刘兴伟 邵梦跃 李丰田 赵艳娇 丁世伟
辽宁省辽宁绒山羊原种场有限公司 111000
选用辽宁省畜牧科学研究院研发的“牧丰牌羊发情排卵测定仪”。其工作原理是:母羊处于发情状态特别是接近排卵时期,由于其生殖器官充血,血液中的盐分、离子等通过毛细管渗透到阴道腔中,使阴道中黏液的导电性增强,从而使黏液的电阻值下降。当排卵期过后,电阻值由最低值上升到最高值。当连续定时测定母羊子宫颈口的电阻值后,就会监测到母羊排卵的时间点,从而能有效提高配种受胎率,特别是冻精配种的受胎率。
将检测仪的探头插入到母羊阴道内至子宫颈口,轻轻转到手柄正负15°角,打开电源开关,当电阻值稳定在十位范围时记录数值后即可。延时测定方法是将检测仪的探头插入到母羊阴道内至子宫颈口,轻轻转到手柄正负15°角,打开电源开关,当数显表显示数据后按下延时开关,在规定的延时时间内显示最后的测定数值。实验表明,延时显示的数据与实时测定的数据呈强正相关,可以完全代替实时测定。
在测定前要将母羊的外阴进行适当清洗、消毒,防止将病源微生物带入母羊生殖道内,造成母羊流产、死胎和受胎率降低。将母羊体测仪的探头用75%酒精擦洗消毒,待酒精风干后再用生理盐水擦洗,再后将探头极环用盐水擦净。
精心挑选有正常发情周期的繁殖母羊300只,其中3-6周岁母羊100只,为A组;1.5-2.5周岁母羊100只,为B组;8月龄-16月龄母羊100只,为C组。
于2010年8月-12月,分别在辽宁绒山羊原种场科技示范场和辽宁省辽阳市下达河乡智丰种羊场进行母羊挑选,并在母羊正常发情状态下进行母羊颈宫电阻值的测定。
采用腹腔镜法观测母羊的排卵状态,即将母羊仰卧、头低尾高保定后,腹部后方常规剪毛消毒,在腹中线两侧乳房前2-3cm处的一侧选血管稀少处作一1.0-1.5cm的切口,拉开皮肤,利用腹腔镜探针外套刺破肌肉层和腹膜,抽出内部探针,将探针留在腹腔内;腹中线另一侧对称位置作同一切口,插入子宫钳。然后利用子宫钳和探针外套寻找子宫角末端,将卵巢暴露进行排卵及卵泡发育情况观测。用上述同样方法进行另一侧卵巢发育及排卵观测。观测结束后及时做好相关记录供分析之用。
在母羊未发情的状态下,每隔2小时进行一次电阻值测定,不做母羊排卵观侧,以保证母羊有足够的体力使试验顺利进行。母羊发情后,每1小时进行一次电阻值测定,并同时进行排卵及卵泡发情情况的观测,详细做好各项记录工作。
(1)各时间区段进行比较
通过试验测定出电阻值和排卵时间点以后,以排卵时间点为中心划定时间范围。具体划分方法如下:
排卵时间点±2小时,排卵时间点前±2小时-±4小时,排卵时间点后±2小时-±4小时。
通过各时区测定数值的统计,计算出各时区电阻值的平均值和排卵发生的百分率,以生物统计方法进行比较。
(2)绘制不同类别羊电阻值变化规律进行直观比较
以时间为横坐标,电阻值变化为纵坐标,比较距离排卵时间点不同时间范围的电阻值变化规律。
(3)输精试验效果比较
在辽阳市下达河乡鸡鸣寺村和黑龙江省七台河地区挑选2-7周岁的繁健康绒山羊母羊120只,分为2组,对照组42只,采用阴道检查鉴定发情方法。试验组78只,采用电阻测定法确定输精时间,各组均进行细管冻精配种试验,子宫颈口输精,一个情期输精2次。配种后60天根据不返情率统计两组的冻精配种受胎率,进行样本百分数差异显著性检验。
表1:不同时间区段时宫颈电阻值变化规律明细表 单位:欧姆、个、%
