乙型肝炎病毒DNA定量检测与临床的关系

卫红伟

乙型肝炎病毒DNA定量检测与临床的关系

卫红伟

目的 探讨乙型肝炎病毒DNA的定量检测和临床的关系。方法 选取2010年6月至2012年6月期间来本院肝病专科就诊的128例患者的临床资料进行回顾性分析, 所选取的患者均通过ELISA(酶联免疫吸附试验)来检测乙型肝炎的病毒血清标志物, FQ-PCR(荧光定量聚合酶连反应)来检测HBV-DNA的含量。结果 HBcAb、HBeAg、HBsAg的HBV-DNA的阳性率为98.6%, HBcAb、HBeAg、HBsAg为25.2%, HBeAg、HBsAg为100%, HBcAb、HBsAg为20%, HBeAb、HBcAb、HBsAb为14.5%, HBcAb、HBeAb为20%, HBsAb为5.6%。全阴的为0。结论各种类型的乙型肝炎患者都有一定程度HBV-DNA复制, HBeAg的阳性患者其HBV-DNA的水平最高, 将HBV-DNA和HBeAg定量联合进行诊断, 可以为早期的乙型肝炎筛查以及治疗提供可靠的依据。

乙型肝炎病毒；DNA定量检测；关系

为了探讨乙型肝炎病毒DNA的定量检测和临床的关系,本次研究选取2010年6月~2012年6月期间来河南省宜阳县人民医院肝病专科就诊的128例患者的临床资料进行回顾性分析, 所选取的患者均通过ELISA(酶联免疫吸附试验)来检测乙型肝炎的病毒血清标志物, FQ-PCR(荧光定量聚合酶连反应)来检测HBV-DNA的含量。现将大致研究结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2010年6月至2012年6月期间来本院肝病专科就诊的128例患者, 其中男73例, 女55例, 年龄在12~76岁之间, 平均(34.8±14.5)岁, 所选取的患者都符合病毒性肝炎的诊断标准。且各类型的肝炎患者之间的资料没有明显的差异, 结果具有可比性。

1.2 检测的仪器和试剂 HBV血清检测标志物检测试剂盒和HBV核酸扩增荧光检测试剂盒；荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析仪均产自上海科华生物技术公司。

1.3 方法 在患者晨起空腹时抽取5 ml静脉血, 将血清离心分装在-20℃下保存备用。然后通过ELISA(酶联免疫吸附试验)来检测乙型肝炎的病毒血清标志物, 操作步骤按照试剂盒的规定进行。通过FQ-PCR(荧光定量聚合酶连反应)来检测HBV-DNA的含量, 每一次检验都设立强阳性、弱阳性以及阴性作为内标, 将四个已经通过的阳性标准品作为外标。在进行检测时做好室内的质控。

1.4 观测的指标 观测患者血清学的诊断指标和HBVDNA的阳性率以及定量检测的结果情况；血清学的诊断分组：第一组为HBcAb、HBeAg、HBsAg, 第二组为HBcAb、HBeAg、HBsAg, 第三组为HBeAg、HBsAg, 第四组为HBcAb、HBsAg, 第五组为HBeAb、HBcAb、HBsAb, 第六组为HBcAb、HBeAb, 第七组为HBsAb以及全阴。

1.5 统计学方法 采用SPSS16.0统计学软件对数据进行统计学处理, 以P＜0.05为差异具有统计学意义的基础。

2 结果

128例患者血清学的诊断指标和HBV-DNA的阳性率以及定量检测的结果情况, 详见表1。

表1 患者血清学的诊断指标和HBV-DNA的阳性率以及定量检测的结果情况［n (%)］

3 讨论

近几年, 发展了多种准确的、敏感的、先进的用于HBVDNA定量检测的方法, 根据其原理主要有酶标记探针PCR技术和荧光标记探针的PCR技术。后者省时, 自动化的程度高, 而且可以免除PCR后处理的步骤, 减少了PCR产物对环境的污染, 现在已经成为了HBV-DNA定量检测的主要方法。采用该方法对HBV-DNA进行定量检测的范围为3~8, 如果检测的值比最低的检测水平-3低, 将结果判断为阴性。在进行数据统计时, 将阴性的结果忽略不计或者计算为0, 而求得HBV-DNA对数的平均值的计算结果, 这种方法是不合理的。如果要合理的反映不同类型的乙型肝炎病毒患者体内的HBV-DNA的含量, 应该采用中位数的差异H来进行HBVDNA的含量比较。

我国现在属于乙型肝炎大国, 发病率在全世界排在前几位。有研究表明, HBsAg的流行率大约为9.75%, 当人体感染了乙型肝炎病毒之后会出现不同的症状以及临床表现。HBeAg呈阳性表示患者体内的乙型肝炎病毒在活跃的复制,表明其具有很强的传染性［2］。HBcAb、HBeAg、HBsAg的HBV-DNA的阳性率为98.6%, , HBeAg、HBsAg为100%, 说明本组患者的HBeAg阳性血清指标的模式组主要为第一组和第三组, 而且其HBV-DNA的阳性率以及HBV-DNA的定量都比其他各组要高, 说明HBeAg有可能与HBV-DNA的含量之间存在一定的正相关性［3］。HBcAb、HBeAg、HBsAg为25.2%, HBV-DNA 的对数的平均值为(5.03±1.86), HBcAb、HBsAg为20%, HBV-DNA 的对数的平均值为(6.28±0.48), 说明当e系统的抗原阴转时, HBV-DNA还是有可能被检测到,虽然其含量比第一组和第三组低。HBeAb、HBcAb、HBsAb为14.5%, HBV-DNA 的对数的平均值为(3.54±0.45), 说明HBsAb是一种保护性的抗体。

综上所述, 各种类型的乙型肝炎患者都有一定程度HBV-DNA复制, HBeAg的阳性患者其HBV-DNA的水平最高, 将HBV-DNA和HBeAg定量联合进行诊断, 可以为早期的乙型肝炎筛查以及治疗提供可靠的依据。

［1］ 李金明.乙型肝炎病毒血清标志物测定及结果解释的若干问题.中华检验医学杂志, 2006,29(5):385.

［2］ 潘春燕.溶血对乙型肝炎病毒DNA 定量检测的影响.左江医学, 2008,36(1):53.

［3］ 刘勇.乙型肝炎病毒的检测技术进展及临床应用.中国实用内科杂志, 2007,27(3):236.

471600 河南省宜阳县人民医院检验科