六堡茶对小鼠免疫功能的影响

2013-12-29 00:00:00邓聿胤黄宇声刘冠萍张栩颜饶伟源
云南中医中药杂志 2013年2期

摘要:目的:观察六堡茶对小鼠免疫功能的影响。方法:采用正常小鼠免疫器官测定法、碳粒廓清法和自然杀伤(natural killer,NK)细胞活性测定。结果:六堡茶可明显增加小鼠单核—巨噬细胞的吞噬指数、提高NK细胞活性,但对小鼠的胸腺、脾脏指数无明显影响。结论:六堡茶具有增强小鼠非特异性免疫功能的作用。

关键词:六堡茶;自然杀伤细胞;吞噬指数

中图分类号:R967文献标识码:A

文章编号:1007-2349(2013)02-0050-02

六堡茶以原产于广西梧州市苍梧县六堡乡而得名,生产历史悠久,远在唐代已有生产,属我国特有的茶类—黑茶;六堡茶以红、浓、陈、醇四绝著称,具有清暑祛湿、明目健心、帮助消化、减肥除腻、利尿解毒等功效[1],成人服用量是一次3g,一日3次。本文主要探讨六堡茶对正常小鼠免疫功能的影响。

1材料

11动物健康KM小鼠160只,体重18~22 g,雌雄兼用,广西医科大学实验动物中心提供(许可证号:SCXK桂2009-0002)。

12药品与试剂六堡茶水提物,由研究者自行提取,性状为棕褐色浸膏(每毫升相当于药材187 g)。临用时以蒸馏水配成相应浓度使用。小牛血清,由美国Hyclone公司生产;RPMI l640,由美国Gibco公司生产;其他试剂均为国产分析纯。

13仪器722型分光光度计(上海分析仪器厂);二氧化碳培养箱(美国Queue公司);超净工作台(上海浦东跃欣科学仪器厂);自动酶标仪(美国Bio-Rad公司)。

2方法

21小鼠免疫器官系数测定[2]将小鼠随机分为4组:正常对照组、六堡茶低剂量组(375 g/kg)、六堡茶中剂量组(75 g/kg)、六堡茶高剂量组(15 g/kg),每组10只。除正常对照组外,各组每天ig六堡茶1次,给药体积20 mL/kg,正常对照组ig等体积的蒸馏水,连续30 d。每周称体重1次,根据体重调整给药量。末次给药后次日,小鼠称重,颈椎脱臼处死,取胸腺、脾脏称湿重并计算胸腺和脾脏指数,胸腺或脾脏指数=胸腺或脾重(mg)/体重(g)。

22小鼠碳粒廓清实验[3~4]分组及给药同21。于尾静脉注射1:3稀释的印度墨汁,立即计时,于注入墨汁后2、10 min从眼内眦静脉采血20 μL,加入2 mL 01%Na2CO3溶液中,在600 nm波长处测光密度OD值。将小鼠处死,取肝脏和脾脏称质量,按文献方法计算吞噬指数α。

23NK细胞活性测定[5]分组及给药同21。连续30d后,颈椎脱臼处死,无菌取脾,制备脾细胞悬液,用乳酸脱氢酶法测定NK细胞活性。

NK细胞活性(%)=(反应孔OD-自然释放孔OD)/(最大释放孔OD-自然释放孔OD)×100%

24统计学处理采用SPSS130软件对实验数据进行单因素方差分析,各项数据均以(Ax-G ±s )表示。

3结果

31六堡茶对小鼠免疫器官系数的影响由表1可见,各剂量组小鼠的胸腺和脾脏指数与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>005),表明六堡茶对小鼠免疫器官的重量无明显影响。

32六堡茶对小鼠碳粒廓清能力的影响 由表2见,六堡茶中、高剂量能明显增加小鼠的吞噬指数(与正常对照组比较(P<005),低剂量组差异无统计学意义(与正常对照组比较(P>005),表明六堡茶具有促进小鼠的单核—巨噬细胞碳粒廓清作用。

33六堡茶对小鼠NK细胞活性的影响 表3结果显示,六堡茶高剂量组小鼠NK细胞活性明显升高(与正常对照组比较,[FL)][SD1,1][FQ(20。175mm,X,DY-W][SQ+1mm][CD=175mm][FL(K8mm]P<005),中、低剂量组差异无统计学意义(与正常对照组比较,P>005)。

4讨论

六堡茶以原产于广西梧州市苍梧县六堡乡而得名,生产历史悠久,属我国特有的茶类—黑茶,目前有关六堡茶对免疫功能的影响研究较少。单核巨噬细胞系统是机体重要的防御系统,它具有强大而迅速的吞噬、廓清异物颗粒以及清除机体内某些有害物质。碳粒廓清法测定单核巨噬细胞功能是典型的一种观察免疫系统功能的方法[6]。实验结果显示,六堡茶能明显增加小鼠单核—巨噬细胞的吞噬指数,说明六堡茶能增强小鼠的非特异性免疫功能。NK细胞存在于机体的外周血、脾脏、淋巴结和骨髓细胞中,是一类无需抗原致敏,也不依赖抗体存在,对肿瘤细胞和病毒感染细胞具有天然杀伤作用的淋巴细胞。NK细胞活性可反映机体的非特异性免疫功能状况[3]。本实验结果表明,与正常对照组比较,六堡茶高剂量组小鼠的NK细胞活性明显升高,说明六堡茶能增强机体的非特异性免疫功能。

参考文献:

[1]杨锦泉广西特产—六堡茶[J].茶业通报,1999,21(4):31

[2]孙晶,徐俭木脂素对小鼠免疫功能的影响[J].哈尔滨医科大学学报,2010,44(5):467~470

[3]卢连华,周景洋,颜燕,等海参肽对小鼠免疫调节及抗疲劳能力的影响[J].山东医药,2009,49(25):35~37

[4]刘宝剑,郭延生,曲亚玲,等红车轴草总黄酮对小鼠免疫功能的影响[J].安徽农业科学,2009,37(33):16410~16411

[5]宋柏捷,朱孝娟,魏丽娜灵芝孢子粉对小鼠的免疫调节及抑瘤作用研究[J].哈尔滨医科大学学报,2010,44(5):464~466

[6]谢莹,陈全斌,罗达伟,等高纯度甜茶苷抗疲劳及免疫调节功能研究[J].时珍国医国药,2010,21(6):1421~1422