消肿喷剂对急性软组织损伤大鼠血清PGE2、IL－6影响的实验研究＊

牛淑亮 刘凤霞 王水泉 廖 静 王海龙 新疆医科大学 （乌鲁木齐830011）

消肿喷剂为苏栀消肿膏改良制剂，主要有苏木、栀子、姜黄、延胡索、制乳香、制没药、三七、血竭、冰片等多味中药组成，具有明显活血祛瘀、舒筋活络、消肿止痛作用。临床应用治疗跌打损伤，各种骨折后软组织肿胀、疼痛1583例，效果良好。为探讨其促进急性软组织损伤修复的作用机理，我们进行了消肿喷剂对急性软组织损伤大鼠血清PGE 2、IL－6影响的实验研究。

1 实验材料 1.1 实验动物 健康SD大白鼠72只，雌雄各半，8周龄，体重216.3±11.4g（新疆医科大学大学实验动物中心提供）。

1.2 实验用药 消肿喷剂（苏木、栀子、姜黄、延胡索、制乳香、制没药、三七、血竭混匀，浸泡于60%酒精中，每天搅拌1次，10后过滤，取滤液，再加冰片，溶解后分装）。对照药物选用正红花油（成都东洋百信制药有限公司生产，批准文号：国药准字Z20033087）。

1.3 实验仪器 软组织打击器（自制），Labsystems Multiskan MS352型酶标仪，TG16W微量高速离心机，GNP－9080型隔水式恒温培养箱，ELISA Kit for Rat PGE2（美国RD公司进口分装，生产批号：20120610）、ELISA Kit for Rat IL－6（美国RD公司进口分装，生产批号：20120615）

2 实验方法 2.1 造模与分组 造模方法参照文献［1］略加改造：SD大白鼠54只，实验前1天禁水禁食，以8%硫化钠溶液右后肢脱毛。实验前，水合氯醛腹腔注射麻醉（0.1mL／100g），麻醉成功后将大鼠固定在自制打击器上，将200g重的砝码通过与砝码直径相当的塑料管中自20cm高处垂直自由落体冲击大鼠大腿外侧肌肉丰厚处，连续打击2次，打击面积约1×2cm2，造成打击局部出现散在出血点，皮下瘀肿创面及肿胀的非开放性软组织损伤模型。排除皮肤破损或骨折者，并已经解剖及组织学验证成功率为100%。

造模成功的大鼠按随机数字表法分为将大鼠随机等分为3组，各18只。模型组，正红花油药物对照组和消肿喷剂药物治疗组。18只未打击大鼠为空白组。模型组、空白组不予给药，对照组与治疗组每天早晚各外拭给药一次，连续给药5d。各组均给予正常饲食。

2.2 取材 造模后1，3，5d二次给药前，分3批处死大鼠。水合氯醛腹腔注射麻醉（0.1mL／100g），腹主动脉采血，血液室温静置5min，2500r／min离心5min，收集上清，保存、备用。然后以打击部位为中心，沿损伤处切取肌肉组织，10%甲醛溶液固定，备用。

2.3 指标检测与方法 2.3.1 损伤局部组织，石蜡包埋，切片，染色，镜下进行组织学观察，并计数嗜中性粒细胞及浸润情况。

2.3.2 严格按试剂盒操作说明测定血清PGE2、IL－6含量。

4 实验结果 4.1 组织学观察 治疗后1d，模型组肌纤维水肿，部分肌纤维碎裂，肌束间距增宽，创伤病灶中嗜中性粒细胞浸润密度高。红花油组与消肿喷剂组镜下观察结果与模型组类似，仅红细胞瘀积，肌纤维水肿及微血管扩张程度稍轻。消肿喷剂组较模型组，嗜中性粒细胞明显减少（P＜0.05），消肿喷剂组与红花油组无显著差异性（P＞0.05）。

治疗后3d，模型组见广泛充血水肿，肌核增生，较多中性白细胞浸润。红花油组与消肿喷剂组充血、水肿减轻，肌间质及血管周围可见少量中性细胞浸润。

治疗后第5d，模型组部分肌纤维红染，偶见肌纤维排列紊乱、红细胞瘀积现象，细胞呈弥漫性浸润。红花油组与消肿喷剂组见少量充血水肿，细胞浸润以及肌浆碎裂不明显，肌纤维形态大致正常。结果见表1。

表1 各组大鼠治疗后不同时期创伤病灶中嗜中性粒细胞计数变化（±s，个／视野）

表1 各组大鼠治疗后不同时期创伤病灶中嗜中性粒细胞计数变化（±s，个／视野）

组别 第1d 第3d 第5d模型组43.22±10.05 14.56±11.22 7.35±3.13红花油组 32.08±16.41 6.67±3.01 2.30±0.76消肿喷剂组31.51±13.11 6.70±1.92 0.00

