妇科千金片对盆腔炎模型大鼠血清中TNF-α、NF-κB含量的影响※

袁建菱 郭建生 左之文 曾贵荣 丁志高 张国民

（湖南中医药大学，长沙410208）

妇科千金片对盆腔炎模型大鼠血清中TNF-α、NF-κB含量的影响※

袁建菱 郭建生*左之文 曾贵荣 丁志高 张国民

（湖南中医药大学，长沙410208）

目的探讨妇科千金片治疗盆腔炎的作用机理。方法选用Wistar大鼠，运用子宫内接种混合菌液制造急性盆腔炎模型。随机分为空白组、假手术组、模型组、妇科千金片低、中、高剂量组、妇炎康组及罗红霉素组，治疗后，用ELISA检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、核因子κB（NF-kB）含量。结果与空白组比较，模型组TNF-α、NF-κB的含量明显升高（P＜0.05）；与模型组比较，妇科千金片低、中、高剂量组、妇炎康组及罗红霉素组的TNF-α、NF-κB含量明显降低（P＜0.05）。结论妇科千金片可能是通过调节血清中TNF-α、NF-κB的含量而发挥抗炎作用。

妇科千金片；盆腔炎；肿瘤坏死因子-α；核因子κB；中医药实验

妇科千金片为临床常用中成药，具有清热除湿、益气化瘀之功效，用于湿热瘀阻所致的带下病，腹痛。症见带下量多，色黄质稠、臭秽，小腹疼痛，腰骶酸痛，神疲乏力；慢性盆腔炎、子宫内膜炎、慢性宫颈炎见上述症候者［1］。妇科千金片除用于常见的妇科炎症外，还广泛用于急慢性前列腺炎、慢性咽炎、慢性支气管炎、慢性肠炎等，有很好的临床应用前景［2］。药效学研究表明，妇科千金片对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌和白色念珠菌均有抑菌作用，对环磷酰胺所致免疫低下的小鼠，具有增加小鼠血清溶血抗体、提高小鼠细胞吞噬百分率和吞噬指数的作用［3］。为进一步探讨其药理作用，将妇科千金片对大鼠盆腔炎模型血清中TNF-α、NF-κB含量的影响进行了研究，现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1动物雌性Wistar大鼠74只，体重180～220g，鼠龄8周，由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供（SPF级，合格证号2008-0016），每笼圈5只。

1.2造模及分组［4］将大鼠分别称重，10%乌拉坦按0.075ml／kg体重腹腔麻醉后，以1ml注射器取0.2ml含 3×109个／ml的混合菌液（含金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及解脲脲原体），左手持鼠尾提起大鼠，用10ml注射器的针头于阴道底部的子宫颈分叉处小心进入一侧宫腔内，针头宫腔内来回抽拉2次，然后朝卵巢方向推注菌液0.1ml，同样操作步骤将0.lml菌液注入另一侧子宫。假手术组，手术操作同上，但针头进入子宫后不来回抽动，只朝卵巢方向注射等量0.9%生理盐水，空白组不予任何处理。

正常组、假手术组各10只，模型组、妇科千金片低、中、高剂量组、妇炎康组及罗红霉素组各9只。按大鼠与人等效剂量换算出各大鼠给药剂量各药均配成10ml／kg体质量给药溶液，灌胃给药，每日1次，连续21d。

1.3指标检测灌胃给药结束后第2天，以10%乌拉坦0.075ml／kg体质量腹腔注射麻醉。无菌条件下，断头取血5ml，在4℃，1.2×106rqm／分钟速度下离心30min，吸取上清，在－20℃保存血清，供ELISA检测，分析程序如下：①确定持有一定数量的离心管。②向槽内加入50μl标准品和样品。③每个槽内加入结合酶试剂100ul，轻轻地混匀，持续15秒。④在36±2℃下孵化60分钟。⑤将孵化混合物通过排空板排除到合适的废物容器。⑥用去离子水（20x缓冲液50ml和蒸馏水950ml）冲洗微量滴定器5次。⑦在吸水纸上用力敲打离心管以回收残余的水滴。⑧分别加入50ul染色剂A和染色剂B，轻轻地混合，持续5秒。⑨在（36±2）℃下孵化15分钟。⑩通过加入50μl的终止剂以终止反应。○11轻轻地混合30秒。○12在30分钟内使用分光光度计测定光密度，选择光密度在450nm。

