东方草莓的化学成分研究

李 蓉，杨春涛，田 凯，王 韦，孙静贤，戴建辉，刘晓芳，黄相中,2

(1.云南民族大学 云南省生物高分子功能材料工程技术研究中心，云南 明 650500；2.中国医学科学院 北京协和医学院药物研究所 天然药物活性物质与功能国家重点实验室，北京 100050)

东方草莓别名野草莓，为蔷薇科植物东方草莓(FragariaorientalisLozinsk.)的干燥全草，分布在我国东北、华北、陕西、山西、甘肃、青海、四川以及华中各省.生于山坡草地或林下，海拔在400～6 000 m，朝鲜、蒙古及俄罗斯远东地区也有分布[1].中药以果实入药，能祛痰止咳，除湿止痒，主治咳嗽痰多，湿疹，肾结石.东方草莓藏药名为“志达萨增”，以干燥全草入药，有引吐肺痰，托引脑腔脓血之功效.用于血热性化浓症，肺胃瘀血，黄水病脓疡[2]，为藏药经典验方“藏药七十味珍珠丸(然钠桑培)”[3]、“二十五味珍珠丸”[4]、“骨质增生乙组合(压迫神经引起疼痛)”、“八味秦皮丸”[5]等的重要成分.目前，尚未见国内外对东方草莓的化学成分的研究报道，仅有对草莓(Fragaria×ananssaDuch.)的化学成分研究的报道[6-8].本文利用现代色谱和波谱分析鉴定手段，对东方草莓的化学成分进行系统研究，为临床用药提供科学依据.

1 材料、仪器与试剂

东方草莓采自西藏，经云南民族大学杨青松教授鉴定，标本存放于云南民族大学化学与生物技术学院的标本室.

AVANCE Ⅲ 400超导核磁共振仪(瑞士BRUKER公司)；UltraScan ESI-MS (bruker)；Agilent 260半制备色谱仪(安捷伦科技有限公司)；AR224CN电子天平(瑞士梅特勒，精确度为万分之一)；MS105DU电子分析天平(瑞士梅特勒，精确度为十万分之一)；AS20500A数控超声波清洗器(云南科仪玻有限公司)；JP-150A-8高速多功能粉粹机(永康市久品工贸有限公司)；暗箱式紫外分析仪(2F-20D，巩义市予华仪器)；数显自动恒温不锈钢电热板(SG-1501A,上海硕光电子科技)，旋转蒸发仪(N-1100D-WD,上海爱郎博仪器有限公司)；制备色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C1821.2 × 250 mm, 7 μm；半制备色谱柱：YMC-Pack ODS-A 10 × 250 mm, 7 μm；DW100.P实验室超纯水机(上海和泰仪器有限公司)；乙腈、甲醇为色谱纯，磷酸为分析纯，超纯水.

2 提取与分离

取干燥的东方草莓药材粗粉425 g用甲醇浸泡后，超声提取，减压浓缩回收溶剂，得墨绿色浸膏86 g，用200 mL甲醇溶解浸膏后，加水至乳浊状后依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，减压回收溶剂得石油醚部位浸膏15.3 g, 乙酸乙酯部位浸膏20.5 g.

将乙酸乙酯部位浸膏用DMSO溶解后用MCI凝胶柱层析，依次用水、40%、60%、80%和100%的甲醇洗脱，将40%的甲醇洗脱部位减压浓缩，经反相硅胶柱层析、凝胶柱层析、硅胶柱层析及高效液相色谱分离纯化得化合物1～7，将60%的甲醇洗脱部位减压浓缩，经反相硅胶柱层析得化合物8.

3 结构鉴定

化合物1：无色结晶，分子式为C15H14O6.(ESI-MS)m/z：289 [M-H]-.1H NMR (400 MHz, MeOD)δ：2.53 (1H, dd,J=8.4, 16.4 Hz, H-4), 2.87 (1H, dd,J=5.6, 16.0 Hz, H-4), 4.00 (1H, m, H-3), 4.58 (1H, d,J=7.2 Hz, H-2), 5.88 (1H, d,J=2.4 Hz, H-6), 5.95 (1H, d,J=2.0 Hz, H-8), 6.74 (1H, dd,J=1.6, 2.0 Hz, H-6′), 6.79 (1H, d,J=8.0 Hz, H-5′), 6.86 (1H, d,J=8.0 Hz, H-2′).13C NMR (100 MHz, MeOD)δ：82.9 (C-2), 68.8 (C-3), 28.5 (C-4), 156.9 (C-5), 96.3 (C-6), 157.6 (C-7), 95.6 (C-8), 157.8 (C-9), 100.9 (C-10), 132.2 (C-1′), 115.0 (C-2′), 146.3 (C-3′), 146.2 (C-4′), 116.1 (C-5′), 120.1 (C-6′).其数据与文献[9]报道一致，鉴定该化合物为(+)-儿茶素.

