白枪杆的化学成分研究（Ⅰ）Δ

谭兴起，郭良君，郑巍，谭昌恒（1.解放军第85医院，上海 010；.解放军第98医院，浙江 湖州 1000；.中国科学院上海药物研究所新药研究国家重点实验室，上海 010）

白枪杆（Fraxinus malacophylla Hemsl.）为木犀科梣属植物，是我国特有植物，分布于广西、云南[1]。其味苦、涩，性寒，具有清热、利尿、通便的功效，主治膀胱炎、膀胱结石、小便不利、便秘、疟疾、高烧鼻衄等症。《科学的民间药草》记载白枪杆的根皮、树皮、树叶均有显著的解热作用。临床试验结果表明，白枪杆根皮对急性和慢性间日疟是特效的治疗剂，对恶性疟疾和四日疟也有效[2]。然而，关于该植物的化学成分研究还较少，《中药大辞典》中记载白枪杆树皮含新宁碱、鞣质、树脂、糖类、香豆素等[2]；He ZD等[3]曾从白枪杆中分离得到过两个裂环烯醚萜葡糖苷化合物。为了更进一步地寻找白枪杆中活性成分，笔者对白枪杆树皮80%的乙醇提取物进行了化学成分研究。

1 材料

1.1 仪器

UV-1型三用紫外分析仪（上海顾村电光仪器厂）；201D型升降恒温水油浴锅（杭州惠创仪器设备有限公司）；SHB-ⅢA型循环水式多用真空泵（上海预康科教仪器设备有限公司）；RE-201D型减压旋转蒸发仪（杭州惠创仪器设备有限公司）；BSZ-100型自动部分收集器（上海沪西分析仪器有限公司）；DRX-400 MHz型核磁共振（NMR）仪（德国Bruker公司）；ZAB-ZF型质谱（MS）仪（英国VG公司）。

1.2 试剂

氯仿、甲醇、乙醚、石油醚、乙酸乙酯、硫酸、冰醋酸均为分析纯，乙醇为医用95%乙醇，水为自制蒸馏水；薄层层析用硅胶粉（200～300目）和薄层层析用硅胶板均购自烟台江友硅胶开发有限公司。

1.3 药材

白枪杆树皮于2011年4月采自云南蒙自县，经解放军第98医院药械科郭良君副主任药师鉴定其来源为木犀科植物白枪杆（F.malacophylla Hemsl.）。

2 提取与分离

取白枪杆干燥树皮15kg，用80%乙醇浸泡7天，连续浸泡3次，合并浸出液，回收蒸干；浸膏用水加热溶解，滤过，分别用石油醚、氯仿、正丁醇萃取，每个批次萃取3次，分别蒸干萃取液，得到石油醚、氯仿、正丁醇部分。本试验对正丁醇部分进行分离。将正丁醇部分用大孔树脂经10%、20%、30%的乙醇溶液梯度洗脱，分别合并浓缩，得到10%、20%、30%三部分，再综合运用硅胶、凝胶等色谱手段按以下方法对这三部分的化学成分进行分离纯化，得到化合物1～10。

10%部分经氯仿-甲醇及氯仿-甲醇-水系统梯度洗脱。氯仿-甲醇（15∶1，V/V）洗脱部分经处理得到3个化合物:经甲醇重结晶得到化合物9；再经70%甲醇凝胶纯化，得到化合物4和化合物8。氯仿-甲醇（30∶1→40∶1，V/V）洗脱部分经甲醇（略带水）重结晶得到白色晶体，即化合物7。氯仿-甲醇-水（7∶1∶1，V/V/V）洗脱部分先后经甲醇、氯仿-甲醇（1∶1，V/V）凝胶纯化，得到化合物2和化合物3。

20%部分经氯仿-甲醇系统梯度洗脱。氯仿-甲醇（10∶1，V/V）洗脱部分经甲醇凝胶纯化，再用氯仿-甲醇（10∶1，V/V）重结晶，得到略黄色晶体，即化合物1；氯仿-甲醇（5∶1，V/V）洗脱部分经甲醇凝胶纯化，再用氯仿-甲醇（5∶1，V/V）重结晶，得到化合物10。

