不同产地黄芩中的黄芩苷提取转移率研究

刘 涛，张 蕾，刘 婷，周雪莲，罗小伟

(成都大学生物产业学院，四川 成都 610106)

不同产地黄芩中的黄芩苷提取转移率研究

刘 涛，张 蕾，刘 婷，周雪莲，罗小伟

(成都大学生物产业学院，四川 成都 610106)

采用同一提取方法对不同产地的黄芩中黄芩苷的提取转移率进行考察，并对结果进行分析，以研究不同产地黄芩药材中黄芩苷提取转移率，完善黄芩药材的质量标准.实验结果显示，不同产地的黄芩药材的有效成分转移率有显著差别，药材转移率是影响药材质量的一个重要参数.建议在黄芩药材质量标准中加入提取转移率这项指标作为药材主要质量指标之一.

黄芩;黄芩苷;转移率

0 引言

黄芩是中医临床常用中药，具有清热燥湿、泻火解毒等功效，其抗菌、抗病毒、抗炎等药理作用是以黄芩苷为代表的黄酮类化合物［1］.有效成分的转移率是中药、天然药物制备工艺研究中一项重要的指标，转移率的大小常用于评价与分析制备工艺的合理性与可行性.本课题组曾经发现金银花中的绿原酸提取转移率不稳定［2］，而苦参、木蝴蝶及栀子中的相关成分的提取转移率与药材的质地有一定的相关性［3］，相关研究也发现，以不同黄芩为原料的中成药中黄芩苷的转移率也不稳定［4］.在实验过程中，本研究也发现黄芩中所含的黄芩苷提取转移率也存在不稳定的现象，其原因可能与采收时间、产地及加工方法有关.对此，本研究对不同产地黄芩中的黄芩苷的提取转移率进行了研究.

1 试剂与仪器

1.1 试剂

实验所用试剂包括:黄芩苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号，10715－200212)，黄芩药材购自成都国际商贸城荷花池中药材市场，经有关专家鉴定符合《中国药典》2010版(一部)黄芩项下标准;甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯;水为纯净水.

1.2 仪器

实验所用仪器包括:P230Ⅱ型高效液相色谱仪(伊利特公司)，FA2004型电子天平(上海精科实业有限公司)，FW100型杯式粉碎机(北京科伟永兴仪器有限公司)，电热套.

2 方法与结果

2.1 对照品溶液的制备

取经0℃减压干燥4 h的黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每l mL含40 μg的溶液，制得对照品溶液.

2.2 原药材含量测定方法

各原药材的含量测定方法均按照《中国药典》2010版(一部)黄芩项下方法进行测定，原药材计算含量时不以干燥品计算(即不扣除水分).

2.3 供试品溶液的制备

取100 g黄芩，再加入800 mL水，加热煮沸提取1 h，提取3次，合并药液，冷却至室温并测量体积，滤过，取10 mL溶液于100 mL容量瓶中，加水定容至刻度，摇匀.再量取1 mL于10 mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45 μm)滤过，制得供试品溶液.

2.4 色谱条件与系统适用性实验

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为甲醇∶水∶磷酸(47∶53∶0.2)，检测波长280 nm;柱温25℃，理论板数2 500.

2.5 测定法

分别精密量取对照品溶液与供试品各10 μL，注入液相色谱仪，测定，计算，即得.

2.6 转移率计算方法

黄芩苷转移率计算公式为，

其中，提取液中黄芩苷的总量=3次提取液黄芩苷的浓度×3次合并提取液的体积

2.7 方法学考察

2.7.1 线性关系考察.

取黄芩苷对照品适量，精密称定，置于50 mL洁净的容量瓶中，加甲醇定容至刻度，超声至对照品完全溶解，其浓度为0.1 mg/mL.从已配好的0.1 mg/mL的黄芩苷对照品溶液中，精密吸取2、4、6、8 mL，置于10 mL容量瓶中，加甲醇定容，其浓度依次为20、40、60、80 μg/mL，在“2.3”项下的色谱条件下测得其峰面积，以峰面积为横坐标，进样量(μg)为横坐标绘制标准曲线.结果，R2=0.9993，表明黄芩苷在20～100 μg/mL之间具有良好的线性关系.

2.7.2 稳定性实验.

分别吸取供试液，按“2.3”项下的色谱条件下测得样品4 h内的稳定性.结果显示，样品中的黄芩苷在4h之内稳定(RSD=2.83%).

2.7.3 精密度实验.

取黄芩苷对照品溶液，重复进样5次，记录峰面积.结果表明，其精密度良好(RSD值=1.06%).

