当归补血汤对小鼠造血功能和生长性能的影响

2013-12-08 02:44詹素琼李金良袁定胜李旭廷
四川畜牧兽医 2013年1期
关键词:血液学屏风环磷酰胺

聂 健,詹素琼,梁 歌,李金良,袁定胜,李旭廷

(四川省畜牧科学研究院兽药研究所,四川 成都 610066)

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验动物 6周龄昆明小鼠80只,体重19~21g,雌性,购自成都某生物科技有限公司。

1.1.2 药品 注射用环磷酰胺(Cy),规格:0.2g/支,通化某制药有限公司生产,批号:100101;玉屏风口服液,规格:10 mL/支,广州某药业股份有限公司生产,批号:100302;黄芪多糖提取物,规格:95.5%黄芪多糖,由四川某动物药业有限责任公司提供。

当归补血汤制备:黄芪75g、当归15g,采用传统水煎法制备:蒸馏水预先浸泡1h,加热煎煮2次,第一次保持微沸30min,滤出药液;药渣加温水再煮沸,仍保持微沸30min,滤出药液;合并2次滤液,小火浓缩至生药含量为1g/mL。

1.2 方法

1.2.1 试验小鼠的分组与处理 80只小鼠空腹称重,随机分为8组,每组10只。第1至4组为正常组,即第1组不作任何处理,作为空白对照组,第2至4组分别给予黄芪多糖(2组)、当归补血汤(3组)和玉屏风(4组);第5至8组为免疫抑制组,即第5组只注射Cy不给予药物,作为环磷酰胺对照组,第6至8组在注射Cy的同时分别给予黄芪多糖(6组)、当归补血汤(7组)和玉屏风(8组)进行处理。从试验的第1d起,第6至8组小鼠以75mg/kg的剂量腹腔注射Cy,隔日一次,连续注射3次;第1至4组同时注射等量生理盐水。然后对小鼠灌胃给药,0.5mL/只,对照组给予等量的蒸馏水,连续10d。

1.2.2 样品的采集与检测 各组小鼠均于试验的第11 d以颈部脱臼处死,快速采血,肝素抗凝,检测血常规:白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、平均血红蛋白含量(HGB)、血小板计数(PLT)。取脾脏和肝脏,观察病理变化,计算肝、脾指数。

1.2.3 数据处理 所有试验数据采用SPSS软件进行分析处理,LSD比较差异显著性,所有数据用“平均值±标准差”表示,P<0.05表示差异显著。

2 结果

2.1 药物对小鼠精神状态的影响 所有灌胃小鼠,包括灌生理盐水的空白对照小鼠,在注射和灌药开始的3 d内,饮水量和采食量均有减少,3d以后逐步恢复到正常水平。所有试验组小鼠在整个试验期内未见明显的精神异常。

2.2 中药对小鼠血液学指标的影响 各组小鼠的血常规结果见表1。从表1可看出,第1至4组的WBC、RBC、HGB、PLT 值差异不显著(P>0.05),表明正常小鼠服用黄芪多糖、当归补血汤和玉屏风口服液对血液学指标没有显著影响。第6至8组小鼠腹腔注射Cy后,血液学指标WBC、RBC、HGB、PLT与空白对照组相比显著下降,差异显著(P<0.05),表明 Cy注射后可导致 WBC、RBC、HGB、PLT指标显著降低。第6组、8组的WBC、HGB指标与环磷酰胺对照组(第5组)相比,差异不显著(P>0.05),但对WBC指标有一定的提升。第7组的WBC、HGB 指标与第 5组相比升高显著(P<0.05),与第1组相比差异显著(P<0.05)。表明当归补血汤对Cy注射小组的WBC和HGB指标有较好的恢复作用,但不能恢复到正常水平。第6、7、8组的RBC指标与第5组相比显著升高(P<0.05),PLT 指标差异不显著(P>0.05)。

表1 当归补血汤对小鼠血液学指标的影响(n=10)

2.3 中药方剂对小鼠体重及肝、脾指数的影响 由表2可知,黄芪多糖、当归补血汤和玉屏风口服液对正常小鼠和免疫抑制小鼠均无明显的促生长作用(P>0.05),各免疫抑制组与各正常组相比,试验末体重明显降低,差异显著(P<0.05)。第6、7、8组与第5组的增重率相比差异显著(P<0.05)。表明黄芪多糖、当归补血汤和玉屏风口服液对Cy造成的小鼠增重减少有较显著的拮抗作用,但不能恢复到正常水平。各正常组与第5组的脾脏指数、肝脏指数相比差异显著(P<0.05),各正常组之间差异不显著(P>0.05),表明Cy可引起小鼠的肝、脾指数异常,而3个受试中药对正常小鼠的肝、脾指数无明显影响。6、8组的脾脏指数与5组相比,差异不显著(P>0.05),7组与5组相比,差异显著(P<0.05),与1组比较差异不显著(P>0.05)。表明当归补血汤可使Cy造成的小鼠脾脏萎缩恢复到正常水平。6、7、8组的肝脏指数与5组相比,差异不显著(P>0.05),表明3个受试中药对Cy造成的小鼠肝脏肿大无恢复作用。

表2 当归补血汤对试验小鼠体重和肝、脾指数的影响(n=10)

3 结论

3.1 黄芪多糖、当归补血汤和玉屏风口服液对正常小鼠的血液学指标(WBC、RBC、HGB、PLT)及肝、脾指数没有显著影响,但对环磷酰胺造模小鼠的血液学指标有一定程度的恢复作用,其中当归补血汤效果优于黄芪多糖和玉屏风口服液,但均未能使WBC、RBC、HGB、PLT值回到正常水平。

3.2 黄芪多糖、当归补血汤和玉屏风口服液对环磷酰胺造成的小鼠增重减少和脾脏萎缩有明显的拮抗作用;当归补血汤可将脾脏的损伤恢复到正常水平,但黄芪多糖、当归补血汤和玉屏风口服液均不能将体重的增加恢复到正常水平,且对肝脏肿大无明显的拮抗作用。

3.3 当归补血汤作为传统治疗“气血两虚”的经典中药方剂,在临床中有着丰富的应用成果。给予当归补血汤处理后,可明显提高造模小鼠的白细胞、红细胞生成,提高血红蛋白含量,与当归补血汤在其他实验动物体内的研究结果相同。对生长性能的影响方面,当归补血汤对环磷酰胺所致小鼠的增重率与环磷酰胺空白对照组相比,有显著的提高(P<0.05),但不能恢复到正常水平,符合我们之前报道的在家兔方面的研究结果。

4.3 中兽医学认为,脾为“后天之本”,是机体气血生化之源,肝藏血主疏泄,二者均是水谷消化吸收的主要器官。病理损伤必然会造成水谷得不到充分的消化吸收和运输,血液化生没有来源,就会出现精神短少、贫血,影响发育。本试验观察到当归补血汤对免疫抑制小鼠的脾脏损害有较好的恢复作用,从病理的角度印证了中医学的这一理论。

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