对表中各组排卵母羊比率、卵泡成熟率进行样本百分数差异显著性检验,P、Q、M、N与O组比较,P<0.01,差异极显著;P、M 之间,P、N 之间,Q、N之间,P、Q之间两组数值<0.05,差异显著。通过分析说明,当母羊子宫颈口黏液电阻值下降至最低值时即排卵点±2小时的时区内,绝大多数母羊发生了排卵现象,并且此区间内卵泡的成熟比率极显著高于其他时间区间的比率。
将1.5-2.5周岁母羊与3-7周岁母羊测得的宫颈电阻值的平均值绘制成曲线,如图1所示。
图1:不同年龄的母羊发情周期宫颈黏液电阻值的变化曲线
通过图1可以看出,尽管两个曲线的下降和上升速率不同,但到达电阻最低点的数值是接近的,大约在100欧姆上下范围内.1.5-2.5周岁母羊组发情持续时间较短,电阻值上升和下降的数率较快,表现为曲线较为陡直。而3-7周岁母羊组母羊的发情持续时间较长,表现为曲线较为舒缓,这与实际生产中成壮年母羊的发情时间较长,未成年母羊的发情持间较短的变化规律是一致的。
采用辽宁绒山羊0.25mL细管冷冻精液进行配种,经检测,所用冻精解冻后的活力为0.35±0.05,38-40℃解冻后在 38℃的存活时间平均为6.5±0.5小时,其配种效果如表2所示。
表2:不同发情鉴定方法冻配效果明细表单位:只、%
通过样本差数显著性检验,两组之间P<0.01,差异极显著,说明通过测定宫颈黏液电阻法判断母羊发情排卵状态进行输精可以取得更好的冻精配种效果。
(1)不同年龄的母羊,其子宫颈口电阻值的变化速率是不同的,但两者又有其共同点,即变化规律是相同的。如都是未发情和发情结束后电阻值数值最高并且比较恒定,发情开始后逐渐降低,至排卵前后降至最低点,排卵后又上升到最高数值。
(2)母羊在一个发情周期中,其体内的激素会出现一系列的变化。在发情开始时,雌激素水平上升,会引起母羊生理上的许多变化,生殖器官毛细血管充血,血管和黏膜的通透性增加,血压可能也会有所上升。在这些因素的作用下,血液中的液体成份及溶于液体成份的盐类等物质就会渗透到生殖道中,越接近排卵,渗出的液体成份越多,盐类等电解质成份浓度越高,其导电性越强,电阻值越低。母羊排卵结束后,雌激素水平下降,孕酮水平上升,母羊的生理又回复到未发情时的状态,自然其电阻值又恢复到原来的高数值状态。
(3)本研究之所以选择母羊子宫颈外口的电阻值进行试验测定,是因为宫颈外口位置比较固定,在测定时只要把羊发情排卵检测仪插入母羊阴道底部即可测定相同部位的电阻,便于进行比较和分析。另外,宫颈外口的黏液由于位置较深,挥发较慢,又是分泌数量较多的部位,能够准确地反映出母羊生殖道管腔内黏液的主要特点。而阴道腔中黏液的主要来源是宫颈外口的黏液和阴道外壁黏液的混合体,蒸发较快并且常混有尿液,影响测定结果的准确性,故没有采用。
(4)本试验所采用的测定仪器是辽宁省畜牧科学研究院设计并制作的“牧丰牌羊用发情排卵检测仪”,主要是依靠仪器探头的两个电极环插入母羊宫颈外口,通过湿润的黏膜和黏液构成导电回路进行测定的。其中电极环之间的黏液覆盖面积对测定结果是有所影响的,因此在仪器的设计时,将两电极环的距离和直径缩小,同时将电极环设计成与探头探秆水平状态,都是为了不浪费粘液,保证多次测定结果准确并具有可比较性。如果采用其他仪器测定,由于设计参数不同,内阻不同,其测定数值和测定的准确性也必然存在差异。
(5)由于所测定的仪器已经申请国家专利,故不能对仪器的具体结构和参数作具体介绍,望见谅。
(6)本研究在试验的过程中,只采用辽宁绒山羊做为测定样本,没有对其他品种的山羊进行测定。另外,在冻配时由于条件限制,冻配母羊样本较少,没有对其他生理状态的母羊如药物处理母羊、春季配种母羊进行测定,需要在以后的研究中进一步完善。