RP-HPLC测定阿那曲唑的含量

杨玉琴 洪丽萍 陈月霞 李竞梅 石晶萍 朱佳丽

·实验研究·

RP-HPLC测定阿那曲唑的含量

杨玉琴 洪丽萍 陈月霞 李竞梅 石晶萍 朱佳丽

目的 建立阿那曲唑含量测定的反相高效液相色谱(RP-HPLC)法。方法 色谱柱Agilent XDB-C18柱(150 mm×4.6mm, 5 μm)；流动相为乙腈-水(44:56), 流速1.0 ml/min, 检测波长210 nm。结果阿那曲唑在5.00~18.00 μg/ml范围内线性关系良好, r=0.9995。平均回收率为99.69%, RSD为0.3%(n=6)。结论 本方法简便、准确, 可以用于阿那曲唑的定量分析。

反相高效液相色谱；阿那曲唑；含量测定

阿那曲唑是本公司生产的抗肿瘤类原料药, 其制剂是艾达(阿那曲唑片), 主要适用于他莫昔芬及其它抗雌激素疗法仍不能控制的绝经后妇女的晚期乳腺癌。本文参考原质量标准［1］和药典方法［2］对测定阿那曲唑含量的方法进行了研究及各项验证, 结果表明使用RP-HPLC方法可以简便、准确测定阿那曲唑的含量。

1 仪器与试药

瑞士Mettler Toledo XP205 电子分析天平, 美国安捷伦公司高效液相色谱仪Agilent1200 Series等。

阿那曲唑对照品(批号为：100770-200401)购于中国药品生物制品检定所, 阿那曲唑(批号分别为：13070111, 13080111, 13090111), 试验用乙腈为色谱纯, 配制用水为超纯水。

2 方法

2.1 系统适应性试验和色谱条件 色谱柱为：美国Agilent XDB C18柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm)；流动相为：乙腈-水(44：56)；流速1.0 ml/min；检测波长210 nm；柱温：30℃；流速：1.0 ml/min。在此色谱条件下, 理论板数以阿那曲唑峰计大于2000, 溶剂不干扰测定, 此色谱条件可行。

2.2 配制对照品溶液 称取阿那曲唑对照品适量, 用流动相溶解并制成每1 ml含100 μg的对照品贮备液。

2.3 线性关系试验 分别精密吸取上述对照品贮备液适量,用流动相稀释制成浓度分别为：5、8、10、12、15、36 μg/ ml的样品溶液, 按上述色谱条件分别依次进样20 μl, 横坐标(X)为阿那曲唑的浓度, 纵坐标(Y)为峰面积积分值, 求得回归方程为： Y=60.88 X+9.859 相关系数r=0.9995。

结果表明阿那曲唑的浓度和峰面积积分值在5.00~18.00 μg/ml的浓度范围内呈良好的线性关系。

2.4 精密度试验 取阿那曲唑对照品溶液(0.01012 mg/ml),进样体积为：20 μl, 重复进样6次, 结果阿那曲唑峰面积RSD值为0.1%。

2.5 稳定性试验 取浓度为0.01015 mg/ml的样品溶液, 在25℃下放置考察, 精密量取供试品溶液20 μl, 在放置0、2、4、6、8、12 h后分别测定1次, 共测定6次, 记录峰面积, 阿那曲唑峰面积均值为618.17559, RSD值为0.4%, 结果表明供试品溶液在12 h内稳定。

2.6 重复性试验 取批号为13120111的样品, 按照“2.8”项下方法同法制备6份供试品溶液, 结果阿那曲唑含量均值为99.90%, RSD为0.2%。

2.7 加样回收率试验 采用加样回收法。取已知阿那曲唑含量的样品(13010111、13010211、13010311)适量, 分别精密加入阿那曲唑对照品溶液(0.02 mg/ml)10 ml, 按照“2.8”项下方法同法制备6份供试液, 分别依次进样20 μl, 计算得平均回收率为99.69%, RSD为0.3%

2.8 样品含量测定 取本品, 精密称定适量, 置100 ml量瓶中, 加乙腈约5 ml, 振摇使阿那曲唑溶解, 加流动相稀释至刻度, 摇匀, 制成每1 ml溶液中约含10 μg的溶液, 用0.45 μm微孔滤膜滤过, 分别依次进样20 μl, 按外标法计算供试品中阿那曲唑的含量。

3 小结

作者分别选取了不同配置比例的流动相, 不同厂家和规格的色谱柱进行分析验证, 验证结果表明选择最佳色谱条件是：流动相：乙腈-水(44:56)；色谱柱：Agilent XDB C18(150 mm×4.6 mm, 5 μm)；柱温：30℃；流速：1.0 ml/ min；波长：210 nm。

［1］ 国家食品药品监督管理局.WSI-(X-085)-2005Z国家药品标准.

［2］ 国家药典委员会.中国药典(二部) .北京：化学工业出版社, 2010:45.

2014-03-14］

225321 泰州, 扬子江药业集团有限公司质量管理部质量检测中心

洪丽萍