血清谷氨酸脱氢酶活性检测在肝胆疾病中的临床价值

赵元明

(济宁医学院附属医院检验科，山东 济宁 272029)

谷氨酸脱氢酶(GLDH)是1种含锌线粒体酶，主要分布于肝脏、心肌和肾细胞线粒体的基质及内膜中，而以肝组织活性最高[1]。分布于肝细胞线粒体内的GLDH在肝细胞受损害时会明显升高[2]。天门冬氨酸氨基转移酶(AST)则主要存在于心、肝和骨骼肌中，其中肝中的AST大部分存在于线粒体中，所以AST的检测也可作为肝细胞损害的辅助性指标[3]。本研究测定了各种肝病患者的 GLDH、AST和丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性，以评价临床应用价值。

材料和方法

一、研究对象

1.正常对照组 选取2011年1月至8月在济宁医学院附属医院进行健康体检的健康人120名，男69名，女51名，年龄16～57岁，各种理化指标均正常，并且排除心、脑、骨、肾及肝胆等系统的疾病。

2.肝胆疾病组 选取2011年1月至12月济宁医学院附属医院住院的患者180例，男102例，女78例，年龄8～67岁，均以临床症状结合血清病毒学标志及其他临床辅助综合判断，其中急性肝炎40、肝癌32例、肝硬化28例、胆道肿瘤25例、胆结石25例、其他肝胆疾病30例(包括肝脓肿、胆结石及胆囊炎等)。所测样本均合格。

二、仪器与试剂

仪器为日立7600-120全自动生化分析仪。GLDH试剂由罗氏公司提供，AST、ALT试剂均由德国 CENTRONIC公司提供，质控品由英国RANDOX公司提供。采用试剂说明书推荐的参数进行相关测定。

三、测定方法

GLDH、AST和ALT测定均采用酶速率法，并分别采用低、中、高值进行精密度检测，严格按照试剂盒说明书进行操作和结果判定。原理:α-酮戊二酸+NADH+NH4+谷氨酸+NAD++H2O。在上述反应中，NADH被氧化生成NAD+的速率与GLDH的活性成正比。在340 nm波长下测定NADH的下降速率，即可计算出GLDH的活性。

四、统计学方法

阳性判断界值采用正常对照组95%水平确定参考范围，计量数据以表示，采用SPSS17.0进行t检验和相关性分析。P＜0.05表示差异有统计学意义。

结 果

一、精密度测定

低、中、高值质控品的批内变异系数(CV)值分别为 2.36%、3.24%和 2.75%。

二、各组GLDH、AST和ALT测定结果

不同肝胆疾病组血清GLDH、AST和ALT活性均有不同程度升高，与正常对照组比较，差异均有统计学意义 (P＜0.05);GLDH的平均升高倍数(8.8倍)高于AST(4.2倍)。急性肝炎组ALT的平均升高倍数(67.3倍)远高于 GLDH(11.6倍);肝癌组GLDH的平均升高倍数(15.4倍)高于ALT(4.8倍);其他疾病组二者的升高倍数相当。结果见表1、图1。

表1 正常对照组和肝胆疾病各组GLDH、AST和ALT活性比较(，U/L)

表1 正常对照组和肝胆疾病各组GLDH、AST和ALT活性比较(，U/L)

注:与正常对照组比较，*P ＜0.05、＊＊P ＜0.01

组别 例数GLDH AST ALT正常对照组120 4.37 ±2.88 26.80 ±6.32 23.21 ±5.22急性肝炎组 40 45.32±28.31＊＊ 150.21±73.33＊＊ 1023.55±732.21肝硬化组 28 37.66±12.33＊＊ 105.56±60.02＊＊ 168.03±77.03＊＊肝癌组 32 66.27 ±32.21＊＊ 159.34 ±66.88＊＊ 95.43 ±55.06＊＊胆道肿瘤组 25 17.46 ±10.03* 90.01 ±34.33* 168.32 ±64.31＊＊胆结石组 25 30.31±16.22＊＊ 76.30±39.39* 155.82±70.01＊＊其他疾病组 30 22.23±8.03＊＊ 63.31±26.43*33.23 ±13.09

三、各肝胆疾病组GLDH和AST的相关性分析

从表1可见，肝胆疾病患者GLDH活性升高均伴随不同程度AST活性增高，但AST活性增高并不都有GLDH活性升高。GLDH和AST的相关性分析显示:肝癌、胆结石患者二者活性变化有明显相关性(r=0.86，P ＜0.01)，急性肝炎和胆道肿瘤患者二者有相关性(r=0.72，P ＜0.05)，而肝硬化及其他肝胆疾病患者二者无相关性(r=0.41，P ＞0.05)。