2.7.4 加样回收率.

取样品0.3 g，精密称定，加入黄芩苷对照品0.8766 mg，按照“2.3”项下的色谱条件测定.结果显示，加样回收率在95.4% ～104.4%之间，表明加样回收率合格.

2.8 结 果

不同产地原药材中黄芩苷含量及提取转移率如表1所示.

表1 不同产地黄芩中黄芩苷含量及提取转移率测定结果

结果表明，不同产地的黄芩药材中黄芩苷含量及其所含黄芩苷的提取转移率不同，山西所产的黄芩中其黄芩苷含量较高，提取转移率也较高，大于80%，且符合相关技术要求.

3 讨论

本研究中黄芩提取液的制备工艺参数，如溶媒及其用量、提取时间、提取次数等，是经过单因素及正交试验确定的，此可以避免提取工艺参数对药材提取转移率的影响.由于未按干燥品投料，故计算原药材含量时也未按照干燥品计算.

本研究参照文献［3］方法，考察过按照《中国药典》(一部)黄芩项下“含量测定”的方法对其粗粉和细粉分别进行了含量测定.实验结果发现，粗粉和细粉含量差别较大.因此，在原药材含量测定中，本研究将药材尽量粉碎，以保证原药材含量的准确性.

有效成分的转移率是现行新药研究的重要内容，是衡量工艺参数是否合理的重要指标［6］.本研究测定了不同产地的黄芩药材中黄芩苷的含量及其转移率.结果表明，不同的产地的黄芩含黄芩苷以及黄芩苷的转移率有显著差距，在所测定的样品中，山西所产的黄芩其黄芩苷含量最高，所含黄芩苷提取转移率较高.原因可能是药材生于不同产地时，采收时间及加工方法不同引起的，其具体原因有待进一步研究.

建议有关部门在黄芩药材质量标准中加入“提取转移率”作为主要质量指标，以控制中药制品的质量.

［1］姚干，何宗玉，方积年.黄芩总黄酮提取及纯化工艺的研究［J］.中成药，2006，29(11):1568 －1571.

［2］徐娜红，全金龙.炮制方法对黄芩中有效成分黄芩苷含量的影响［J］.临床合理用药杂志，2010，3(16):100.

［3］王雷，王学艳，周雪琴，等.黄芩苷在不同溶媒中的稳定性研究［J］.中国药师，2006，9(2):129 －132.

［4］宋逍，唐志书，崔春利，等.中药复方制剂中黄芩苷转移率影响因素研究［J］.陕西中医，2008，29(6):730 －731.

［5］黎万寿.黄芩苷提取工艺研究［J］.中草药，2000，31(2):107－110.

［6］刘涛，万德光，王永香，等.HPLC法测定金银花药材中绿原酸的转移率［J］.南京中医药大学学报(自然科学版)，2008，50(5):350 －352.

［7］刘涛，郭晓恒，吴春梅，等.肺毒清颗粒中有效成分的含量测定及转移率考察［J］.中国实验方剂学杂志，2013，19(10):54－56.

［8］张清波，刘丽娟.对《中国药典》2000年版(一部)收载品种黄岑苷含量测定方法及限量的探讨［J］.中国药品标准，2002，3(4):5 －8.

［9］国家药典委员会.中华人民共和国药典［M］.北京:中国医药科技出版社，2010.

Study on Transfer Rate of Extraction of Baicalin from Scutellaria Baicalensis Root

LIU Tao，ZHANG Lei，LIU Ting，ZHOU Xuelian，LUO Xiaowei
(School of Biological Industry，Chengdu University，Chengdu 610106，China)

To study the transfer rate of extraction of baicalin from Scutellaria baicalensis roots in different producing areas and improve available quality standards of Scutellaria baicalensis roots，we use the same extraction method to investigate the transfer rate of extraction，and analyze the obtained results.The experimental results show significant differences among transfer rates of active ingredients of Scutellaria baicalensis roots in different producing areas.We conclude that the transfer rate of extraction is a parameter which affects quality of chinese medicinal materials，and it is recommended that the transfer rate can be added to quality standards for Scutellaria baicalensis roots as one of the main quality indicators.

Scutellaria baicalensis root;baicalin;transfer rate

R282.5

A

1004－5422(2014)01－0007－03

2013－11－20.

成都市科技局高等院校应用成果转化(12DXYB020JH－002)资助项目.

刘 涛(1976—)，男，博士，高级工程师，从事中成药新药开发与再评价研究.