□苏建睦,王小敏,莫昭展*,雷速珍
(1.玉林师范学院 生命科学与技术学院,广西 玉林 537000)
金花茶茶花中茶多酚和总黄酮含量分析
□苏建睦1,王小敏1,莫昭展1*,雷速珍1
(1.玉林师范学院 生命科学与技术学院,广西 玉林 537000)
通过紫外分光光度法对扶绥中东金花茶、毛瓣金花茶、普通金花茶茶花中茶多酚含量和总黄酮含量进行了测定,并对测定结果进行比较分析,结果表明:(1)毛瓣金花茶花中茶多酚的含量和总黄酮含量分别为8.96%、13.78%,均高于扶绥中东金花茶和普通金花茶,且在三种金花茶中毛瓣金花茶花中茶多酚含量与其他两种金花茶具有极显著差异,扶绥中东金花茶和普通金花茶差异不显著,总黄酮含量与其他两种金花茶具有极显著差异,扶绥中东金花茶和普通金花茶有显著差异,表明毛瓣金花茶的花具有更高的药用价值,扶绥中东金花茶的花次之;(2)金花茶花中茶多酚和总黄酮含量与叶中茶多酚和总黄酮含量有一定的差异,花中茶多酚含量比幼叶中的稍低但比成熟叶中的高,毛瓣金花茶花中总黄酮比叶高约10%,表明金花茶的花也具有较高的开发利用价值;(3)毛瓣金花茶花中茶多酚含量比其他两种金花茶接近于市售成品茶,表明毛瓣金花茶的花较适合制茶.
金花茶茶花;茶多酚;总黄酮
金花茶是茶花家族中唯一花瓣金黄色的珍稀物种,在山茶类群中,享有“植物界大熊猫”、“茶族皇后”之美誉.广西是目前世界上金花茶物种资源最丰富的地区,是金花茶组植物的地理分布中心,被誉为金花茶的故乡,世界约90%的野生金花茶生长于我国广西的防城、南宁、隆安、扶绥等县(市)[1].
金花茶有很高的应用价值,其花叶均可入药,富含多种微量元素,如锗(Ge)、硒(Se)、锌(Zn)、钴(Co)、钼(Mo)、钒(V)等以及维生素、酮类物质、茶多酚、多种人体必需的氨基酸[2-3].植物体中的黄酮类物质和茶多酚不管是在食品工业还是医药行业、日用化工业等都具有广阔的应用前景[4-6].市场上金花茶的产品单一,而我国茶叶中茶多酚、黄酮类化合物的含量很低,不能满足茶多酚和黄酮在各行各业上的需求,而茶花中丰富的茶多酚和黄酮类化合物没得到充分利用.而且,由于金花茶叶片资源比较丰富,所以在其生理活性成分研究方面,对叶片的功效成分和药理作用研究得比较多[7-10],而茶花的功效成分研究仅见李石容[11]、林华娟[6]等,鲜见报道.因此本课题选择扶绥中东金花茶(C.achrysantha)、毛瓣金花茶(C. pubipetata)、普通金花茶(C. nitidssima)3个品种的茶花为原材料测定其中丰富的茶多酚和黄酮类化合物含量,为正确评定金花茶茶花作为食品、保健品等的原材料提供科学依据,为茶花的进一步开发利用提供理论依据.
1.1 实验试剂
没食子酸(中国食品药品检验所提供)、70%甲醇溶液、10%福林酚试剂、70%乙醇溶液、芦丁标准品(中国药品生物制品检定所提供)、5%亚硝酸钠溶液、10%硝酸铝溶液、氢氧化钠.
1.2 主要实验仪器
紫外-可见分光光度计;电子分析天平;电热恒温水浴锅;粉碎机;干燥箱;离心机等.
1.3 样品的选取与获得
从金花茶的栽培种中各随机选取扶绥中东金花茶、毛瓣金花茶、普通金花茶各5株,并每种金花茶在选好的植株中随机摘取40朵花作为样品,用蒸馏水洗净,放在干燥箱中,在65℃下12h烘干,再用粉碎机粉碎(或于60℃烘干, 粉碎、研磨至干粉),作为备用样品.
