鼻咽癌表皮生长因子受体表达与肿瘤残留、疗效的关系

蓝玉宏 白力 杨清绪 江晓聪

鼻咽癌表皮生长因子受体表达与肿瘤残留、疗效的关系

蓝玉宏 白力 杨清绪 江晓聪

目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)表达与鼻咽癌患者治疗后肿瘤残留情况的关系及疗效预测价值。方法260例鼻咽癌患者应用免疫组织化学技术检测EGFR在癌组织中的表达，并分析肿瘤残留及5年生存情况。结果EGFR在260例鼻咽癌中阳性表达197例(75.8%)，阴性表达63例(24.2%)；EGFR阳性组和阴性组放射治疗后肿瘤残留率分别为24.9%、14.3% (χ2=3.61，P<0.05)；两组5年总生存率(OS)、无瘤生存率(DFS)、无区域复发生存率(LRFS)、无远处转移生存率(DMFS)分别为68.2%、63.1%，67.2%、64.8%和88.6%、76.4%、87.1%、81.3%(χ2=4.12，χ2=4.01，χ2=3.97，χ2=3.85，P<0.05)；有残留者远处转移率67.2%明显高于无残留者17.8%(χ2=7.48，P<0.05)；在多因素分析中，EGFR阳性表达与总生存率(OS) 和无病生存率(DFS)显著相关(r=6.725，P<0.05)；结论EGFR在鼻咽癌中表达率较高，阳性表达与放疗后肿瘤残留存在相关性，并呈现不良预后的趋势，有利于预测鼻咽癌患者放疗前放射敏感性，有助于选择合适患者优化个体化治疗方案。

鼻咽癌；表皮生长因子受体；肿瘤残留；预后

鼻咽癌是我国南方常见的头颈部恶性肿瘤，发病率高达15～25/10万，放射治疗是鼻咽癌的根治性治疗手段，可取得较好疗效。但部分患者放疗后有肿瘤残留，其预后差。因此，探索可靠的放射敏感性预测指标或预后指标对于指导个体化治疗具有重要意义。表皮生长因子受体(Epidermal growth Factor Receptor， EGFR)是原癌基因c-erbB-1(HER-1)的表达产物[1]，为相对分子质量为170 KD的单链多肽，与许多正常细胞的生长及肿瘤的发生和增殖有关。近年来在肺癌、乳腺癌、甲状腺癌等研究中发现EGFR的表达与肿瘤大小、分化程度、有无淋巴结转移及预后有关[2-4]。笔者对260例鼻咽癌(NPC)应用免疫组织化学技术检测EGFR表达和放射治疗结束时复查鼻咽颈部MRI片加电子鼻咽镜观察肿瘤残留情况，并分析EGFR表达与肿瘤残留、预后的关系。

1 资料与方法

1.1一般资料 收集我院2005年8月至2006年12月鼻咽癌(NPC)患者260例(男153例，女107例)，年龄22～68岁，中位年龄44岁。其中低分化鳞癌119例、中分化鳞癌46例、高分化鳞癌31例、未分化癌25例、泡状核细胞癌23例、腺癌16例。按1992年福州分期，Ⅰ期21例，Ⅱ期53例(T2N0期8例，T1N1期21例，T2N1期24例)，Ⅲ期102例(T3N0期17例，T3N1期19例，T3N2期20例，T1N2期21例，T2N2期25例)，Ⅳ期84例(T4N0期6例，T4N1期7例，T4N2期10例，T4N3期8例，T1N3期6例，T2N3期29例，T3N3期18例)。

1.2治疗方法 260例患者均采用同期放化疗。放疗方案：直线加速器常规外照射；首先使用面颈联合野6 mV-X线照射，后改用小面颈野避开脊髓6 mV-X线照射，颈后淋巴引流区电子线照射，下颈锁骨上区单前野6 mV-X线垂直照射；鼻咽部原发灶和阳性淋巴结区DT 70～74 Gy/35～37次/7～8周，预防区DT 50～60 Gy/25～30次/5～6周。放疗开始一周内行第一疗程化疗，化疗方案：顺铂30 mg静脉滴注，d1-5，5-氟尿嘧啶750 mg静脉滴注，d1-5，每4周为1个疗程。放疗每周监测血常规，放疗4周后复查肝肾功能及血常规，若无化疗禁忌，则同期进行第2疗程化疗。肿瘤退缩以放射治疗结束时复查鼻咽颈部MRI片及电子鼻咽镜观察为准。