1.4统计分析所有数据均用SPSS15.0 windows软件处理，以均数和标准差表示，组间比较若方差齐选择LSD法，方差不齐选择Tamhane法进行方差分析。

2 结果

表1 妇科千金片对盆腔炎模型大鼠血清中TNF-α、NF-κB含量的影响（x±s）

表1显示，与空白组比较，模型组TNF-α、NF-κB的含量明显升高（P＜0.05），表明盆腔炎模型制作成功；与模型组比较，各治疗组TNF-α、NF-κB的含量明显降低（P＜0.05），表明各治疗组对盆腔炎模型均具有一定的调节作用。但妇科千金片低、中、高剂量组、妇炎康组及罗红霉素组组间比较，无统计学意义（P＞0.05），表明各治疗组对盆腔炎模型的TNF-α、NF-κB的调节的差异不明显。

3 讨论

研究表明妇科千金片对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌和白色念珠菌均有抑菌作用，对环磷酰胺所致免疫低下的小鼠，具有增加血清溶血抗体、提高细胞吞噬百分率和吞噬指数的作用［5］。核因子kB（NF-kB）作为一种普遍存在的转录因子，是多种信号转导途径的汇聚点，不仅参与介导了免疫应答病毒复制、细胞凋亡和增殖的多种基因的表达，而且在调节炎症反应的基因表达中起关键作用［6］。已证实NF-κB可高效诱导多种细胞因子（如IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α）趋化因子和急性期反应蛋白的基因蛋白的基因表达，同时对参与炎症级联瀑布效应多种酶的基因表达具有重要的调控作用［7］。已证实NF-κB可高效诱导多种细胞因子和急性期反应蛋白的基因表达，对参与炎症级联瀑布效应的多种酶的基因表达具有重要的调控作用。作为诱导细胞反应的最初物质，可促进中性粒细胞颗粒伴蛋白水解酶释放，可引起粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子等分泌增加［8］。

TNF-α是一种具有广泛生物学活性的炎症细胞因子，作为一种转录因子，是多种信号转导途径的汇聚点，在调节炎症反应的基因表达中起关键作用［9］。

本研究结果表明妇科千金片对大鼠盆腔炎模型TNF-α、NF-κB含量具有的一定的调节作用。但各治疗组对大鼠盆腔炎模型疗效的差异不明显，妇科千金片低、中、高剂量组与妇炎康组、罗红霉素组疗效相当，显示妇科千金片可能是通过调节血清中TNF-α、NF-κB的含量而发挥抗炎作用。妇科千金片低、中、高剂量组对调节TNF-α、NF-κB含量的差异，尚有待增加样本量，进一步观察研究。

［1］王桂花，朱洪耀．妇科千金片对不同类型疾病的临床研究与探讨［J］．中国实用医药，2009，4（30）：123-124．

［2］丰有吉，沈铿，马丁，等．妇产科学［M］．北京：人民卫生出版社，2005：275-282．

［3］张祖荡，潘善庆．妇科千金片的药效学研究［J］．湖南中医杂志，1998，14（2）：57．

［4］袁建菱，郭建生，伍参荣，等．妇科千金片对急性盆腔炎模型大鼠血清Ig A、IgG、Ig M的影响［J］．湖南中医药大学学报，2010，30（9）：87-89．

［5］王静，杨军，刘超．盆腔炎颗粒对大鼠子宫内膜炎疗效的研究［J］．中国实验方剂学杂志，2006，12（1）：56-58．

［6］．付灵梅，游慧，尤昭玲．细胞脂多糖体外诱导子宫内膜炎症模型的建立［J］．中国实验方剂学杂志，2005，11（3）：70-72．

［7］丁青，尤昭玲．三七复合有效成分对子宫内膜炎症细胞NF-κB p65及TNF-α、IL-1β变化的影响［J］．中国中医药科技，2007，14（12）：113-115．