1.4 实验方法
1.4.1 茶多酚的测定方法
称取3种金花茶样品约0.2g,每种金花茶各两份,分别置10mL离心管中,加入在70℃中预热过的70%甲醇溶液5mL,蜗旋,立即移入70℃水浴中,浸提10min(每隔5min蜗旋一次),转入离心机在3500r/min离心10min,将上清液转移到10mL容量瓶中,残渣再用70%甲醇溶液5mL提取一次,重复以上操作,合并提取液定容至10mL容量瓶,作为母液.精密量取母液各1mL至25mL容量瓶中,用水定容至刻度,作为测试液.利用紫外-可见分光光度计下按照GB/T 8313-2008 茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法,精确吸取样品溶液分别试管中进一步处理后, 在765nm波长处各平行测定5次,每次每个品种2个样品测定吸光度, 代入回归方程A=0.008586c+0.02603,R=0.9995,计算茶多酚的浓度后再根据计算公式计算其含量.计算公式如下:
1.4.2 总黄酮的测定方法
称取3种金花茶样品约1g,每种金花茶各两份,分别置150mL具塞三角瓶中,精密加入70%乙醇溶液50mL,称定重量,于70℃水浴中回流提取2h,冷却,再称定重量,用70%的乙醇补足减失的重量,过滤,续滤液,作为供试品,待用.利用紫外-可见分光光度计,参考黄永林[12]等的测定方法精密吸取供试品溶液0.5mL,置25mL容量瓶中进一步处理后,在510nm波长处各平行测定5次,每次每个品种2个样品测定吸光度,代入回归方程A=0.01476c-0.00369,R=0.9993,计算总黄酮的浓度后再根据公式(与茶多酚含量的计算公式相同)计算其含量.
1.5 数据整理与分析方法
本文数据的整理与分析主要采用SPSS17.0统计分析软件完成.
2.1 金花茶花中茶多酚与总黄酮含量分析
表1 金花茶花中茶多酚和总黄酮含量Tab.1 The tea polyphenols and tolal flavonoids content in the flower of Camellia Chrysantha
由表1可知:扶绥中东金花茶、毛瓣金花茶、普通金花茶花中茶多酚的含量分别为4.49%、8.96%、4.64%,总黄酮的含量分别为6.12%、13.78%、4.80%.毛瓣金花茶花中茶多酚分别是扶绥中东金花茶、普通金花茶花中的2倍、1.9倍,普通金花茶比扶绥中东金花茶高0.15%;花中总黄酮分别是扶绥中东金花茶、普通金花茶花中的2.25倍、2.87倍,扶绥中东金花茶比普通金花茶高1.32%.结果表明,毛瓣金花茶花中茶多酚和总黄酮含量均较高,扶绥中东金花茶次之,普通金花茶最低.
2.2 茶花和叶中茶多酚比较
表2 金花茶花和叶茶多酚含量的比较Tab.2 Content of tea polyphenols in flower Compare with content of tea polyphenols in leaf of Camellia chrysantha
梁机等对8种金花茶的叶茶多酚进行了检测,得到普通金花茶、毛瓣金花茶的成熟叶茶多酚含量分别为1.96%、4.14%,幼叶茶多酚含量分别为9.17%、11.73%[3].列表比较这两种金花茶花中茶多酚含量与叶中茶多酚含量,如表2.由表2可知普通金花茶、毛瓣金花茶花中茶多酚的含量分别是成熟叶中的2.4倍、2.2倍 ,而幼叶中茶多酚的含量分别是花中的1.97、1.31倍.
2.3 茶花中总黄酮与叶中总黄酮含量的比较分析
表3 金花茶茶花和叶总黄酮的比较Tab.3 Content of total flavonoids in flower Compare with content of total flavonoids in leaf of Camellia chrysantha
在黄兴贤[13]等的研究中,普通金花茶、毛瓣金花茶的新叶、一年叶、二年叶的总黄酮含量与本实验测定得到的普通金花茶、毛瓣金花茶花中总黄酮含量有很大差异,列表比较如表3.由表3可知:金花茶花和叶中的总黄酮含量不同,对于普通金花茶来说,新叶含的总黄酮的量最多,花次之,二年叶龄的叶最少.对于毛瓣金花茶来说花中总黄酮的量最高,新叶次之,一年叶最低.
2.4 茶花与两种成品茶中茶多酚含量进行比较
茶多酚是天然茶叶所含的特征生物活性成分, 抗氧化作用很强, 具有许多保健功能,茶多酚的含量则作为制茶适宜性的重要指标[4].比较金花茶茶花中的茶多酚和成品茶中的茶多酚含量,分析三种金花茶茶花的制茶适宜性,如图1.
图1 金花茶花中茶多酚和成品茶茶多酚含量比较Fig.1 The determination tea polyphenols and tea polyphenols content in the flower of Camellia Chrysantha
由图1可知,不同种的金花茶的花中茶多酚含量有差异,其中毛瓣金花茶花中的茶多酚含量最高,含量达8.96%,与市售的昭平仙回茶(18.3%)和灵山中秀福云绿茶(16.6%) 的茶多酚含量较为接近,而扶绥中东金花茶(4.49%)和普通金花茶(4.64%)与市售的两种成品茶的茶多酚含量相差较远.因而, 就茶多酚含量而言, 毛瓣金花茶茶花较适于制茶, 而扶绥中东金花茶和普通金花茶的花制茶适宜性略低.