1.3实验方法主要试剂 兔抗人VEGFR-3多克隆抗体(RAB0522)、即用型免疫组织化学超敏SP试剂盒、DAB显色液、多聚赖氨酸防脱片剂和PBS缓冲液均购自福建Maxim公司。采用免疫组化SP法染色(SP9002试剂盒和DAB显色试剂盒均购自北京中山生物技术有限公司)，PBS作为一抗阴性对照。根据肿瘤细胞膜染色与否判断为阳性或阴性。

1.4结果判断 样本染色评分参照Form-witz评分方法。0分为阴性(-)， 1～4分弱阳性(+)， 5～8分阳性(++)， 9～12分强阳性(+++)。对每张切片中鼻咽癌组织进行评分。评分<5分病例归入为EGFR阴性表达组，评分≥5分病例归入为EGFR阳性表达组。

1.5统计学方法 使用SPSS 11.5统计软件，行χ2检验， Kaplan-Meier计算生存率，Log-Rank检验差异，多变量分析采用COX回归模型，以α=0.05作为显著性检验水平。生存时间从治疗开始计算。

2 结果

2.1EGFR表达与放射治疗后残留的关系 EGFR在260例鼻咽癌中阳性表达197例(75.8%)，阴性表达63例(24.2%)；放射治疗后肿瘤完全退缩202例(Ⅰ期21例，Ⅱ期46例，Ⅲ期74例，Ⅳ期61例)，有残留者58例(Ⅱ期7例，Ⅲ期28例，Ⅳ期23例)。其中单纯鼻咽残留23例，单纯颈部残留26例，鼻咽及颈部均有残留9例。EGFR阳性组和阴性组放射治疗后残留率有明显差异，分别为24.9%、14.3% (χ2=3.61，P<0.05)。肿瘤退缩以放射治疗结束时复查鼻咽颈部MRI片加电子鼻咽镜观察为准。见表1。

2.2EGFR表达与生存关系多因素分析 EGFR阳性组和阴性组5年总生存率(OS)、无瘤生存率(DFS)、无区域复发生存率(LRFS)、无远处转移生存率(DMFS)分别为68.2%、63.1%，67.2%、64.8%和88.6%、76.4%、87.1%、81.3%(χ2=4.12，χ2=4.01，χ2=3.97，χ2=3.85，P<0.05)；在多因素分析中，EGFR阳性表达与无病生存率(DFS)和总生存率(OS)显著相关(r=6.725，P<0.05)。

2.3残留灶大小与生存关系 结果表明，残留病灶越大生存率越低(P<0.01)。见表2。

表1 放射治疗后肿瘤残留情况(例，%)

表2 颈部残留灶大小对生存率的影响

2.4 肿瘤残留与远处转移关系 有残留者远处转移67.2%明显高于无残留者17.8%(χ2=7.48，P<0.05)， 见表3。

表3 肿瘤残留与远处转移比较(例，%)

3 讨论

鼻咽癌的有效治疗手段是以放射治疗为主的综合治疗，但局部失败仍是治疗失败的主要原因之一。由于肿瘤细胞异质性，不同个体对放射线敏感性不同，如何预测肿瘤细胞放射敏感性，指导个体化治疗，从而提高肿瘤局控率及生存率是目前研究热点之一。

表皮生长因子受体(EGFR) 为一种跨膜糖蛋白,属受体型酪氨酸蛋白激酶(RTK),它是一种具有酪氨酸酶活性的膜表面传感器，广泛分布于哺乳类动物的细胞膜上[5]。在许多实体肿瘤中存在EGFR 的异常表达或高表达，并与肿瘤细胞的增殖、血管生成、肿瘤侵袭、转移及细胞凋亡的抑制有关[6]。细胞实验证明EGFR可通过增加肿瘤病灶中S期细胞数量、提高细胞内的GSH水平等因素，从而降低放射敏感性[7]。有实验表明，将EGFR基因植入低表达细胞中会提高细胞对放射线的抗拒性[8]。表皮生长因子受体(EGFR) 会降低许多实体肿瘤细胞的放射敏感性在国内外已有较多报道[9，10]。

