化学发光免疫法检测甲状腺激素及抗体结果的临床意义

高莉囡，王海波，吴 丹，淡以锐 (吉林医药学院附属医院检验科，吉林 吉林 132013)

化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay，CLIA)，是 Schrpeder等学者于1978年将放射免疫分析(RIA)和酶联免疫分析(EIA)的基本原理相结合，应用吖啶酯化学发光信号作为示踪建立和发展起来的分析法，具有超微量分析的灵敏度和高强度的特异性，以其方法的灵敏性和特异性独领风骚于医学检验领域的各种方法之中［1］。本实验应用CLIA法检测3组(甲亢组40人、甲低组40人和甲功正常组40人)病人血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、血清游离四碘甲状腺原氨酸(FT4)、促甲状腺素(TSH)、甲状腺球蛋白(TG)、甲状腺微粒体抗体(TMA)和甲状腺球蛋白抗体(TGA)的含量，探讨检测结果的临床意义。同时将3组血清在RIA法仪器上进行再检测，观察两种仪器之间的差异性。两种仪器和两种方法均为全自动封闭式检测。现将检测结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 资料

收集吉林医药学院附属医院内分泌科住院或门诊病人血清标本，先经CLIA法检测甲状腺激素和抗体(FT3、FT4、TSH、TG、TMA 和 TGA)的含量。挑选其结果正常范围和甲亢、甲低的标本在同日用RIA法测定同样项目，整理收集检测结果。

1.2 方法

将所选择样本由具有专业资质的技术人员按RIA法和CLIA法分别进行操作，以保证结果的一致性与方法操作的可靠性。仪器及试剂分别为RIA分析仪(西安核医学仪器厂，FJ2003PS r放射免疫分析仪，试剂由山东3V生物试剂公司提供);CLIA分析仪(意大利产化学发光自动分析仪MAGLUMI 2000型，试剂为原厂配套产品)。

2 结果

用RIA法和CLIA法同时测定甲亢、甲低及甲功正常组各40人，共计120人份甲状腺激素和抗体的含量，将检测结果应用SPSS11.0软件进行处理，结果以平均值和标准差(s)表示，P＞0.05无统计学意义，详见表1。

两种方法检测结果的相关性分析，采用线性回归分析。以两种方法间相关系数r2作为判断两种测定方法一致性的标准，实验数据用Excel表以X-Y作图，添加趋势线，得出线性回归方程及相关系数r2值，经统计分析得出，用CLIA法与RIA法检测甲亢组、甲低组和正常组甲状腺激素及相关抗体，两种方法其结果具有高度的相关性，相关系数(r)均值为0.982。

表1 两种方法分别检测三组病人甲状腺激素及抗体结果的比较(s，n=40)

表1 两种方法分别检测三组病人甲状腺激素及抗体结果的比较(s，n=40)

*:与CLIA组比较，P＜0.05

组 别 FT3(pg/mL)FT4(pg/mL)TSH(uIU/mL)TG(ng/mL)TMA(IU/mL)TGA(IU/mL)RIA甲亢组 12.6±2.9* 68.6±11.5* 0.04±0.01* 6.7±1.3* 13.1±1.8* 21.4±3.6*9.4±1.8 RIA甲低组 1.9±1.1* 6.5±1.9* 98.7±25.6* 7.3±1.6* 11.5±1.3* 18.5±3.0*RIA正常组 3.8±1.4* 14.9±2.8* 4.73±1.08* 4.4±1.0* 10.5±1.4* 9.9±1.7*CLI甲亢组 11.7±2.7 67.5±12.8 0.03±0.01 6.6±1.4 12.9±1.8 20.5±3.3 CLIA甲低组 1.9±1.2 5.9±2.1 96.6±26.8 7.2±1.6 10.9±1.3 18.1±3.1 CLI正常组 3.7±1.5 13.7±2.2 4.46±1.05 4.5±1.1 10.0±1.4

3 讨论

CLIA法具有RIA和EIA法的超微量分析的灵敏度与高强度的特异性，实现了对人类内分泌激素及一切具有生物活性物质的微量分析的崇高愿望。超微量检测分析法源于20世纪60年代和70年代著名学者Yalow、Berson和Schrpeder等的贡献。该方法具有简便、快捷、灵敏、准确、可定位、定量、定性等优点，开创了超微量检测技术的新纪元［2］。该方法具有最佳的检测效果、最高的检测精度、最快的检测速度，是承继放射免疫、酶联免疫、普通化学发光技术之后的新一代标记免疫分析技术。由于检测的灵敏度高，适合于人体内分泌激素、肿瘤标志物、生殖激素等微量物质的检测，检测量可达到微微克(pg)水平。由于激素的微小变化都会导致人体功能性或病理性改变，尽早发现它们的某种微妙变化，对于疾病的早期诊断、治疗方案的确定或疗效的评估与预后判定都具有重要的临床意义和预测价值。

