GP73在原发性肝癌诊断中的应用及临床意义

赵京忠，李 嘉，樊春红，张恒辉

（北京大学人民医院1.检验科；2.肝病科，北京100044）

原发性肝癌（HCC）是世界上第五种最常见癌症，HCC标化发病率为21／10万，死亡率为20.2／10万［1］。HCC死亡率高。如能及早诊断，可以采取手术切除或射频消融等有效手段进行干预，可改善预后。

高尔基体蛋白73（GP73）又称高尔基体Ⅱ型跨膜蛋白，存在于高尔基体上。2000年由Kladney首先描述［2］。2005年Blockz应用352例患者的研究显示，对于早期HCC的诊断，GP73要早于AFP［3］。至今，全世界多个研究组对GP73进行研究，但缺乏适于临床大规模应用的办法。本研究旨在探讨GP73用于HCC的诊断意义及在术后监测方面的应用。

1 资料与方法

1.1 研究对象 纳入研究的为我院2010年3月至2011年3月收治的HCC患者126例，肠癌患者10例，肺癌患者20例，卵巢癌患者14例，胃癌患者20例，乳腺癌患者6例及同期健康查体人员107例。HCC患者诊断标准按照2010年NCCN指南操作。

1.2 实验方法

1.2.1 标本采集 患者及查体者均清晨空腹采集静脉血3ml，采血管为一次性真空促凝管，标本采集后室温自然凝集30分钟，以3 000r／min离心10分钟，取上层血清放入EP管并尽快存放于－70℃冰箱待检。

1.2.2 血清GP73测定GP73 采用酶联免疫吸附原理检测，试剂盒由北京热景生物技术有限公司提供，实验操作完全按产品说明书要求进行。测定时将血浆快速复融至室温，并尽快检测。

1.2.3 AFP测定 采用电化学发光法检测，试剂由Roche公司提供，规格为100T／盒。仪器使用Elecsys170全自动电化学发光分析仪检测，Roche公司生产。

1.3 统计学处理 采用SPSS13.0软件进行数据分析。统计结果描述以±s表示，GP73使用单因素方差分析，以P＜0.05差异有统计学意义。

2 结果

2.1 GP73在HCC组中的浓度显著高于其他肿瘤疾病组及健康对照组的浓度（表1）。

表1 GP73在多种肿瘤患者中血清浓度结果

HCC组GP73浓度与其他各肿瘤组（肠癌，肺癌，卵巢癌，胃癌，乳腺癌）及健康对照组相比均有统计学意义，P＜0.001。

2.2 相关分析：AFP与GP73检测结果r＝0.434，没有显著相关性。也就是说，GP73为HCC独立判断因素。

2.3 取100例HCC患者测定GP73与AFP检测灵敏度结果，见表2。

可见，单独使用AFP阳性率为52%，单独使用GP73阳性率为64%，如将两指标联合检测将可使HCC检出率达到88%，显著提高阳性率。

2.4 随访HCC肝手术后41例生存，20例死亡患者GP73浓度变化情况，结果如表3。

表2 HCC患者GP73与AFP检测灵敏度分析

可见，术后GP73浓度逐渐下降，且1年后观测值生存组下降显著快于死亡组患者。GP73用于临床术后监测有一定参考指导意义。

表3 HCC随访1年GP73浓度（ng／ml）变化情况

3 讨论

目前AFP用于HCC主要是筛查，有一定的漏检率，而HCC早期的发现至关重要，故寻找优于AFP的常规检查指标意义重大。研究发现GP73近些年用于HCC的诊断有一定的价值。

GP73即Ⅱ型高尔基体膜蛋白，是一个跨膜糖蛋白，正常情况下通过一个膜生成结构域锚定在顺面高尔体膜上［2］。在弗林蛋白酶的作用下发生水解反应，裂解其胞外结构域，并释放到细胞外液中。在正常肝脏，GP73主要在胆管上皮细胞中表达，而在肝细胞则很少表达甚至不表达［4］。

本文结果显示GP73在HCC中有较高的表达，显著高于其他肿瘤。可以作为HCC的一种血清标志物。实验结果显示，在其他肿瘤患者中，GP73也有一定程度的升高，可见HCC可能是一种有重要临床价值的辅助诊断的血清肿瘤标志物。但本实验中选取的肠癌，乳腺癌患者较少，可能对分析结果有一定影响。

研究显示，HCC患者GP73阳性率64%，AFP阳性率52%，对于HCC的筛查显然阳性率偏低，不能满足临床的强烈需求，而如果将GP73与AFP联合检测将可使阳性率升至88%，对于筛查效果有较大的提高。资料表明，AFP在HCC的显著升高发生于HCC发生侵袭时，而GP73不受癌肿大小，数量侵袭等因素影响［5］。但GP73与AFP并无相关性，GP73为HCC一个独立的判断因素。

我们对有1年随访记录的61例HCC接受手术治疗的患者进行分析显示，随访患者术后GP73浓度均呈现下降趋势，且生存组比死亡组下降趋势更明显。故我们认为GP73对HCC患者手术预后的判断有一定价值，可作为有效的参考指标。

目前，AFP仍然是临床用于HCC诊断的最重要筛查指标，GP73的相关分子机制尚未明了，而其临床应用价值已经得到一定验证。故GP73的应用以及GP73与AFP的联合检测可能将为临床提供更好的诊断参考，指导HCC的早期诊断，治疗与预后观察，降低HCC复发率及死亡率。

［1］徐海峰，杨华渝，张宏冰，等.改变肝癌早期诊断和治疗现状的新肝癌血清标志物［J］.基础医学与临床，2008，28：104.

［2］Kladney RD，Bulla GA，Guo L，et al.GP73，a novel Golgi－localized protein upregulated by viral infection［J］.Gene，2000，249（1－2）：53.

［3］Block TM，Comunale MA，Lowman M，et al.Use of targeted glycoproteomics toidentify serum glycoproteins that correlate with liver cancer in woodchucks and humans［J］.Proc Natl Acad Sci USA，2005，102（3）：779.

［4］Kladney RD，Cui X，Bulla GA，et al.Expression of GP73，a resident Golgi membrane protein，in viral and nonviral liver disease［J］.Hepatology，2002，35（6）：1431.

［5］Benzoni E，Lorenzin D，Favero A，et al.Liver resection for hepatocellular carcinoma：a multivariate analysis of factors associated with improved prognosis.The role of clinical，pathological and surgical related factor［J］.Tumori，2007，93（3）：264.