肺鳞癌中MRP1和BCRP的表达及与预后的关系

郭艳茹

(唐山市工人医院，河北 唐山 063000)

肺鳞癌多见于男性，其病变进展快，预后不良。手术治疗是重要方法，术后化疗有重要价值。肿瘤进展过程中，多种蛋白发生明显的改变，对肿瘤起重要促进作用〔1〕。体内外研究表明由药物转运蛋白介导的药物外排增加是肺鳞癌耐药的主要机制，目前发现的药物转运蛋白主要是ABC转运蛋白家族的MRP1和BCRP，二者表达与肿瘤进展有明显的作用〔2，3〕。本实验应用免疫组织化学技术检测肺鳞癌中MRP1和BCRP的表达，探讨MRP1和BCRP表达及预后价值。

1 材料与方法

1.1 临床材料 我院在2005年1月至2005年12月行肺鳞癌手术切除术后的患者89例，其中男60例，女29例，年龄56～79〔平均(65.4±6.5)〕岁。留取术后的蜡块组织及完整临床资料作为观察组。纳入标准:①符合2008年WHO中关于肺鳞癌的诊断标准;②病理学医师再次行HE切片并阅片确认。排除标准:①术前行化疗或放疗的患者;②伴有肺癌其他类型的患者;③其他器官的鳞癌转移到肺的患者。选择上述患者手术切端并经病理医师证实为正常的肺组织作为对照组。

1.2 免疫组织化学方法 所有标本均经10%中性甲醛固定，切片后进行MRP1和BCRP的检测，均应用免疫组化SP法，DAB染色。MRP1和BCRP抗体的浓缩液均购自北京中杉金桥公司，由病理技师进行稀释，选择最佳配比浓度。对实验过程全程监控，避免不必要的误差出现。

1.3 免疫组化结果的判读 MRP1和BCRP蛋白的表达结果均由病理主治医师进行判读。MRP1和BCRP蛋白均定位于细胞膜和(或)细胞质中，棕黄色为阳性结果，计数10个染色密集的肿瘤区域，计算阳性率，取平均值定为阳性率。以阳性率＜25%为阴性，以阳性率≥25%为阳性。

1.4 统计处理 应用SAS6.12软件进行χ2检验、相关性分析和生存分析。

2 结果

2.1 两组MRP1和BCRP表达的比较 与对照组比较，观察组中MRP1和BCRP高表达(P＜0.001)。见表1。

2.2 观察组中MRP1和BCRP的表达与临床病理特征的关系观察组中MRP1和BCRP的表达均与肿瘤分化程度、胸膜侵犯、淋巴结转移、Ki67的表达及临床分期密切相关(P＜0.05)。见表2。

2.3 MRP1和BCRP在观察组的表达关系 经线性相关分析显示，肺鳞癌中MRP1和BCRP的表达未见明显相关性(P=0.311 3)。

2.4 观察组中MRP1和BCRP的表达与预后的关系 随访时间4～60个月，经生存分析显示，观察组中MRP1的表达与预后相关，而BCRP的表达与预后无明显的相关性。即肺鳞癌中MRP1高表达患者的预后差。

表1 观察组和对照组中MRP1和BCRP阳性表达的比较〔n=89，n(%)〕

表2 观察组中MRP1和BCRP的阳性表达与临床病理特征的关系〔n(%)〕

3 讨论

肺鳞癌在病变进展过程中，生物学行为的评估至关重要。引起生物学行为改变的是多种基因和蛋白，其不仅与预后相关，也与肿瘤治疗中出现的耐药有密切关系。多药耐药蛋白在肿瘤进展中可有明显的促进作用〔4，5〕。BCRP途径为一种新的ABC转运蛋白，含有633个氨基酸残基，也具有将化疗药物如米托蒽醌、多柔比星等从肿瘤细胞泵出的功能。也有研究认为BCRP表达的肿瘤细胞对米托蒽醌、阿霉素、柔红霉素等均产生交叉耐药，但是对长春碱、紫杉醇和顺铂敏感，因此可以作为临床用药的依据〔6，7〕。MRP1也是 ABC 家族的成员，刘欣燕等〔8〕认为MRP1有两种主要功能:①位于细胞膜发挥化疗药物外排的作用;②位于细胞质内产生囊泡包裹药物，起隔离作用，避免药物损伤细胞核。MRP1还可以对一些具有生物活性的重要有机阴离子共扼结合物的分泌起关键作用，主要是以GSH、葡萄糖醛酸和硫酸盐有机阴离子共扼结合物的形式产生〔9〕。在肺组织中，合成MRP1后经高尔基体加工，再运输到细胞质和细胞膜表面产生排泌功能。

本实验显示MRP1和BCRP高表达对肿瘤进展有一定影响。MRP1和BCRP虽然均为耐药相关的蛋白，但是其作用的通路并不一致。MRP1在肺鳞癌中是多元性作用的蛋白，对肿瘤的进展及预后均有意义，而BCRP对肿瘤进展有促进作用，与预后无关，因此其在肿瘤中的功能可能更少。MRP1和BCRP均具有将识别的化疗药泵出细胞的作用，因此对药物选择性的应用可以提供理论支持。但是由于肿瘤耐药形成过程中常是多因素的综合作用，而且可以在不同机制的通路中出现协同作用，使肿瘤的生物学行为和治疗变得更复杂。

1 张桂香，刘新兰，李金平.MDR1、BCRP和LRP基因在乳腺癌组织中的表达及其意义〔J〕.西安交通大学学报(医学版)，2012;33(1):79-83.

2 丛芳圆，崔 洁，刘新兰，等.P-gp、BCRP、LRP在乳腺 癌组织中的表达及其意义〔J〕.宁夏医科大学学报，2010;32(5):589-92.

3 杜方兵，梅小冬.多药耐药相关蛋白2及其在肿瘤耐药中的研究进展〔J〕.现代肿瘤医学，2008;16(3):478-80.

4 郝 军，王 妍，李庆昌，等.MRP在非小细胞肺癌和正常肺组织中的表达及其预后意义的研究〔J〕.中国肺癌杂志，2005;8(1):32-5.

5 李小琴，李 坚，陈 萍，等.膜转运蛋白基因在非小细胞肺癌中的表达及预后意义〔J〕.南京医科大学学报(自然科学版)，2008;28(9):1150-3.

6 王 蓓，徐熙善，骆健生，等.乳腺癌耐药蛋白在癌组织中的表达及临床意义〔J〕.中国癌症杂志，2006;16(1):58-62.

7 刘新兰，黄 英，李云霞，等.耐药蛋白P-gp、BCRP及LRP在乳腺癌原发灶和腋窝淋巴结转移灶中表达的比较〔J〕.第二军医大学学报，2011;32(11):1171-3.

8 刘欣燕，张书敏，邢秋月，等.非小细胞肺癌P-gp、LRP、MRP和GST-Ⅱ表达及其临床意义〔J〕.现代肿瘤医学，2009;17(8):1444-6.

9 罗文军，易永芬，于冬青，等.大肠癌组织中肺耐药蛋白和多药耐药相关蛋白的表达及临床病理意义〔J〕.重庆医科大学学报，2004;29(6):769-73.