30%部分经氯仿-甲醇系统梯度洗脱。氯仿-甲醇（10∶1，V/V）洗脱部分经甲醇-水（7∶3，V/V）凝胶纯化，得到化合物6，再经硅胶用氯仿-甲醇系统梯度洗脱[氯仿-甲醇（20∶1→15∶1→10∶1，V/V）]，得到化合物5。

各化合物的化学结构式见图1。

图1 化学结构式Fig 1 Chemical structure

3 结构鉴定

化合物1:淡黄色晶体，熔点为161～163℃，分子质量为194，分子式为C10H10O4。LC-MS（液质联用）:193（M-H）－；163（M-MeO）+。1H-NMR（400 MHz，DMSO）δ:3.72（3H，s，—OCH3），7.17（1H，d，J＝2.0 Hz，H-2），6.87（1H，d，J＝7.8 Hz，H-5），7.03（1H，dd，J＝7.8，2.0 Hz，H-6），6.27（1H，d，J＝16.0 Hz，8-H），7.54（1H，d，J＝16.0 Hz，9-H）。13C-NMR（100 MHz，DMSO）δ:127.6（C-1），115.2（C-2），146.3（C-3），148.7（C-4），115.3（C-5），122.5（C-6），145.9（C-7），116.0（C-8），167.8（C-9），51.5（—OCH3）。以上数据与文献[4]报道基本一致，故鉴定该化合物为咖啡酸甲酯。

化合物2:浅黄色粉末，分子质量为342，分子式为C15H18O9。LC-MS:365（M+Na）+，707（2M+Na）+；341（M-H）-。参考文献[5]，可以判断13C-NMR数据有一个α-D-葡萄吡喃糖单元。结合文献[6]可知，Glc-1位的化学位移95.79提示被酯化。通过归属数据，推断该化合物为1-O-咖啡酰基-α-D-葡萄吡喃糖。化合物2、3的NMR数据见表1。

表1 化合物2、3的NMR数据Tab 1 NMR data of compound 2，3

化合物3:淡黄色粉末，分子质量为342，分子式为C15H18O9。LC-MS:365（M+Na）+，707（2M+Na）+；341（M-H）－。具体碳氢信号归属见表1。光谱数据与文献[6]报道一致，故鉴定该化合物为1-O-咖啡酰基-β-D-葡萄吡喃糖。

化合物4:白色结晶（甲醇），熔点为104～105℃，分子质量为314，分子式为C14H18O8。ESI-MS（电喷雾电离质谱）:337（M+Na）+，651（2M+Na）+。化合物4的NMR数据见表2。以上数据与文献[7]对照基本一致，故鉴定该化合物为存额阿塔斯德A。

表2 化合物4的NMR数据Tab 2 NMR data of compound 4

化合物5:白色粉末，分子质量为418，分子式为C18H26O11。 ESI-MS:441（M+Na）+。1H-NMR（400 MHz，DMSO）δ:1.78（3H，d，J＝7.2 Hz，H-10），2.41（1H，m，H-6b），2.68（1H，dd，J＝3.6，14.8 Hz，H-6a），3.42（3H，s，H-7，—OCH3），3.83（3H，s，H-11，—OCH3），3.92（1H，d，J＝5.2 Hz，H-5），4.72（1H，d，J＝7.6hz，H-Glc端基），5.94（1H，s，H-1），6.15（1H，s，H-8），7.48（1H，s，H-3）。13C-NMR（100 MHz，DMSO）δ:92.9（C-1），153.1（C-3），108.2（C-4），30.1（C-5），40.1（C-6），172.1（C-7），122.1（C-8），129.4（C-9），13.1（C-10），166.2（C-11），51.2（C-11，—OCH3），51.4（C-7，—OCH3）。以上数据与文献[8]报道基本一致，故鉴定该化合物为7，11-二甲酯油苷。