化合物2：黄色粉末，分子式为C30H26O13.(ESI-MS)m/z：593 [M-H]-.1H NMR (400 MHz, MeOD)δ：7.99 (2H, d,J=9.2 Hz, H-2′, 6′), 6.82 (2H, d,J=8.8 Hz, H-3′, 5′), 6.31 (1H, d,J=2.0 Hz, H-8), 6.13 (1H, d,J=2.0 Hz, H-6), 5.25 (1H, d,J=7.6 Hz, H-1″), 7.40 (1H, d,J=16.0 Hz, H-α), 6.07 (1H, d,J=16.0 Hz, H-β), 7.31 (2H, d,J=8.8 Hz, H-2″, 6″), 6.80 (2H, d,J= 8.8Hz, H-3″, 5″).13C NMR (100 MHz, MeOD)δ：159.3 (C-2), 135.2 (C-3), 179.4 (C-4), 163.0 (C-5), 100.0 (C-6), 165.9 (C-7), 94.8 (C-8), 158.4 (C-9), 105.6 (C-10), 122.7 (C-1′), 132.2 (C-2′,6′), 116.8 (C-3′,5′), 161.5 (C-4′), 103.9 (C-1″), 75.7 (C-2″), 77.9 (C-3″), 71.7 (C-4″), 75.8 (C-5″), 64.3 (C-6″), 146.6 (C-α), 114.7 (C-β), 127.1 (C-1‴), 131.2 (C-2‴, 6‴), 161.2 (C-4‴), 116.0 (C-3‴, 5‴), 168.8 (C-7‴).其数据与文献[10]报道一致, 鉴定该化合物为山柰酚-3-O-6″-反式-香豆酰基-β-D-葡萄糖苷.

化合物3：无色针状结晶，分子式为C8H10O2.(ESI-MS)m/z: 131 [M-H]-.1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ：7.05 (2H, d,J=8.1 Hz, H-2, 6), 6.73 (2H, d,J=8.1 Hz, H-3, 5), 2.69 (2H, t,J=7.4 Hz, H-7), 3.64 (2H, dt,J=5.3, 7.3 Hz, H-8).13C NMR (100 MHz, CDCl3)δ：129.4 (C-1), 129.7 (C-2, 6), 115.0 (C-3, 5), 154.8 (C-4), 39.8 (C-7), 64.3 (C-8).其数据与文献[11]报道一致, 鉴定该化合物为对羟基苯乙醇.

化合物4：黄色油状，分子式为C9H12O3.(ESI-MS)m/z：191 [M+Na]+.1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ：6.83 (1H, H-2), 6.82 (1H, d,J=8.2 Hz, H-5), 6.72 (1H, dd,J=3.1, 3.1 Hz, H-6), 5.80 (1H, s, 3-OH), 3.90 (3H, s, 4-OCH3), 3.84 (3H, t,J=6.4 Hz, CH2CH2OH).13C-NMR (100 MHz, CDCl3)δ：131.8 (C-1), 115.2 (C-2), 145.9 (C-3), 145.4 (C-4), 110.9 (C-5), 120.6 (C-6), 38.7 (C-7), 63.8 (C-8), 56.2 (C-9).其数据与文献[12]报道基本一致, 鉴定该化合物为3-羟基-4-甲氧基苯乙醇.

化合物5：黄色粉末，分子式为C15H10O5.(ESI-MS)m/z：293[M+Na]+.1H NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ：6.80 (1H, s, H-3), 6.20 (1H, d,J=2.4 Hz, H-6), 6.49 (1H, d,J=2.4 Hz, H-8), 7.94 (2H, d,J=8.8 Hz, H-2′, 6′), 6.93 (2H, d,J=9.2 Hz, H-3′,5′), 12.98 (1H, s, 4-OH).13C NMR(100 MHz, DMSO-d6)δ：164.6 (C-2), 103.3 (C-3), 182.2 (C-4), 157.8 (C-5), 99.3 (C-6), 164.2 (C-7), 94.4 (C-8), 161.9 (C-9), 102.9 (C-10), 121.6 (C-1′), 128.9 (C-2′, 6′), 116.4 (C-3′, 5′), 161.6 (C-4′).其波谱数据与文献[13]报道基本一致, 鉴定该化合物为芹菜素.

