金焰绣线菊的试管苗繁殖研究

董莹莹，王 欣，杨文新，邹 侠，姜长阳

（辽宁师范大学 生命科学学院，辽宁 大连 116081）

1 引言

绣线菊属于蔷薇科绣线菊属灌木植物，金焰绣线菊（Spiraea bumalda cv.Gold Flame）是白花绣线菊与日本绣线菊（S.albiflora×S.japonica）的杂交种[1]。适宜种在花坛、花境、草坪、池畔等地，不仅可丛植、孤植、列植，做绿篱，也可成片地栽种成在花坛、花境、草坪、池畔等。金焰绣线菊叶色多变，橙红色新叶，黄色叶片，在温暖地区冬季红叶颇显得非常美丽动人。并且花量多、花期长。使其成为观赏效果最好的小灌木，近年来倍受大连地区人们的青睐。金焰绣线菊通常是采用扦插的方法进行繁殖[2]，不仅需要大量枝条作为接穗，而且成活率较低，从而严重地影响了繁殖速度，难以满足观赏栽培对种苗的大量需求。为此，对金焰绣线菊进行了试管苗繁殖的研究，以期达到获得大量种苗，满足栽培的需求的目的。目前已有绣线菊类植物组织培养研究的报道[3，4]，但迄今未见金焰绣线菊试管苗繁殖研究的报告。

2 材料与方法

2.1 材料来源及前处理

2008年11月初，将大连市区花坛上生长旺盛的独株金焰绣线菊做好标记。2009年5月上旬，待当年由根部发出的萌蘖芽即将生长出地面时，用5mg·L－1的庆大霉素溶液将根部浇透。24h后，将其根部周围的土壤挖开，并把即将长出地面，长10cm左右的萌蘖芽剪下，带回实验室作为本研究的实验材料。

2.2 材料灭菌与培养条件

在实验室中，将萌蘖芽切成长3cm左右的有芽茎段后，按照艾蒿的研究方法[5]进行灭菌，并按照艾蒿的培养条件进行培养。

2.3 试验方法

2.3.1 不同培养基对萌蘖芽茎段试管苗培养的影响

将无菌萌蘖芽的有芽茎段两端切口各切掉0.3cm左右，以达到将灭菌材料在灭菌中受到灭菌剂严重伤害的材料两段切口部分从材料上除掉的目的。接着，将至少具有两个芽的材料接种到以下9种培养基上，进行不同培养基对萌蘖芽茎段试管苗培养的影响试验。这9种培养基分别是：1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2号（生根粉2号，以下均简称 ABT2号）1.5mg·L－1＋IAA0.2mg·L－1；1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2号1.5mg·L－1＋IAA0.4mg·L－1；1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2号1.5mg·L－1＋IAA0.6mg·L－1；1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2号1.5mg·L－1＋IBA0.2mg·L－1；1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2号1.5mg·L－1＋IBA0.4mg·L－1；1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2号1.5mg·L－1＋IBA0.6mg·L－1；1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2号1.5mg·L－1＋NAA0.2mg·L－1；1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2号1.5mg·L－1＋NAA0.4mg·L－1；1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2号1.5mg·L－1＋NAA0.6mg·L－1。这一实验重复了2次，每种处理100个材料。

3 结果与分析

不同培养基对萌蘖芽茎段试管苗培养的影响。接种培养后观察统计表明，在9种培养基上，所培养的材料都可以不同程度生长为试管苗。就加入了3种不同生长素的培养基而言，在加入了不同浓度的IAA和NAA的培养基上，萌蘖芽茎段生根生长为试管苗的效果一般，而在加入了不同浓度的IBA的培养基上，萌蘖芽茎段生根生长为试管苗的效果较好。其中在1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2号1.5mg·L－1＋IBA0.2mg·L－1这种培养基上的生根效果最好。培养至35d时观察统计证明：1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2号1.5mg·L－1＋IBA0.2mg·L－1这一培养基上由萌蘖芽茎段培养的试管苗平均可长高到4.6cm，每株试管苗平均具有7.5条白色根，平均生根率达到了98.0%，并且外观上试管苗生长旺盛。2次重复试验的结果一致。以上结果说明：1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2 号 1.5mg·L－1＋IBA0.2mg·L－1这种培养基是金焰绣线菊的萌蘖芽的有芽茎段试管苗培养的适宜培养基。