CLIA法具有比RIA和IRMA法更高的分析性能［3-4］，CLIA法所用标记物相当稳定，有效期可达一年，检测过程为全自动化运行。人为因素等操作误差相对非常低。这样即显示了该方法的灵敏性、特异性和全自动化分析仪的先进性，成为医学检验超微量分析领域的领头军，具有里程碑意义［2］。

由于CLIA法具有自动检测运行快、耗时短、检测过程简便等特点，方便了急诊或门诊病人及时得到结果。对于一些怀疑患有甲状腺功能异常又伴随低钾血症或房颤的病人，若能快速有效的检测甲状腺功能与激素含量并及时发出报告，则可以为临床医生尽早做出鉴别诊断，为确诊与避免误诊提供了可靠的依据。对曾经患甲亢或甲低的病人，由于长期用药，而出现用药过量或用药不足时，应用CLIA法可提供快速检测通道，在1～1.5 h后出报告，为及时给予患者调整用药剂量提供了极大帮助，同时也帮助医院缓解了看病难、看病慢的呼声，提供及时服务。

文献指出，由于CLIA法的定量精细、灵敏度高、检测范围广(20～300，10～1000 IU/mL)从而更有利于病情判断和疗效观察，表1结果表明，在甲功亢进病人中，FT3、FT4结果明显升高，而TSH结果小于正常范围时，一部分患者TMA和TGA结果升高值在10% ～20%之间;甲低病人中，FT3、FT4结果明显降低，TSH结果大于正常值6～10倍或以上者占30% ～40%。甲功正常无明显症状的人群中抗体阳性率约为3.5% ～4.5%，女性高于男性，与文献报道很接近［5］。一般资料认为甲状腺自身抗体的产生与甲状腺内淋巴细胞浸润有关，是发生甲状腺功能损伤的重要危险因素［6］。同时也发现，抗体阳性者中甲亢或甲低的比率显著高于抗体阴性者。彩超检查甲状腺正常，而甲状腺抗体出现阳性同时伴随TSH检测值异常的病人，5年随访发现出现甲功能异常的发生率显著增加。甲状腺激素抗体阳性者而甲功能正常人群中，预示着有潜在的甲状腺功能异常的病人出现。文献指出，TGA的升高主要见于自身免疫性甲状腺疾病，如桥本甲状腺炎、Graves病等［7］。风湿和类风湿性疾病也有升高现象。

综合分析认为，CLIA法检测甲状腺激素及其抗体，对单纯性甲状腺疾病或合并其他疾病的诊断与鉴别诊断，是一项快捷、精确的检测方法，它完全避免了RIA法的废弃物污染、试剂有效期短等缺点。CLIA法是当今超微量检测法中的较好方法。

［1］李 龙，杜明华.检验核医学［M］.南京:东南大学出版社:2009:2-3.

［2］尹伯元.放射免疫分析在医学中的应用［M］.北京:原子能出版社，2010:1-2.

［3］Iervasi A，Zucchelli G C，Turchi S，et al.Analytical and clinical performance of an automated chemiluminescent immunoassay for direct renin measurement:comparison with PRA and aldosterone assays［J］.Immuno-anal Biol Special，2005，20(4):257-262.

［4］Zhang Y X，Zhang Z J，Yang F.A sensitive immunoassay for determination of hepatitis B surface antigen and antibody in human serum using capillary electrophoresis with chemiluminescence detection［J］.J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci，2007，857(1):100-107.

［5］李玉珠，单忠艳，吴海燕，等.甲状腺过氧化物酶抗体和甲状腺球蛋白抗体阳性临界值的确定及其临床意义［J］.中华检验医学杂志，2006.29(9):780-783.

［6］Brown T R，Zhao G，Palmer K C，et al.Thyroid injury，autoantigen availability，and the initiation of autoimmune thyroiditis.Autoimmunity，1998，27(1):1-12.

［7］卢桂芝.甲状腺结节［J］.中华检验医学杂志，2011，34(10):957-959.