谭 珊 陈应红
贵州省黔西南州中医院检验科,贵州 黔西南州 562400
ELISA、RPR、Trust三种方法检测梅毒螺旋体抗体的观察
谭 珊 陈应红
贵州省黔西南州中医院检验科,贵州 黔西南州 562400
目的:观察探讨ELISA、RPR、Trust三种方法检测梅毒螺旋体抗体的效果。方法:分析1711例梅毒检测标本资料,其中阳性标本例数30例,阳性率为1.8%。结果:ELISA两种方法检测梅毒螺旋体抗体阳性率明显高于RPR、TRUST两种方法检测的阳性率,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:ELISA对疑似梅毒患者有确证作用,但是其最终确诊应结合临床综合判断,TRUST试验则可作为梅毒患者疗效观察及复发监测试验进行临床应用。
ELISA;RPR;Trust;梅毒螺旋体抗体
梅毒是临床常见的性传播疾病,其由苍白密螺旋体感染引起,传染性较强,因螺旋体对于人体的皮肤和黏膜的亲和性较强,会继发性引起机体各个组织和脏器损伤[1]。因近年来梅毒发生率明显增高,对于梅毒临床诊断方法逐渐增多,探讨不同检测梅毒的分析也广泛开展。笔者对我院收取的1711例检测梅毒标本资料进行分析汇总如下。
1.1 一般资料 选取我院2012年1月至2012年12月收取的1711例检测梅毒标本资料进行分析,其中男性911例,女性800例,年龄3天~85岁,平均年龄(38.4±10.1)岁,阳性标本例数30例,阳性率为1.8%。1711例检测梅毒标本分别通过酶联免疫吸附试验(ELISA)、快速血浆反应素环状卡试验(RPR)、甲苯胺红不加热血清反应素试验(TRUST)进行检测。
1.2 试剂与方法
1.2.1 TRUST试剂 上海荣盛;ELISA试剂:上海科华;TP试剂:艾博生物。
1.2.2 ELISA 在每一个孔内加入50μL待测样本和50μL酶标试剂,将其轻轻的振荡混匀,进行封板,37℃水浴30min,洗板5遍后,进行扣干,每个孔内加入显色剂A和B,各50μL,混合均匀,进行封板37℃,15min加入50μL终止液,在450nm波长下测定吸光度值,空白孔调零后读取待测样品的吸光度值,大于或等于临界值为阳性。
RPR:参照试剂盒上的说明书进行操作。
TRUST:加入50μL待测样本放在纸卡的圆圈之内,通过专用针头将TRUST试剂滴入到圆圈内,通过100转/分钟,离心8min之后通过显微镜观察其凝集情况,如果凝集则为阳性。
1.3 观察指标 观察ELISA、RPR、Trust三种方法检测梅毒螺旋体抗体的结果。
1.4 统计学分析 采用统计学软件SPSS17.0建立数据库,通过卡方检验进行分析计数资料,P<0.05表示研究结果的差异有统计学意义。
ELISA、RPR、Trust三种方法检测梅毒螺旋体抗体的结果(如表1)。
表1 ELISA、RPR、Trust三种方法检测梅毒螺旋体抗体的结果
近年来我国的梅毒报告病例明显增多,呈现快速增多的趋势,梅毒流行趋势逐渐严重,有效诊断和控制显得尤为重要[2]。目前我院常用的梅毒检测方法主要有三种。酶联免疫吸附试验是应用双抗原夹心酶联免疫吸附原理进行的血清学检测方法,其在微孔板上预包被TP基因重组的抗原,向其加入辣根过氧化物酶标记的TP基因重组抗原,对血清中的抗TP-IgM和抗TP-IgG抗体进行检测,利用酶的放大性效应,对检测的灵敏度有所提高。同时抗原是采用了纯化的基因重组抗原,这样可以提高检测的特异性[3]。RPR属于非密螺旋体抗原试验,其主要是以牛心肌心脂质作为检测的抗原,对于患者血清中的抗脂质抗体进行测定,其所检测的抗体主要是针对梅毒感染后宿主细胞释放的类脂质和螺旋体表面的脂质,当梅毒螺旋体感染人体之后,对机体组织破坏进而产生抗原性心磷脂,但对于其他的对机体破坏过程中也可能产生相应的螺旋体表面脂质,进而引起RPR出现假阳性。尤其是妊娠产妇、SLT、风疹、水痘、乙肝都可以产生假阳性结果。甲苯胺红不加热血清反应素试验是利用牛心磷脂作为抗原,对产生的非特异性抗类脂质类物质的非特异性进行检测,当人体感染梅毒螺旋体后,血清中会产生一定量的抗类脂质非特异性IgG抗体,其可以和类脂质抗原共同作用形成凝集颗粒。其操作方法较简单,灵敏度特异性较低,价格便宜,检测时间较短,不需要特殊仪器可以进行抗体滴度,其不适宜对早期梅毒和晚期梅毒进行诊断,适合用于治疗过程中的梅毒患者,其滴度的变化可以反映患者临床治疗效果,还可以判定梅毒的复发和再感染,其在一些传染性疾病和胶原病患者中也可能出现假阳性反应。综上所述,ELISA对疑似梅毒患者有确证作用,但是其最终确诊应结合临床综合判断,TRUST试验则可作为梅毒患者疗效观察及复发监测试验进行临床应用。
[1]郑玉平,张杰,严佳斌.梅毒螺旋体抗体筛查及其临床意义[J].临床和实验医学杂志,2012,11(23):1878-1879.
[2]马荣,李晓兰,赵成艳.RPR、ELISA、TP—HA三种方法检测梅毒抗体的临床应用评估[J].放射免疫学杂志,2011,24(4):454-455.
[3]缪亚梅,王文鼎.常用梅毒抗体检测方法的比较[J].海南医学,2013,24(8):1168-1170.
R446.11
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1007-8517(2013)21-0052-01
2013.09.16)