讨 论

本研究精密度试验显示，GLDH、AST和ALT试剂的批内精密度＜5%，表明检测结果有很好的重复性。

健康人正常情况下血中GLDH含量很低，但在肝细胞损伤或坏死时可进入血流，使血清中GLDH活性明显增高[4]。GLDH活性无季节性波动，个体差异小，不受其他因素影响。因此，测定血清GLDH活性可作为诊断肝细胞病变的重要指标[5]。

将ALT、AST与GLDH联合检测表明，GLDH反映肝实质损伤的特异性高于 ALT和 AST[6]。本研究结果显示，ALT在肝脏轻度病变时即明显升高，而在中、重度肝脏病变时则升高不明显。虽然ALT在肝病早期即可出现改变，但特异性较差，其升高幅度亦不一定完全反映肝细胞损害的程度。ALT同时存在于线粒体及细胞浆，相对分子质量约为105。GLDH只存在于线粒体，而不存在于细胞浆，相对分子质量约为106[7]。因此，肝细胞病变仅为细胞膜通透性改变时，血清GLDH不升高，而当细胞坏死与线粒体崩解时，GLDH解离并逸出细胞。所以，GLDH正常不能排除肝细胞的轻度损害，而GLDH异常提示则肝细胞坏死，GLDH与ALT二者同时测定将有助于肝细胞损伤及其严重程度的判定[8]。

本研究结果显示，不同肝胆疾病血清中GLDH、AST和ALT活性都明显高于正常对照组。表明在不同肝胆疾病中，3种酶的活性均升高，但升高幅度不同，GLDH的升高幅度均高于AST。这种差异在肝癌和肝硬化患者中表现更明显。在胆道疾病、胆结石和其他疾病中GLDH活性亦较AST升高幅度高，但差异相对肝癌和肝硬化较低。这可能与GLDH在正常情况下血清含量较低，当肝细胞损伤累及线粒体时，血清GLDH活性明显升高有关。AST同时存在于肝细胞胞质中，当肝细胞损伤时升高不如GLDH明显，本研究结果证明了这一点。

对肝胆疾病各组的GLDH和AST活性进行相关性分析，结果显示肝癌和胆结石患者的GLDH和AST活性变化有明显相关性(r=0.86，P＜0.01)，而在肝硬化和其他疾病患者中则无相关性(r=0.41，P ＞0.05)，表明 GLDH 在诊断肝实质性损伤时特异性优于AST。

由于GLDH在体内的生物半衰期为16 h，所以当病情得到良好控制或改善后，GLDH活性随即降低，故 GLDH可作为疗效判定的指标。GLDH持续高水平，提示肝细胞线粒体破坏持续存在，表明预后不良。因此，测定GLDH的活性对肝病早期诊断、掌握病情、判断预后有其重要临床意义[9]。

综上所述，测定血清中GLDH活性可作为诊断肝细胞病变，特别是坏死性肝病的重要指标之一。而对于其他一些疾病GLDH也有诊断价值，并且有应用和开发前景。

[1]曹 燕，王柏山，牛广华，等.谷氨酸脱氢酶检测在慢性肝炎中的应用[J].上海医学检验杂志，2003，18(4):247-248.

[2]张立江，王佳楠，高俊芬.速率法检测血清 GLDH 120例临床分析[J].中国社区医师，2008，9(11):90.

[3]高 玲，孙艳红，王勇强.几种肝胆疾病血清中谷氨酸脱氢酶和AST活性变化的研究[J].实用医学杂志，2004，20(2):201-202.

[4]李 倩，陈蔚铭，康向东.谷氨酸脱氢酶、胆碱酯酶在高血清丙氨酸转氨酶肝病患者鉴别诊断中的应用[J].检验医学，2005，20(5):437-438.

[5]潘 峰，李荣斌，张丽霞.血清GLDH和AST-m在诊断几种肝脏疾病中的意义[J].中国实验诊断学，2005，9(6):986-987.

[6]黄慧谦，吕 宁，侯志平，等.肝损伤酶活性联合检测在肝胆疾病诊断中的相关分析[J].检验医学与临床，2008，5(8):453-454.

[7]刘金涛.谷氨酸脱氢酶活力变化在肝损伤中的应用[J].国际检验医学杂志，2011，32(2):270-271.

[8]邢 俊，李江华.血清谷氨酸脱氢酶检测在肝细胞损伤性疾病中的临床应用价值[J].黑龙江医药科学，2007，30(5):34-35.

[9]雷 鸣，朱志斌.血清GLDH和(AST+ALT)/GLD比值对肝病诊断的临床探讨[J].实用医技杂志，2007，14(28):3842-3844.