表皮生长因子受体(EGFR)在鼻咽癌中的表达率在29%～96%之间[11，12], 本文EGFR在260例鼻咽癌中阳性表达197例，表达率75.8%，发现鼻咽癌中EGFR表达与患者年龄、性别、总分期、T分期和N分期无关，与文献报道相似[13，14]。放射治疗后肿瘤退缩受多种因素影响，对每个患者无法从生物学角度上来正确判断肿瘤的退缩情况，所以临床医生常常将肿瘤的临床退缩与否作为判断放射治疗效果的指标。本文结果显示，EGFR阳性组和阴性组放射治疗后肿瘤残留率有明显差异，分别为24.9%、14.3% (χ2=3.61，P<0.05)，提示EGFR阳性表达与鼻咽癌放疗后残留存在相关性，对放疗后肿瘤残留有一定的预测价值。随访统计结果表明肿瘤残留灶越大则预后越差。本文中260例鼻咽癌进行亚组分析，EGFR阳性组有更差的5年DFS和DMFS。同步放化疗可增加放射的敏感性，提高肿瘤局部消退率，减少远处转移及提高无瘤生存率[15]。但放化疗的叠加作用加重了正常组织的放射性损伤[16]，生物治疗具有针对性强，疗效明显、副反应小的特点。本研究结果显示EGFR阳性表达与鼻咽癌放疗后残留存在相关性、有更差的5年DFS和DMFS，EGFR阳性表达有利于预测鼻咽癌患者放疗前放射敏感性，有助于选择合适患者优化个体化治疗方案。若经济允许，对于EGFR阳性表达鼻咽癌患者可考虑配合使用针对EGFR的生物靶向药物治疗，以减少肿瘤残留、提高局控率，改善患者生存。

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Relationshipbetwwenepidermalgrowthfactorexpress、tumorresidualandcurativeeffectinpatientswithnasopharyngealcancer(NPC)

LANYu-hong,BAILi,YANGQing-xu,etal.

DepartmentofcancerradiotherapyCentral,Departmentofpathology，Huizhou516001，China

ObjectiveTo investigate relationship betwwen epidermal growth factor receptor (EGFR) expression、tumor residual and its prognostic value to curative effect in patients with nasopharyngeal cancer(NPC) treated with radiochemotherapy.Methods260 patients with NPC were examined for EGFR expression by immunohisto-chemistry Analysis,tumor residual and survival of patients in 5-year.ResultsIn 260 cases in NPC,expression of EGFR of positive and negative were 197 cases(75.8%) and 63 cases(24.2%);The rate of tumor residual in patients with positive EGFR were 24.9% and negative EGFR were 14.3% (χ2=3.61，P<0.05).The rate of overall survival(OS)、disease-free survival(DFS)、locoregional relapse-free survival(LRFS)and distant metastasis-free survival(DMFS) in patients with positive EGFR were 68.2%、63.1%、67.2%、64.8% and negative EGFR were 88.6%、76.4%、87.1%、81.3%, respectively in 5-year(χ2=4.12,χ2=4.01,χ2=3.97,χ2=3.85,P<0.05). The rate of distant metastasis in residual were 67.2% significantly higher than 17.8% in without residual(χ2=7.48,P<0.05); The high expression of EGFR with OS、DFS were significantly correlated (r=6.725,P<0.05).ConclusionEGFR expression was common in NPC.The high expression of EGFR with tumor residual were correlated and had the tendency of poor prognosis.It would be potentially favored in predicting the radiosensitivity of NPC patients before radiotherapy and be helpful in defining patients who will benefit from therapy.

Nasopharyngeal；Epidermal growth factor receptor；Tumor residual；Pronosis

516001 广东惠州中心人民医院肿瘤放射治疗中心(蓝玉宏 白力 江晓聪),病理科(杨清绪)