聚乳酸／纳米四氧化三铁载阿奇霉素缓释剂的制备及性能研究

马喜峰，汤春妮，李 斌

（陕西国防工业职业技术学院化学工程学院，陕西 西安710302）

阿奇霉素（azithromycin，AZM）是新的大环内酯类广谱抗生素［1］，其化学结构与红霉素非常相似，可由红霉素结构修饰后得到。阿奇霉素在酸性环境中稳定、半衰期长、在体内分布广，伴随其在临床上的大范围使用，不良反应越来越多。有研究将医药级的阿奇霉素制成有磁性且具有靶向的药物，人体服用后，通过在体外加磁场将微球引至病变部位，随后药物从微球中释放出来，有效浓度增大，可以提高治疗效果［2－4］。相关研究已成为世界药学界研究的焦点，但国内研究相对较少。因此，制备出具有磁性且能将药物引至病变部位的靶向药物意义重大。

作者在此采用乳化－溶剂挥发法，以可生物降解材料聚乳酸为载体，在其中加入医药级阿奇霉素和一定量纳米四氧化三铁制备聚乳酸／纳米四氧化三铁载阿奇霉素缓释微球，并优化了制备工艺。

1 实验

1.1 试剂与仪器

聚乳酸（PLA），医药级，深圳光华伟业实业有限公司；注射用阿奇霉素，陕西平利制药有限公司；明胶，生化试剂，天津福晨化学试剂厂；磷酸二氢钾，分析纯，天津恒兴化学试剂制造有限公司；吐温80、磷酸氢二钠、二氯甲烷，分析纯，西安化学试剂厂；纳米四氧化三铁，分析纯，北京德科岛金科技有限公司。

TDL－5－A型台式离心机，上海安亭科学仪器厂；UV／1800PC－DS型分光光度计，上海美谱达仪器有限公司；RH－BASIC1型磁力加热搅拌器，广州仪科实验室技术有限公司；JJ－1A型数显精密增力电动搅拌器，武汉葛莱莫设备有限公司；KH－250DB型超声波清洗机，温州创高电子仪器有限公司；TZG－6020型真空干燥箱，陕西天美科学仪器有限公司；SHE－D（Ⅲ）型循环水式真空泵，巩义予华有限公司；2402型蹄形磁铁，浙江向阳花教学器材有限公司。

1.2 方法

1.2.1 药物最大吸收波长的测定和标准曲线的绘制

称取一定量的阿奇霉素，向其中加入pH值为6的磷酸盐缓冲溶液（PBS）配制成150μg·mL－1的阿奇霉素溶液［5］；取上述溶液5mL，加硫酸溶液（V硫酸∶V蒸馏水＝3∶1）5mL，摇匀，在60℃水浴中加热20min，取出后冷却至室温。在400～600nm范围内扫描，确定最大吸收波长［6］。

将阿奇霉素标准溶液稀释至不同的浓度，以PBS为参比溶液在最大吸收波长处测定吸光度，以阿奇霉素浓度（c）为横坐标、吸光度（A）为纵坐标绘制标准曲线。

1.2.2 聚乳酸／纳米四氧化三铁载阿奇霉素微球的制备

采用乳化－溶剂挥发法［6－7］。准确称取适量阿奇霉素加入到－定量的聚乳酸二氯甲烷溶液中，同时加入一定量的纳米四氧化三铁，用超声波清洗机分散，得到超声分散溶液；取60mL明胶液，向其中加入1mL吐温80，高速搅拌；将超声分散溶液加入到上述高速搅拌的溶液中，在一定温度下继续搅拌3h，待二氯甲烷挥发完全后于3 600r·min－1离心0.5h；将浑浊液过滤，洗涤，并用去离子水冲洗去除明胶，解吸、干燥，所得固体即为聚乳酸／纳米四氧化三铁载阿奇霉素微球（简称阿奇霉素微球）［7］。

1.2.3 体外释药行为研究

用动态膜透析法［8］测定阿奇霉素微球的释药行为（模拟人体体液环境）。将装有含约100mg阿奇霉素微球的透析袋放到150mL pH值为6的PBS中，温度控制在（37±0.5）℃，转速不宜太高，每隔几小时取出5mL袋外溶液，同时补充等量的PBS。

按1.2.1方法测量溶液的吸光度，计算药物溶出量及其占总药物量的百分比。以时间为横坐标、药物溶出量占总药物量的百分比为纵坐标绘制标准曲线。

2 结果与讨论

2.1 阿奇霉素的标准曲线

实验发现，阿奇霉素的最大吸收波长为482nm。在该波长下测定阿奇霉素系列标准溶液的吸光度，绘制标准曲线并进行线性回归，拟合线性方程为A＝3.833c－0.002238，R2＝0.9984。表明，阿奇霉素溶液浓度在50～500μg·mL－1范围内与吸光度线性关系良好。

2.2 正交实验优化制备工艺

以平均载药量为考核指标，以阿奇霉素用量（A）、PLA浓度（B）、乳化温度（C）、吐温80用量（D）为考察因素进行正交实验以优化阿奇霉素微球的制备工艺。正交实验的结果及分析见表1。

表1 正交实验结果与分析Tab.1 The results and analysis of orthogonal experiment

从表1可以看出，各因素对阿奇霉素微球的平均载药量影响大小依次为阿奇霉素用量＞乳化温度＞PLA浓度＞吐温80用量，最佳制备条件为A3B2C1D3，即阿奇霉素用量40mg、PLA浓度0.05 mg·mL－1、乳化温度20℃、吐温80用量0.5g。

2.3 阿奇霉素微球的体外释药行为（图1）

图1 阿奇霉素微球体外释药量与时间的关系曲线Fig.1 The relationship curve of drug in vitro release amount and time for the AZM miciospheres

从图1可以看出，阿奇霉素微球初期具有明显的突释行为，随着时间的延长，释药速度趋缓且几乎接近匀速。这是因为：（1）由于与水接触面积较大，阿奇霉素微球表面的药物首先释放，因而初期的释药量较大；（2）表面药物快速进入溶液后，随着内部聚乳酸不断的缓慢降解，水分子逐渐渗入，使药物不断溶解并缓慢地释放，因而后期释药慢且均匀。表明，纳米四氧化三铁的加入使聚乳酸对阿奇霉素的包覆效果增强，阿奇霉素微球的释药时间延长，药效温和而持久。

3 结论

采用乳化－溶剂挥发法，以可生物降解材料聚乳酸为载体，在其中加入医药级阿奇霉素和一定量纳米四氧化三铁制备聚乳酸／纳米四氧化三铁载阿奇霉素缓释微球，该微球具有明显的药物缓释作用，释药时间长，药效缓和而持久。

［1］王佩，李玉珍.新大环内酯类抗生素——阿奇霉素［J］.中国新药杂志，1996，5（3）：180－183.

［2］Langer R，Cleland L L，Hanes J.New advances in microspherebased single－dose vaccines［J］.Advanced Drug Delivery Reviews，1998，28（1）：97－119.

［3］杨晓春，张强，吴霖.我国药剂学靶向制剂研究的基本思路［J］.中国药学杂志，2001，36（12）：795－799.

［4］陈爱萍，徐榕青.中药靶向制剂研究现状［J］.海峡药学，2005，17（1）：8－10.

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［6］李岩，孙殿甲，毕殿洲.聚乳酸、聚乳酸乙醇酸共聚物微球的制备及影响其质量因素的研究进展［J］.国外医学（药学分册），2001，28（3）：164－166.

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