肿瘤坏死因子－α检测对结核性胸膜炎的诊断价值

李国周，吴洁贞，周志梅，诸秋霞

（广东省东莞市慢性病防治院：1.实验室；2.院感部 523008）

结核性胸膜炎（tuberculous pleurisy，TP）是临床常见病、多发病，由于其缺乏特异性临床表现，影像学检查亦无特异性改变，胸腔积液部位、年龄及性别构成对TP诊断也无意义，因此难以根据临床表现和影像学检查诊断TP。而胸腔积液病原学检查，包括胸腔积液涂片找抗酸分枝杆菌、胸腔积液结核杆菌培养等，因阳性率低或耗时过长而使其临床应用受到限制。目前国内外学者着力于研究新的特异性强与敏感性高的指标，以期提高TP的诊断水平。一些研究表明，胸腔积液中细胞因子和免疫分子的异常表达，可以鉴别胸腔积液的性质。而在常规检验工作中，经常接收到不明原因的胸腔积液标本，根据患者临床表现和胸腔积液性质和生化特点，大部分胸腔积液的性质是可以明确，但仍有20%～30%胸腔积液患者难以确诊。本试验检测分析结核性胸膜炎并发胸腔积液中的TNF-α水平变化，对于了解结核性胸膜炎并发胸腔积液具有重要意义，并探讨结核性胸膜炎并发胸腔积液患者的胸腔积液、外周血和健康对照组中TNF-α水平比较，为临床诊断提供实验数据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 250例标本均来自于2005年5月至2011年12月在本院肺科门诊及呼吸内科住院患者，其中男145例，女105例，年龄23～65岁，平均年龄（32±3）岁，健康对照组50例，男35例，女15例，年龄20～55岁，平均年龄（29±3）岁。

1.2 方法 采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测外周血及胸腔积液TNF-α浓度，分别静脉抽取健康对照组及结核性胸膜炎患者血液2～4mL，再抽取结核性胸膜炎患者胸腔积液10 mL，离心半径10cm，2 500r／min离心10min，吸取上清液2 mL。实验操作步骤严格按试剂盒要求。同一患者其血清及胸腔积液同步测试TNF-α浓度，并每次检测健康对照组血清TNF-α浓度。

1.3 试剂 TNF-α检测试剂由广东省珠海丽珠生物有限公司生产提供。

1.4 统计学方法 实验数据全部通过SPSS 11.0统计软件方法分析齐性检验后，再进行t检验，进行组间比较，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结 果

采用ELISA法检测结核性胸膜炎并发胸腔积液患者血清及胸腔积液TNF-α浓度，并同步检测健康人血清TNF-α浓度作对照。经统计学数据处理分析，结核性胸膜炎患者胸腔积液中TNF-α浓度显著高于健康对照组，二者差异具有统计学意义（t＝38.38，P＜0.01）。结核性胸膜炎患者与健康对照组血清TNF－α浓度比较，二者差异有统计学意义（t＝5.38，P＜0.01），而同一患者胸腔积液TNF－α浓度明显要高于血清水平。见表1。

表1 结核性胸膜炎患者与健康对照组TNF-α浓度比较

3 讨 论

TNF-α是一种多肽类物质，具有157个氨基酸残基，为前炎细胞因子，由单核巨噬细胞和淋巴细胞所产生，它不仅是一种肿瘤细胞杀伤因子，而且是机体炎症反应、免疫应答的重要调节因子，其生物学活性主要有：（1）刺激单核细胞，激活巨噬细胞发挥免疫调节作用；（2）上调黏附因子表达，促进巨噬细胞活化，增强其吞噬功能；（3）上调机体T、B淋巴细胞免疫功能；（4）激活白细胞介素-8（IL-8）等细胞因子，形成相互协调作用的细胞因子网络系统。国内外有研究表明，适量的TNF-α浓度对保护机体是非常必要的，可刺激单核巨噬细胞系统，增强其吞噬结核杆菌能力，能使原发性病灶自愈［1－2］。但经过国外部分学者及一定数量分析表明，过量的TNF-α浓度则可导致组织严重损伤及干酪样改变，临床上出现发热、盗汗、恶病质等症状，从而使肺结核病情进一步加重［3］。同时，若局部肺组织缺氧情况下亦可刺激肺泡巨噬细胞导致TNF-α水平增加。此外，结核杆菌入侵机体后造成机体局部损伤以及其释放的内毒素脂多糖（LPS）除能激活单核巨噬细胞系统和淋巴细胞产生TNF-α以外，还释放白细胞介素-6（IL-6）、IL-8等多种细胞因子，并一起参与到肺结核局部免疫反应和炎症发生。肺结核活动期时，结核感染病灶常引起肺组织较为严重的局部损伤，刺激单核巨噬细胞系统和淋巴细胞释放高水平的TNF-α、IL-6、IL-8等多种细胞因子，但过高的 TNF－α、IL-6、IL-8等多种细胞因子水平又通过各种效应途径激活免疫细胞，加重局部炎症反应及肺组织损伤，继而形成一个恶性循环，使活动性肺结核病情趋向恶化［4］。有文献报道，结核性胸膜炎患者胸积液中TNF-α水平明显要高于恶性胸腔积液［5］。可能与恶性胸腔积液中存在一种TNF-α抑制物有关，它可以抑制TNF-α活性。它通过抑制TNF－α分泌和释放或加速其分解，致使胸腔积液中TNF－α活性与含量降低。也有文献报道TNF－α可促进胸膜间皮细胞释放1型纤维蛋白溶酶激活抑制剂（PAI-1），使结核性胸腔积液的纤维蛋白溶解活性比恶性胸腔积液中的水平明显降低，从而更易因纤维蛋白沉积导致胸膜增厚［6－7］。本实验采用ELISA法检测患者胸腔积液及健康人血清TNF－α水平，经统计学分析，TNF-α水平在结核性胸膜炎患者血清（13.88±2.33，P＜0.01）及胸腔积液（38.38±3.73，P＜0.01）中明显要高于健康人血清（11.75±2.94），二者差异具有统计学意义。

另外，本实验统计了250例结核性胸膜炎患者中，痰涂片阳性和痰涂片阴性患者的TNF－α水平差异无统计学意义（P＞0.05），而本试验还发现TNF－α在肺结核中的表达强度，肺部伴有空洞结核性胸膜炎患者中，其TNF－α水平值明显高于没有空洞患者，与文献报道一致［8－9］。其中有2例结核性胸膜炎合并胸腔积液患者因治疗欠佳而转化为结核性脓胸，其TNF－α水平值明显高于其他患者（t＝44.21），提示病情恶化可使TNF-α水平值进一步提升。

由此可见，肺结核的病情变化与TNF－α有关，TNF-α在结核性胸腔积液中具有高水平，肺结核的患者胸腔积液和外周血中TNF-α水平检测具有一定意义，可作为诊断及鉴别诊断的一种有效指标。

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