研究结果表明,茶花中含有茶多酚、黄酮类物质、皂甙和活性多糖等多种生理活性物质[7.9]及多种维生素[13].
本文分析了扶绥中东金花茶、毛瓣金花茶、普通金花茶花中茶多酚和总黄酮的含量.毛瓣金花茶花中茶多酚分别是扶绥中东金花茶、普通金花茶花中的2倍、1.9倍,普通金花茶比扶绥中东金花茶高0.15%;毛瓣金花茶花中总黄酮分别是扶绥中东金花茶、普通金花茶花中的2.25倍、2.87倍,扶绥中东金花茶比普通金花茶高1.32%,表明毛瓣金花茶花中茶多酚和总黄酮含量均较高,扶绥中东金花茶次之,普通金花茶最差.
比较金花茶花、叶中的茶多酚含量及总黄酮含量中,花中的茶多酚和总黄酮含量与叶中的有一定的差异.就茶多酚而言,普通金花茶、毛瓣金花茶花中茶多酚的含量高于成熟叶,分别是成熟叶中的2.4倍、2.2倍 ,而低于幼叶,幼叶中茶多酚的含量分别是花中的1.97、1.31倍.就总黄酮而言,在普通金花茶中,新叶含的总黄酮的量最多,花次之,二年生的叶最少;在毛瓣金花茶中,花中总黄酮的量要比叶所含的多10%左右.总的来说,金花茶茶花与叶片中的生理活性成分有较大差异,花中茶多酚、黄酮类生理活性成分含量明显高于成熟叶片,稍低于幼叶,表明金花茶茶花不仅具有较高的观赏价值,而且具有较高的开发利用价值.
通过三种金花茶茶花中的茶多酚含量与两种成品茶中茶多酚进行比较,发现毛瓣金花茶茶花中茶多酚的含量与市售成品茶中的茶多酚含量较接近,而其他两种金花茶茶花中茶多酚含量与其相差较远,初步表明毛瓣金花茶的花较其他两种金花茶适合制茶,这与梁机等人的研究结果是相似的[3]. ■
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【责任编辑 谢文海】
Determination and Analysis the Content of Tea Polyphenols and Total Flavonoids in Flower of Three Camellia Chrysantha
SU Jian-mu1, WANG Xiao-min1, MO Zhao-zhan1*, LEI Su-zhen
(College of Physical Bio-Science and Technology, Yulin Nomal University, Yulin Guangxi 537000)
The Camellia Achrysantha, Camellia pubipetala, ordinary golden camellias of tea polyphenols content and flavonoids content in the flower were determined by ultraviolet spectrophotometric method. we compared the results and analyzed tea-process fitness, the results showed that: 1. The flower of Camellia pubipetala tea polyphenol content and total flavonoids content is 8.96%, 13.78% respectively, higher than Camellia Achrysantha and ordinary golden camellias. And in the three species of Camellia Chrysantha, the tea polyphenols content in Camellia pubipetala’s flower has a very significant difference in the others of Camellia Achrysantha and ordinary golden camellias, but Camellia Achrysantha is not significant difference in ordinary golden camellias. The total flavonoids content with other two kinds of Camellia Chrysantha tea has a very significant difference, and have significant differences between Camellia Achrysantha and ordinary golden camellias, which indicates that Camellia pubipetala’s flowers with higher medicinal value, the Camellia Achrysantha’s flowers was times; 2 The tea polyphenols and total flavonoids content in the flower of Camellia Chrysantha has certain differences in leaf. Its flower’s tea polyphenol content is slightly lower than in younger leaves but higher than in mature leaves, Camellia pubipetala, estimated at 10% more than the leaf total flavonoids in the flower show the scented tea also has highutilization value. 3. In the flower of Camellia pubipetala, tea polyphenols content were closer to the sold into tea than the other two species of Camellia Chrysantha. It shows that Camellia pubipetala’s flower is suitable for tea making.
Flower of Camellia Chrysantha; tea polyphenols; total flavonoids
TS272
A
1004-4671(2014)05-0064-05
2014-09-12
广西教育厅重点项目(No.201202ZD081)
苏建睦(1989~),男,壮族,广西马山人,玉林师范学院生命科学与技术学院助理实验师,硕士,研究方向:植物细胞工程教学与研究。*
莫昭展(1974~),男,壮族,广西博白人,玉林师范学院生命科学与技术学院教授,博士。研究方向:植物资源开发利用的教学与研究。