3.1.1 试管苗茎段生根继代繁殖培养

在2009年2次萌蘖芽茎段试管苗培养的基础上，2009年7月下旬，以1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2号1.5mg·L－1＋IBA0.2mg·L－1这种培养基上第2次接种培养了100个萌蘖芽茎段培养的98株试管苗为材料。将其剪成长1.2－1.5cm、至少具有2个生长点（外观上是具有2个叶片）的茎段后，再接种到1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2号1.5mg·L－1＋IBA0.2mg·L－1这种培养基上，进行试管苗茎段的生根继代繁殖培养试验。这一试验连续生根继代繁殖培养了4代。

连续生根继代繁殖培养了4代的试验结果证明：经过33d为1个培养周期的培养，就会培养出平均1代生根率达到99%、株高4.8cm、生长着8.3条根，外观上呈嫩绿色、生长旺盛的试管苗。连续的统计还证明：平均一代的繁殖系数为3.1。经过连续4代的培养，共获得9097株生长旺盛的试管苗。按照33d为1个培养周期，每个培养周期繁殖系数为3.0（实际上是3.1）计算，1株试管苗1年能繁殖出约20万株试管苗。这种繁殖速度完全能满足观赏栽培对种苗的需求。上述结果说明：1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2 号 1.5mg·L－1＋IBA0.2mg·L－1这种培养基也是金焰绣线菊萌蘖芽试管苗茎段生根继代繁殖培养的适宜培养基。

3.1.2 试管苗移栽与定植

把生根继代繁殖培养的2000株试管苗移栽到上半层为颗粒状炉灰渣、下半层为肥沃园土的温室营养钵中，移栽后10d内保持湿度85%以上、无直射光的环境条件，之后按照温室的正常环境进行管理。

5月下旬，把在温室中移栽成活的1940试管苗定植于大连金州的花坛上。移栽后除了浇透水外，其他条件按照花坛正常栽培的金焰绣线菊进行管理。

在温室中移栽35d后统计：成活了1946株，成活率为97.3%。定植后50d统计表明，共成活1930株，成活率为99.5%。对定植成活的试管苗观察表明，定植的试管苗与野生移栽苗相比，前期生长缓慢、60d后生长加快。与同期栽培的扦插苗相比，试管苗明显具有植株整齐，生长旺盛，更有利于观赏的特点。试管苗翌年开花结果，不仅保持了金焰绣线菊的植物特征，也保持了观赏效果好的特点。

4 结语

在以往的绣线菊和观赏植物的试管苗培养研究中，其试管苗的培养过程和技术都远比本研究复杂[3，4，6，7]。本研究以萌蘖芽的有芽茎段为材料，仅用两步就完成了试管苗的培养和继代繁殖培养，不仅试管苗容易移栽和定植成活，而且定植于花坛上的试管苗观赏效果好。这说明利用本研究所建立的简化的技术也能培养出理想的观赏植物试管苗。据此，研究者认为在未来的观赏植物或其他植物试管苗繁殖中，都应尽力探索简化的繁殖技术，这样既能缩短培养繁殖时间，又能节省人力物力。

本研究是利用金焰绣线菊的萌蘖芽的有芽茎段直接进行试管苗培养，并且取得较理想的培养效果。在前人的试管苗研究中，未见以萌蘖芽为材料进行试管苗研究的报道。因此，这一研究证明：某些植物的萌蘖芽也可作为试管苗培养的理想材料。

[1]李作文，王玉晶.东北地区观赏树木图谱[M].沈阳：辽宁人民出版社，1999.

[2]张颖文，张颖杰，贾文忱.金焰绣线菊的繁殖栽培技术[J].中国林福特产，2008（5）：59～60.

[3]张立磊，李保印，郭巧玲，等.菜叶植物今夜绣线菊组织培养研究[J].经济林研究，2005，23（1）：47～49.

[4]胡益明，甘烦远，彭丽萍，等.药用植物粉花绣线菊的组织培养与快速繁殖[J].中草药，2001，22（11）：1031～1033.

[5]王 艳，张 卓，王晓旭，等.艾蒿生长点及试管苗培养的研究[J].辽宁大学学报，2011，38（4）：353～356.

[6]李毅丹.几种观赏植物试管苗工厂化生产技术研究[D].长春：东北师范大学，2004.

[7]安利佳，姜长阳.植物组织培养技术导论[M].大连：辽宁师范大学出版社，1996：101～154.