化合物6:白色粉末，熔点为147～148℃，分子质量为524，分子式为 C25H32O12。LC-MS:547（M+Na）+；569（M+HCOO－）－。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ:Aglycone:5.90（1H，s，H-1），7.51（1H，s，H-3），4.10（1H，m，H-5），2.42（1H，dd，J＝9.3，14.1 Hz，H-6α），2.81（1H，dd，J＝4.4，14.1 Hz，H-6β），6.08（1H，q，J＝7.0 Hz，H-8），1.64（3H，d，J＝7.1 Hz，H-10），3.71（3H，s，—OCH3）；Phenylethyl:4.21（2H，t，J＝7.0 Hz，H-1′），2.82（2H，t，J＝7.0 Hz，H-2′），7.05（2H，d，J＝8.3 Hz，H-4′，8′），6.71（2H，d，J＝8.4 Hz，H-5′，7′）；Glucose:4.80（1H，d，J＝7.7 Hz，H-1″），3.20～3.35（4H，H-2″～5″）。13C-NMR（100 MHz，CD3OD）δ:Aglycone:95.6（C-1），155.6（C-3），109.8（C-4），32.3（C-5），41.7（C-6），173.7（C-7），125.4（C-8），130.9（C-9），14.1（C-10），169.1（C-11），52.4（—OCH3）；Phenylethyl:67.4（C-1′），35.6（C-2′），130.5（C-3′），131.5（C-4′，8′），116.8（C-5′，7′），157.6（C-6′）；Glucose:101.3（C-1″），75.2（C-2″），78.4（C-3″），72.0（C-4″），78.9（C-5″），63.2（C-6″）。以上数据与文献[9]报道一致，故鉴定该化合物为（8Z）-橄榄苦苷。

化合物7:白色结晶（甲醇），熔点为225～227℃，分子质量为 180，分子式为C6H12O6。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ:3.18（1H，dd，J＝9.1 Hz，H-2），3.40（2H，dd，J＝2.7，9.9 Hz，H-4，6），3.54（2H，t，J＝9.7 Hz，H-1，3），4.12（1H，t，J＝2.7 Hz，H-5），4.40～4.50（6H，m，6×OH）。13C-NMR（100 MHz，CD3OD）δ:73.8（C-4，6），75.0（C-l，3），74.8（C-2），77.0（C-5）。以上数据与文献[10]报道一致，故鉴定该化合物为肌醇。

化合物8:白色结晶，熔点为104～105℃，分子质量为110，分子式为 C6H6O2。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ:7.65（2H，s，—OH），6.84（2H，m，H-3，6），6.56（2H，m，H-4，5）。13C-NMR（100 MHz，CD3OD）δ:143.5（C-1，2），121.7（C-3，6），125.4（C-4，5）。以上数据与文献[11]报道基本一致，故鉴定该化合物为邻苯二酚。

化合物9:白色粉末，分子质量为208，分子式为C8H16O6。ESI-MS:231（M+Na）+，439（2M+Na）+。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ:1.21（3H，t，J＝8.1 Hz，—CH3），3.88（2H，m，J＝8.1 Hz，—CH2—），3.81（2H，m），3.52（1H，m，—OH），3.35（3H，m，3×OH），4.81（1H，d，J＝7.0 Hz）。13C-NMR（100 MHz，CD3OD）δ:112.0（C-l），80.2（C-2），75.9（C-3），83.9（C-4），70.1（C-5），64.7（C-6），63.6（—CH2—），15.5（—CH3）。以上数据与文献[12]报道基本一致，故鉴定该化合物为α-乙基-D-呋喃葡糖苷。

化合物10:黄色不定形粉末，分子质量为178，分子式为C7H14O5。13C-NMR（100 MHz，CDCL3）δ:103.0（C-1），74.2（C-2），73.9（C-3），75.3（C-4），72.7（C-5），18.4（C-6），57.5（—OCH3）。以上数据与文献[12]报道基本一致，故鉴定该化合物为β-甲基-L-吡喃鼠李糖苷。

4 结论

本研究中，笔者从白枪杆树皮中一共分离鉴定出10个化合物，均为首次从该植物中分离得到，补充了该植物的化学成分数据库，可为进一步了解该植物的特性提供试验依据。

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