［8］华亚军，刘静，凌厉．TNF-α和IL-2在新生儿全身炎症反应综合征中的临床价值［J］．上海医药，2009；30（7）：323-324．

［9］李亚珍，傅应云，韩雪梅，等．糖皮质激素对慢性阻塞性肺疾病患者IL-8及TNF-α的影响［J］．广东医学，2011，32（5）：602-604．

春季饮食三部曲

春天，万物复苏，气候由寒变暖。饮食上应根据以下三个不同“时气”而有所侧重。

早春阴寒渐退，阳气开始升发，乍暖乍寒。根据祖国医学“春夏养阳”的理论，此时可适当吃些葱、姜、蒜、韭菜、芥末，不仅能祛散阴寒，助春阳升发，而其中所含的有效成分，还具有杀菌防病的功效。此时宜少吃性寒食品，以防阻遏阳气发越。

仲春古人云，春应在肝。肝禀风木，仲春时节肝气随万物升发而偏于亢盛。祖国医学认为，肝亢可伤脾（木克土），影响脾胃运化。唐代药王孙思邈曾讲：“春日宜省酸增甘，以养脾气”。此时可适当进食大枣、蜂蜜、锅巴之类滋补脾胃的食物，少吃过酸或油腻等不易消化的食物。这时正值各种既富含营养又有疗疾作用的野菜繁茂荣盛之时，如荠菜、马齿苋、鱼腥草、蕨菜、竹笋、香椿等，应不失时机地择食。

晚春气温日渐升高，此时应以清淡饮食为主，在适当进食优质蛋白类食物及蔬果之外，可饮用绿豆汤、赤豆汤、酸梅汤以及绿茶，防止体内积热。不宜进食羊肉、狗肉、麻辣火锅以及辣椒、花椒、胡椒等大辛大热之品，以防邪热化火，变发疮痈疖肿等疾病。

——国家中医药管理局网站

Th e In flue n c e o f Gy ne c olo gic Qianjin Tablet t o t he Con t e n t of TNF-α、NF-κBin Se r um in Ra ts Pel vic In flamma t o r y Dis ea s e Mo d el

Yuan Jianling Guo Jiansheng✫Zuo Zhiw en Zeng Guirong D ing Zhigao Zhang Guomin
（Hunan university of traditional Chinesemedicine，Hunan Changsha 410208）

ObjectiveTo investigate the mechanism of Gynecologic Qianjin Tablet to treat rats with pelvic inflammatory disease．MethodsFemale Wistar rats were inoculated mixed bacilli within the uterine to produce acute pelvic inflammatory disease models．Experiment rats were randomly divided into the blank group，the sham-operation group，the model group，the low dosage group，the middle dosage group，the high dosage group，the Fuyankang group，the Roxithromycin group，After 21 days of treatment，the content of Tumor necrosis factor alpha（TNF alpha），nuclear factorκB（NF-κB）in serum were testinged by ELISA．ResultsCompared with the blank group，TNF-α，NF-κB levels of the model group were statistically increased（P＜05）；Compared with the model group，the levels of TNF-αand NF-κBin each treatment groups were statistically decreased（P＜05）；However，all pairwise comparisons between treatment groups had no statistically significant（P＞0.05）．ConclusionGynecologic Qianjin Tablet may play an anti-inflammatory by decreasing the levels of TNF-αand NF-κB．

Gynecologic Qianjin Tablet；Pelvic inflammatory disease；Tumor necrosis factor alpha（TNFalpha）；Nuclear factorκB（NF－kB）；Traditional Chinese medicine experiment

10.3969／j.issn.1672-2779.2014.07.104

：1672-2779（2014）-07-0150-02

苏 玲 本文校对：刘 密

2013-12-20）

湖南省高校创新平台开放基金项目［No：10K045］

*通讯作者