子宫内膜腺癌中MMP-9表达的免疫组化研究

仲肖静 李菊萍 颜丽丽

子宫内膜腺癌中MMP-9表达的免疫组化研究

仲肖静 李菊萍 颜丽丽

目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在子宫内膜增生症及子宫内膜腺癌组织中的表达及其与子宫内膜腺癌的临床病理关系。方法采用免疫组化法检测随机筛选、分组的不同子宫内膜组织切片中MMP-9的表达情况。结果MMP-9在正常子宫内膜、子宫内膜增生症和子宫内膜腺癌组织中的阳性表达率分别为25.0%、33.4%、95.0%, 差异有统计学意义(P＜0.05)。其表达强度与子宫内膜腺癌的手术-病理分期、组织学分级、肌层浸润深度和淋巴结转移相关, 差异有统计学意义(P＜0.05)。结论MMP-9在子宫内膜增生症进展至子宫内膜腺癌这一过程中起促进作用, 且强表达与子宫内膜腺癌的浸润深度和转移程度有关, 为子宫内膜腺癌的早期临床诊断和靶向治疗提供理论依据。

基质金属蛋白酶-9；子宫内膜腺癌；免疫组化；肿瘤；转移

近年来关于基质金属蛋白酶(MMPs)在子宫内膜癌中的研究较多, 但研究结果不一致, 目前仍存在争议。本研究通过免疫组化方法检测MMP-9在不同子宫内膜组织中的表达,探讨其与子宫内膜腺癌的生物学行为的相关性。

1 材料与方法

1.1材料 标本均取自2010年1月～2013年12月在本院的子宫内膜腺癌组织蜡块100例, 子宫内膜增生组织蜡块30例, 正常子宫内膜蜡块20例作对照。年龄37～68岁。子宫内膜腺癌病例依照国际妇产科联盟(FIGO2009年)标准［7］进行分级、分期。研究经患者同意, 并通过伦理委员会。

1.2实验试剂及方法 主要试剂：MMP-9鼠抗人单克隆抗体(浓缩型)、即用型链霉素抗生物蛋白-过氧化酶(streptavidin peroxidase, SP)超敏试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司)。主要实验仪器：DK-420恒温水浴箱(上海基星生物科技有限公司)；采用SP方法检测MMP-9在各组组织中表达。用已知的肝癌组织的阳性切片作阳性对照, 用磷酸盐(PBS)缓冲液代替一抗孵育切片为阴性对照。主要实验步骤：3% H2O2孵育；于98℃下0.1 mmol/L磷酸缓冲液修复抗原,滴加一抗。MMP-9抗体稀释后的质量浓度为1:100, 滴加二抗；滴加SP复合物；DAB 染色；苏木素复染。步骤按说明书操作。

1.3统计学方法 采用SPSS17.0统计学软件对数据进行统计学分析。计数资料采用χ2检验。P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1各组子宫内膜组织中MMP-9的表达情况 MMP-9蛋白在正常子宫内膜组织、子宫内膜增生症组织和子宫内膜癌组织中的阳性表达率分别为25.0%、33.4%、95.0%, 从正常子宫内膜组织、增生的子宫内膜组织至子宫内膜腺癌组织, MMP-9的阳性表达率呈显著上升的趋势, 两两比较, 差异有统计学意义(P＜0.05)。

2.2子宫内膜腺癌组织中MMP-9的表达情况 本研究结果表明, 在子宫内膜腺癌组织中, MMP-9的表达强度与手术-病理分期的早晚、组织学分级的高低、肌层浸润的程度及淋巴结有无转移均相关, 差异有统计学意义(P＜0.05)。

3 讨论

子宫内膜腺癌的重要生物学特征是肿瘤的浸润与转移,肿瘤细胞的细胞外基质降解使肿瘤细胞的基底膜完整性遭到破坏, 继而发生了肿瘤的侵袭及转移［1］。

本研究结果发现, MMP-9在正常子宫内膜组织中表达多为阴性, 在子宫内膜腺癌组织中的表达强度最高, 差异有统计学意义(P＜0.05)。在子宫内膜增生症各级组织中表达呈阳性, 且随子宫内膜增生程度的加重, MMP-9的阳性表达程度也随之增强, 但各级子宫内膜增生症中MMP-9的表达差异无统计学意义(P＞0.05), 不排除与样本数量少有关MMP-9在子宫内膜腺癌组织中的强表达还与子宫内膜腺癌的临床分期相关［2］。本研究结果提示：MMP-9的表达水平在子宫内膜腺癌的晚期组织中的表达强度及阳性率高于早期组织, 差异有统计学意义(P＜0.05), 同时在组织分化差的组织中表达增强,且随着分化级别增高, 其表达水平亦增高。表明MMP-9与其临床分期有显著性关系, 在子宫内膜腺癌的转移、侵袭等活动中易发挥着重要的作用。由此推论, MMP-9的高表达与子宫内膜腺癌的恶性程度和易于浸润转移有关。

［1］ 黄瑾, 阳丽君, 苏园园, 等.MMP-2、MMP-9在子宫内膜增生症和腺癌中的表达.广东医学院学报, 2011(2):129-131.

［2］ 刘琴, 李海, 徐松, 等.STAT3与SOCS3在子宫内膜腺癌中的表达及生物学行为相关性分析.临床和实验医学杂志, 2013 (17):1350-1352.

2014-07-18］

265600 蓬莱市人民医院妇产科(仲肖静 颜丽丽)；山东省蓬莱市妇幼保健站(李菊萍)

仲肖静