4.2 大鼠血清PGE2含量 各实验组血清PGE2含量峰值均出现在第3d，至第5d大幅降低。较空白组相比，造模各组均具有显著差异，P＜0.01。第1d、第3d、第5d，红花油组、消肿喷剂组较模型组均有差异性，P＜0.01或P＜0.05。结果见表2。

表2 各组大鼠治疗后不同时期血清PGE2含量（ng／L，±s）

表2 各组大鼠治疗后不同时期血清PGE2含量（ng／L，±s）

组别 第1d 第3d 第5d空白组6.91±2.07 － －模型组 181.67±29.51 190.32±33.40 135.83±12.04红花油组 134.00±41.62 147.41±23.09 104.63±13.75消肿喷剂组113.16±21.75 126.37±14.42 81.27±7.90

4.3 大鼠血清IL－6含量 各实验组血清IL－6含量峰值均出现在第3d，至第5d大幅降低。较空白组相比，造模各组均具有显著差异，P＜0.01。第1d、第3d、第5d，红花油组、消肿喷剂组较模型组均有差异性，P＜0.01或P＜0.05。结果见表3。

5 讨 论 急性软组织损伤是因皮肤以下骨骼之外的组织受外来应力作用且达到一定的强度，超过软组织承受负荷，造成的急性破坏和组织生理功能暂时紊乱而诱发的症状、损伤。气滞血瘀，筋脉阻滞是其主要病机，临床表现为肿、痛、功能障碍，病理表现为炎性介质的释放增加、损伤局部的炎症反应和微循环障碍。

表3 各组大鼠治疗后不同时期血清IL－6含量（pg／L，±s）

表3 各组大鼠治疗后不同时期血清IL－6含量（pg／L，±s）

组别 第1d 第3d 第5d空白组2.41±0.57 － －模型组 49.77±19.41 57.36±13.42 38.89±8.09红花油组 39.65±9.98 44.40±8.69 31.96±7.57消肿喷剂组30.96±7.57 36.59±6.11 21.44±3.09

IL－6主要由T、B细胞和单核巨噬细胞分泌的细胞因子，能促进中性粒细胞的活化、聚集，多在细胞受到 TNF－α、IL－1β刺激后产生，血清中IL－6水平可反应组织损伤程度［2］。PGE2是重要的炎症介质，能够降低痛阈，激活外周感觉神经末梢EP受体，敏化外周痛觉感受器［3］，其持久广泛的扩张血管、致痛和免疫功能的影响，在创伤中起重要作用。

抑制无菌性炎性渗出，改善微循环，促进水肿吸收，减轻局部损伤，有利于创伤组织的修复愈合［4，5］。消肿喷剂所含药物苏木可以减少细胞培养上清液中IL－2的生成［6］。栀子提取物京尼平苷具有较好的治疗软组织损伤的作用。姜黄素对IL－8、MIP－1α、MCP－1、IL－1b及 TNF－α有抑制作用。乳香乙醇提取物可抑制大鼠体内的多形核白细胞浸润。诸药合用可改善急性软组织损伤动物模型症状、症候，加速伤肢组织修复，抑制损伤局部炎性细胞因子IL－1β表达［7］。

本研究结果表明消肿喷剂能够抑制急性软组织损伤大鼠血清PGE2和IL－6表达，且在治疗1d，3d，5d后与模型组比较具有显著差异性。消肿喷剂对损伤局部炎症反应具有抑制作用，从而发挥发挥对急性软组织损伤动物模型有治疗作用。

［1］周国林，姚全胜，潘玉英.一种动物软组织损伤的实验方法［J］.中国药理学通报，1991，7（5）：396－398.

［2］张 剑，碧 清.创伤性休克患者血清TNF－α、IL变化的意义［J］.浙江中西医结合杂志，2008，18（2）：103－104.

［3］OmoteK，Kawamata T，NakayamaY，et al.Effects ofa novel selective ag－onist for prostaglandinreceptor subtype EP4 on hyperalgesia and inflam－mation inmonoarthriticmodel［J］.Anesthesiology，2002，9（7）：170－176.

［4］陈迎春，高绍芳，邸淑珍.舒筋涂剂治疗急性软组织损伤的实验研究［J］.陕西中医，2009，30（4）：490－491.

［5］张根印，牛淑亮，杨 宁.苏栀消肿膏对急性软组织损伤模型大鼠血液流变学的影响［J］.陕西中医学院学报，2008，31（3）：49－50.

［6］姚全胜，周国林.栀子抗炎、治疗软组织损伤有效部位的筛选研究［J］.中国中药杂志，1991，16（8）：486－488.

［7］牛淑亮，刘凤霞，王海龙，等.消肿喷剂促进急性软组织损伤大鼠损伤修复的实验研究［J］.陕西中医，2011，32（7）：918－920.