养要求和顺序放入成分，确保灭菌有效及成分均匀，最大程度避免出现成分间互斥以及分布不均的情况。

2.2 培养基的称量 称量培养基时避免使用手或其他非专用工具进行操作，要使用专门称量培养基的角匙，从而降低发生交叉污染的概率，保证检验结果的准确性。特别值得注意的是在称量选择性培养基时要观察是否有粉末吸入现象，同时还要考虑到实验环境的湿度问题，湿度高的空间会让培养基吸潮，导致pH 升高，性状发生改变，在条件允许的情况下尽量选择干燥度较高的房间进行称取［3］。而对干粉培养基的配置要符合生产标准和要求。

2.3 培养基的溶解 溶解培养基是分装灭菌前的重要步骤，要保证不同组分能够均匀溶解和分布，通常采取水浴加热溶解的方式。而对于含有琼脂粉末的培养基可以先进行浸泡处理然后再加热溶解，这样有助于加快溶解的过程。一旦将培养基放入电炉内就应用小火加热煮沸，同时利用搅拌来防止爆沸和焦化，如果培养基烧糊就极有可能产生有毒物质，对操作人员和环境造成威胁，因此一旦发现焦化或爆沸培养基就要安全处理掉。

3 培养基的灭菌和储存

3.1 培养基的灭菌 通常针对培养基的灭菌一般采取高压蒸汽灭菌法，在121.3 ℃持续15 min，如果厂家定制了特殊或含有糖分的培养基，则需要按照说明流程进行专门灭菌。培养基配制完成后要就应该马上进行灭菌，在灭菌过程中要特别注意操作的完整性、科学性，同时标注好时间和名称，避免出错。

3.2 培养基的储存 商品化规格的培养基和干粉培养基要按照其说明书标识的存放环境要求进行存放。通常放于干燥阴凉避光处，有效期一般为2 a。一旦开封应注意防潮，尽快用完。检验人员还要对各类培养基做定期排查，并详细登记，避免其超过有效期。发现有硬化结块，过期变色现象应及时废弃。

4 培养基的性能测试

当经过上述步骤制备好的培养基会显现出不同的颜色及质感。因此对培养基的性能测定可以根据其颜色、形态、质感及检验经验来做初步判定，完整的培养基应该是颜色清晰，质感明显，没有脱水、浑浊及沉淀等现象。基础培养基不仅要求细菌能够生长，还必须发育良好并能使细菌充分表现出其典型的特征，如典型菌落形态、溶血特征等。选择性培养基应分别选择1 株可生长、1 株可抑制的菌株进行接种培养，鉴别培养基应选择已知阳性和阴性菌接种分别培养，以证实应有的生化反应能力。

5 提高检验人员的水平素质

通过以上环节可以有效地提高培养基的质量，但人为因素也是影响实验室微生物检验的重要因素之一。微生物检测是一项要求高、分化细的工作，只有综合素质强、专业技术硬的技术人员才能胜任和做好。为了有效地做好微生物检验中培养基的质量控制，要严格筛选操作人员，要求其拥有扎实的微生物检验基础和能力，能良好地判断和处理各种检验情况，对工作有责任心。为了不断提高检验人员的素质和能力，要定期或不定期组织检验人员进行专业培训和学习，在更新知识的过程中掌握新技能，跟随检验科学的发展而进步。

综上所述，培养基的质量是微生物检验过程中不可或缺的关键因素，事关检测工作的科学性、准确性和可靠性。在微生物监测工作中地位举足轻重，如果忽视任何一个环节，就会导致实验结果出现偏差。可以通过严格产品的采购、规范其操作以及提高检验人员专业素质等手段来进一步加强培养基的质量控制，从而有效地提高微生物检验的准确性和科学性。总之，只有真正把微生物培养基的质量控制重视起来，才能有利于提高微生物实验室检测工作的成效。

［1］顾文辉. 微生物实验室质量控制［J］. 职业与健康，2010，26(16):1 906 -1 908.

［2］周小明.微生物实验室质量控制和质量保证［J］.职业与健康，2009，25(15):1 667 -1 668.

［3］贾月波.论食品微生物检验中培养基的质量控制措施［J］.中国保健营养，2013，(4):18 -19.