化合物6：黄色粉末，分子式为C15H10O7.(ESI-MS)m/z：303 [M+H]+.1H NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ：7.67 (1H, d,J=2.5 Hz, H-2′), 7.53 (1H, dd,J=8.5, 2.5 Hz, H-6′), 6.89 (1H, d,J=8.5 Hz, H-5′), 6.19 (1H, d,J=8.5 Hz, H-6), 6.41 (1H, d,J=2.5 Hz, H-8).13C NMR (100 MHz, DMSO-d6)δ：146.7 (C-2), 135.7 (C-3), 175.8 (C-4), 160.7 (C-5), 98.2 (C-6), 163.9 (C-7), 93.2 (C-8), 156.0 (C-9), 102.9 (C-10), 121.8 (C-1′), 115.0 (C-2′), 145.0 (C-3′), 147.6 (C-4′), 115.6 (C-5′), 119.9 (C-6′).以上数据与文献[14-15]报道的数据基本一致，确定该化合物为槲皮素.

化合物7：淡黄色粉末，分子式为C22H22O11.(ESI-MS)m/z：463 [M-H]-.1H NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ：7.59 (1H, d,J=2.5 Hz, H-2′), 7.57 (1H, dd,J=2.5, 8.2 Hz, H-6′), 6.85 (1H, d,J=8.5 Hz, H-5′), 6.40 (1H, d,J=2.5 Hz, H-8), 6.20 (1H, d,J=2.5 Hz, H-6), 5.47 (1H, d,J=7.0 Hz, H-1″), 3.09～3.65 (6H, m, sugar protons).13C NMR (100 MHz, DMSO-d6)δ：156.3 (C-2), 133.5 (C-3), 177.5 (C-4), 161.0 (C-5), 98.7 (C-6), 164.1 (C-7), 93.4 (C-8), 156.1 (C-9), 104.0 (C-10), 121.5 (C-1′), 115.4 (C-2′), 144.7 (C-3′), 148.4 (C-4′), 116.3 (C-5′), 121.3 (C-6′), 101.2 (C-1″), 74.2 (C-2″), 76.6 (C-3″), 70.2 (C-4″), 77.4 (C-5″), 60.6 (C-6″).以上数据与文献[16]报道的数据基本一致，确定该化合物为槲皮素-3-O-β-D-葡糖苷.

化合物8：白色针晶，分子式为C29H50O.(ESI-MS)m/z：414 [M]+.1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ：0.69 (3H, s, CH3-18), 1.02 (3H, s, CH3-19), 0.93 (3H, d,J=6.50 Hz, CH3-21), 0.84 (3H, d,J=3.69 Hz, CH3-26), 0.81 (3H, s, CH3-27), 0.85 (3H, d,J=1.84 Hz, CH3-29), 3.53 (1H, m, H-3), 5.36 (1H, d,J=4.98 Hz, H-6).13C NMR (100 MHz, CDCl3)δ：32.4 (C-1), 31.8 (C-2), 70.3 (C-3), 42.4 (C-4), 140.9 (C-5), 121.8 (C-6), 32.1 (C-7,8), 50.3 (C-9), 36.6 (C-10), 21.5 (C-11), 28.5 (C-12), 45.9 (C-13), 56.9 (C-14), 24.4 (C-15), 39.9 (C-16), 54.6 (C-17), 12.1 (C-18), 19.2 (C-19), 36.3 (C-20), 18.9 (C-21), 26.3 (C-22), 34.1 (C-23), 42.4 (C-24), 23.3 (C-25), 12.1 (C-26), 29.3 (C-27), 19.9 (C-28), 19.7 (C-29).以上数据与文献[17]报道的数据基本一致，确定该化合物为β-谷甾醇.

4 结语

从东方草莓甲醇提取物中分离得到了8个化合物.其中化合物1、2、5、6、7属于黄酮类化合物，化合物3、4属于酚类化合物，化合物8属于甾体类化合物.化合物1～8均首次从该植物中分得.

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