视黄醇结合蛋白-4与糖尿病肾脏病变的相关性研究

雷琳 郭静霞 任巧华 王欣

视黄醇结合蛋白4(retinol binding protein，RBP-4)是一种小分子蛋白，分子量为21 kDa。其主要是由肝细胞合成，并也表达于在骨骼肌和脂肪组织，RBP-4通过视黄醇和运甲状腺蛋白从而送到组织中去。研究发现RBP-4和肥胖症以及2型糖尿病有着密切的关系，RBP-4在糖尿患者体内升高，伴有微量白蛋白尿的糖尿病患者其水平更高，血浆RBP-4的浓度受肾脏疾病影响［1］。糖尿病肾病患者早期就出现肾脏损害，因此血液RBP-4是诊断早期糖尿病肾病的一个较敏感的指标［2，3］。本研究通过对糖尿病患者血尿RBP-4含量来进一步研究其对于肾脏疾病的早期诊断和病情评估的重要意义。

1 资料与方法

1．1 一般资料 选取我院2010年6月至2011年10月符合纳入标准的糖尿病肾病患者(A组)60例，男30例，女30例;年龄52～75岁，平均年龄(63±12)岁;糖尿病无肾病患者(B组)60例，男36例，女24例;年龄48～77岁，平均年龄(63±14)岁;健康无病者(C组)60例，男29例，女31例;年龄49～78岁，平均年龄(64±14)岁。3组间年龄分配，性别构成基本匹配，具有可比性。

1．2 入选与排除标准

1．2．1 入选标准:2组糖尿病患者入选标准按1997年美国糖尿病协会糖尿病诊断标准:有糖尿病症状，并且1 d中任何时候血浆葡萄糖浓度≥11．1 mmol/L，或空腹至少8 h后血浆葡萄糖浓度≥7．0 mmol/L，或OGTT 2 h 血糖浓度≥11．1 mmol/L，糖尿病肾病以24 h尿白蛋白排泄率分成糖尿病无肾病组(24 h尿白蛋白排泄率＜200 μg/min)，糖尿病肾病组(24 h尿白蛋白排泄率≥200 μg/min)。

1．2．2 排除标准:糖尿病患者无糖尿病酮症酸中毒、高渗性昏迷等急性并发症，无肝脏疾患、肺间质纤维化、胶原性疾病及肿瘤。

1．3 方法 受试者均清晨空腹抽取静脉血液5 ml，37℃30 min后离心(3 000 r/min)分离血清用于血液RBP-4的测定。留24 h尿液于干净容器中，混匀后准确记录总尿量(加10 ml甲苯防腐)，各取1 ml测定尿蛋白排泄(UAE)，并计算尿蛋白排泄率(UAER)，同时留取晨尿，离心取上清液，用于尿液RBP-4的测定。血清以及尿液中RBP-4均采用免疫透射比浊法进行测定。仪器为日立7600全自动生化分析仪。试剂盒采用人活性结合型RBP-4酶联试剂盒。血RBP-4参考值:(28±8)mg/L。

1．4统计学分析应用SPSS 15．0统计软件，计量资料以±s表示，采用t检验或秩和检验，多组间比较采用单因素方差分析(F)，P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结果

24 h UAER，B组与C组差异无统计学意义(P＞0．05)，而A组则明显高于B组和C组，差异有统计学意义(P＜0．05)。糖尿病患者RBP-4都可升高，B组与C组比较升高，差异有统计学意义(P＜0．05);A组与其他2组比较，差异有统计学意义(P ＜0．05)。见表1。

表1 3组血液、尿液中RBP-4含量24 h UAER比较

3 讨论

本研究认为在糖尿病肾病中，血清及尿RBP-4的浓度有明显的提高。与对照组相比，糖尿病肾病的RBP-4的浓度是明显提升的。RBP-4存在于正常人体内，在肝脏合成，肾脏代谢排出，其生理功能是维生素A的重要的载体蛋白，起到转载、运输等作用。在肝细胞外，RBP-4主要表达于骨骼肌和脂肪组织中。肾脏在维护整个人体内环境的视黄醇的平衡中起着至关重要的作用。它是通过肾小球滤过和随后将RBP-4重吸收到邻近小管的方式来调节的。正常情况下，原尿中的 RBP-4约99．98%在肾近曲小管被重吸收，尿中 RBP-4的排出量取决于肾小管的重吸收功能。当肾小球滤过膜或肾小管功能受损时，尿中RBP-4水平显著增加，衰减的GFR会引起全身体循环中RBP-4的聚积。一个RBP-4复合物一旦和运甲状腺结合蛋白在微环境中结合成四聚体，就会减少肾脏对RBP-4的清除。在糖尿病肾病早期，尿RBP-4排泄增加先于微白蛋白尿出现，被认为是反映早期肾损害的标志。

糖尿病肾病患者较无肾脏损伤的糖尿病患者，其血清RBP-4水平明显升高，提示RBP-4可能参与糖尿病肾病的进展过程中，糖尿病患者由于内分泌、渗透压等长期失衡，肾小球滤过屏障以及肾小管的分解功能均受到损伤。肾小球的滤过功能下降，血中RBP-4相对升高［4，5］，相比其他检测方法血RBP-4更加稳定稳定，比起易分解的尿微球蛋白等指标，其更为可靠。作为灵敏检测肾脏损伤的手段，其在肝功正常的前提下是理想的生化参考指标。但成本相对高于传统肾功检测指标，限制了其临床推广应用。联合检测应用于临床可望在相对成本稳定的基础上代替部分肾活检等有创操作。关于RBP-4的研究进行了多层次多领域的基础及临床实践［6，7］。

总之，本研究显示2型糖尿病患者血尿RBP-4水平与进展性的肾脏损伤有密切关系，可能成为其诊断及治疗的一个特异性标志物。

1 Raila J，Henze A，Spranger J，et al．Microalbuminuria is a major determinant of elevated plasma retinol-binding protein4 in type 2 diabetic patients．Kidney Int，2007，72:505-511．

2 Kim SH，Choi HJ，Im JA．Retinol-binding protein 4 responses during an oral glucose tolerance testing in women with gestational diabetes mellitus．Clin Chim Acta，2008，391:123-125．

3 Graham TE，Yang Q，Blüher M，et al．Retinol-binding protein 4 and insulin resistance in lean，obese，and diabetic subjects．N Engl J Med，2006，354:255-263．

4 Choy M，Younb S，Lee H，et al．Plasma rednol-binding protein 24 eoneentraions are elevated in human subjects with impaired glucose tolerance and type 2 diabetes．Diabetes Care，2006，29:2457-2461．

5 Jia W，Wu H，Bao Y，et al．Association of serum retinol-binding protein 4 and visceral adiposity in chinese subjects with and without type 2 diabetes．J Clin Endocrinol Metab，2007，92:3224-3229．

6 Wu H，Jia W，Bao Y，et al．Serum retinol binding protein 4 and nonalcoholic fatty liver disease in patients with type 2 diabetes mellitus．Diabetes Res Clin Pratt，2008，79:185-190．

7 Ziegeflmeier M，Kratzsch JU，Bachmann A，et al．Serum levels of adipokine retinol-binding protein-4 in relation to renal function．Diabetes Care，2007，30:2588-2592．