弥漫性浸润型星形细胞瘤中单丝氨酸蛋白激酶1、基质金属蛋白酶-14和血管内皮生长因子的表达及意义

宋 军 王颖翠 谢宗凯 (即墨市人民医院神经内二科，山东 即墨 266200)

弥漫性浸润型星形细胞瘤病变进展中常出现蛋白的表达异常，对促进病变有重要价值。单丝氨酸蛋白激酶(LIMK)1、基质金属蛋白酶(MMP)-14在肿瘤中高表达参与肿瘤的进展〔1～3〕，而血管内皮生长因子(VEGF)通过促进肿瘤血管的新生进而促进肿瘤的发展〔4〕。本实验分析弥漫性浸润型星形细胞瘤术后组织中LIMK1、MMP-14和VEGF蛋白的表达及意义。

1 材料与方法

1.1 一般资料 2009年1月至2012年12月我院确诊为弥漫性浸润型星形细胞瘤的患者95例作为观察组，术后立即取材，并置于中性甲醛溶液中固定。切片均由病理医师阅片，分型及分级均符合WHO中的诊断标准。男50例，女45例，年龄57～79(平均67.2)岁。分级:Ⅰ级22例，Ⅱ级26例，Ⅲ级28例，Ⅳ级19例。收集非肿瘤病变切除的正常的脑组织60例作为对照组，取材和固定方法同上，其中男30例，女30例，年龄56～78(平均67.9)岁。

1.2 LIMK1、MMP-14和VEGF的检测 应用免疫组化SP法检测，应用DAB染色，按试剂说明进行操作，严格质量控制。

1.3 结果评价 LIMK1阳性部位为细胞质和(或)细胞膜，MMP-14和VEGF阳性部位为细胞质。计数5个阳性细胞集中的区域，取平均值。以阳性细胞≥25%为阳性，以阳性细胞＜10%为阴性，计算阳性率。

1.4 统计学方法 应用SAS6.12软件进行χ2检验、线性相关性分析。

2 结果

2.1 两组中LIMK1、MMP-14和VEGF蛋白表达的比较 观察组中LIMK1、MMP-14和VEGF表达的阳性率明显高于对照组(P ＜0.000 1)，见表1。

表1 两组LIMK1、MMP-14和VEGF蛋白阳性表达的比较〔n(%)〕

2.2 观察组中LIMK1、MMP-14和VEGF在不同临床病理特征中的表达 观察组中LIMK1、MMP-14和VEGF的表达与肿瘤最大直径、分级、有无坏死及Ki67的表达密切相关(P＜0.05)，见表2。

2.3 观察组中LIMK1、MMP-14和VEGF表达阳性率的相关性观察组中 LIMK1和 VEGF(r=0.46，P=0.029 1)、MMP-14和VEGF(r=0.43，P=0.021 7)的表达均具有正相关性。

表2 观察组中LIMK1、MMP-14和VEGF表达的阳性率与临床病理特征的关系〔n(%)〕

3 讨论

VEGF在肿瘤形成过程中对基质血管的生成作用强，在VEGF高表达和分泌的情况下，一是通过肿瘤周围正常的脑组织中的毛细血管出芽形成，另一种是通过平滑肌细胞/血管周细胞增生和聚集进行血管重塑〔5〕。MMP-14是MMPs中的经典成员，降解细胞外基质是其主要作用，但是近年来学者研究发现MMP-14可以有效地促进血管生成，尤其是对VEGF介导的血管生成作用〔6〕。LIMK1在发挥作用时可以产生两种信使RNA:一种编码全长LIMK1蛋白、另一种因删除61个碱基而使编码蛋白缺乏羟基末端激酶域的蛋白，此时通过作用于C末端的激酶结构域而负性调节激酶活性，同时介导蛋白质的相互作用，参与决定细胞生长调节及细胞骨架的重组等〔7～9〕。也有学者认为当LIMK1活化后，抑制了纤丝状肌动蛋白的聚合，使肌动蛋白的稳定性受到了影响，此时对细胞运动、分裂均有促进作用。贺晓燕等〔10，11〕认为LIMK-1的高表达与肿瘤的微脉管生成相关。本实验结果提示LIMK1、MMP-14和VEGF在肿瘤发生中发挥重要促进作用。3种蛋白参与肿瘤的生长、增殖及浸润。由于分级、坏死及增殖均是判断肿瘤生物学行为、预后及病理诊断的依据，因此3种蛋白的表达不仅可以判断肿瘤的生物学行为和预后，也可以为病理诊断提供客观指标。由于Ki67具有有效标记细胞增殖的特点，也提示 LIMK1、MMP-14和VEGF对细胞增殖有重要促进作用。相关性分析显示观察组中LIMK1和MMP-14均与VEGF有相关性，提示LIMK1和MMP-14高表达时可以促进VEGF表达，也提示LIMK1和MMP-14对血管生成的作用是通过调节VEGF高表达实现的〔12，13〕。同时LIMK1和MMP-14可以促进细胞肌动蛋白丝聚合，使肿瘤细胞具有更强的周围组织浸润的能力。

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